烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金(200306)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：田易董征学林恒王勇彭代智更多>>
- 相关机构：贝尔法斯特女王大学第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体的构建及测序被引量：4
- 2006年
- 目的利用RNA干扰技术,以人CCL20基因为靶基因,设计CCL20基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法设计并合成人CCL20基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经SpeⅠ和SalⅠ双酶切线性化的pHSER dsRNA GFP SIN质粒上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。结果将合成的两对人CCL20基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后,分别克隆到线性化的pHSER dsRNA GFP SIN载体质粒上。在氨苄青霉素培养基条件下,筛选出相应的阳性菌落,经DNA测序鉴定确实为所需序列。结论构建成功了2对人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,可进一步用于干扰CCL20基因的mRNA转录,从而为制备CCL20基因表达抑制型的人角朊干细胞奠定基础。
- 董征学彭代智刘敬周新田易李芳严泉林恒王勇周光前
- 关键词：RNA干扰慢病毒表达载体
