贵州省国际科技合作计划(2013) 作品数:43 被引量:120 H指数:5 相关作者: 刘济明 禹文峰 官志忠 颜强 石蓓 更多>> 相关机构: 贵州大学 贵州医科大学 遵义医学院附属医院 更多>> 发文基金: 贵州省国际科技合作计划 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 化学工程 更多>>
小蓬竹群落优势种群的生态位特征 被引量:3 2014年 为小蓬竹引种栽培提供指导依据,通过样方法对贵州罗甸、平塘3块不同样地小蓬竹群落中各物种的重要值、生态位宽度、生态位相似性比例进行研究。结果表明,群落中小蓬竹的重要值最高,为792;生态位宽度值最大,为2.8904;小蓬竹与群落内榆树、女贞、云实、黄连木和椤木石楠的生态位相似性比例较高,分别为0.61、0.66、0.68、0.71和0.69。结论:小蓬竹在群落中的适应能力及利用资源的能力最强,但当环境资源不足时,小蓬竹与群落内生态位相似性比例较高的植物之间存在激烈竞争,小蓬竹的建群种地位会受到威胁,因此,引种时应避免与榆树、女贞、云实、黄连木、椤木石楠一起栽培。 池馨 刘济明 颜强 李鹏 文爱华 高攀关键词:小蓬竹 生态位宽度 降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用 被引量:2 2015年 目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。 龙仙萍 邓文文 汪松 王冬梅 盛瑾 石蓓 赵然尊关键词:血管平滑肌细胞 降钙素基因相关肽 心肌素 表型改变 小蓬竹植物内生真菌多样性 被引量:3 2016年 以喀斯特地区特有濒危物种小蓬竹(Drepanostachyum luodianense Keng f.)为研究对象,采用组织块分离法分离内生真菌,结合形态学特征与分子生物学鉴定的方法对分离到的菌株进行鉴定。研究其内生真菌的多样性,研究结果表明:从180个供试组织块中分离得到105株内生真菌,可划分为19个属,31种(含2个可能的新种),相似度为95%~100%。在属的分类水平上,以节菱孢霉属(Arthrinium)、镰刀菌属(Fusarium)、木霉属(Trichoderma)、炭角菌属(Xylaria)为优势菌属,分别占菌株总数量的12.38%和9.52%、6.67%、6.67%。小蓬竹内生真菌Shannon-Wiener多样性指数(H)为2.800,Simpson指数(D)为0.932,均匀度指数(E)为0.604,且在不同组织部位中小蓬竹内生真菌多样性也存在一定差异。Jaccard指数与Sorenson指数变化趋势一致,均为根茎的相似性最低,茎叶的相似性最高,而根和叶的居于两者之间。 刘济明 柳嘉佳 颜强 熊雪 李丽霞 骆畅关键词:小蓬竹 内生真菌 多样性 三种扩散成像技术在乳腺良恶性病变鉴别诊断中的对比研究 被引量:16 2019年 目的探讨扩散加权成像(DWI)、体素内不相干运动(IVIM)和扩散峰度成像(DKI)各参数对乳腺良恶性病变的诊断价值。方法回顾性分析经病理证实的51例乳腺病变患者,共58个病灶,其中良性病灶22个,恶性病灶36个。所有患者均采集T1WI、短时间反转恢复(STIR)、动态增强磁共振成像(DCE-MRI)、DWI、IVIM和DKI序列,通过图像后处理工作站测量表观扩散系数(ADC)、慢速表观扩散系数(slow ADC)、快速表观扩散系数(fast ADC)和平均扩散峰度(MK)。采用独立样本t检验比较良恶性病变各参数值差异,采用配对t检验比较ADC与slow ADC值差异。应用受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)计算各参数诊断乳腺良恶性病变阈值、敏感度及特异度,多参数联合诊断效能采用Logistic回归分析。观察者间一致性分析采用组内相关系数(ICC)。结果乳腺良性病变与恶性病变的ADC、slow ADC和MK值均有统计学差异(P<0.001),ADC与slow ADC值差异无统计学意义。当ADC、slow ADC、fast ADC和MK诊断阈值设为1.123×10-3mm2/s、0.893×10-3mm2/s、4.911×10-3mm2/s和0.920时,敏感度和特异度依次分别为80.510%和77.272%、86.120%和77.272%、75.000%和68.181%、80.510%和86.363%。联合slow ADC和MK值诊断效能最大(AUC=0.902,敏感度88.889%,特异度90.909%)。fast ADC值ICC为0.67,一致性中等,ADC、slow ADC和MK值观察者间一致性良好(ICC>0.90)。结论采用DWI、IVIM和DKI获得的相关参数有助于乳腺良恶性病变鉴别诊断,联合slow ADC和MK的诊断效能最高。 宋赣军 史军华 李强 刘军委 张道恩 徐高强 张国明 谢鹏 张体江关键词:乳腺肿瘤 扩散加权成像 慢病毒载体介导的降钙素基因相关肽转染对心脏干细胞活力的影响 被引量:2 2016年 目的:探讨携带降钙素基因相关肽(CGRP)的慢病毒体外转染对大鼠c-kit^(pos)心脏干细胞(c-kit^+ CSCs)活力的影响。方法:无菌条件下取出SD大鼠的心耳,采用酶消化法结合免疫磁珠法获取c-kit^+ CSCs,并通过流式细胞术鉴定;将携带目的基因的重组慢病毒载体(Lv-EGFP-CGRP)及空病毒载体(Lv-EGFP)分别转染至ckit^+ CSCs,实验分为3组:Lv-EGFP-CGRP-CSCs组、Lv-EGFP-CSCs组和CSCs组;在荧光显微镜下观察转染情况,采用流式细胞技术测定其转染率,采用ELISA测定各组培养上清液中CGRP的浓度,采用CCK-8法检测慢病毒转染对c-kit^+ CSCs活力的影响。结果:成功分离培养获取c-kit^+ CSCs,流式细胞术鉴定显示其高表达c-kit(为91.0%),低表达CD45及CD34;成功转染慢病毒的大鼠c-kit^+ CSCs可表达绿色荧光,48 h后可稳定表达,感染复数(MOI)值为20时,荧光显微镜观察及流式细胞术结果均显示转染率达80%以上;ELISA结果示,Lv-EGFP-CGRPCSCs组细胞上清液CGRP分泌量较Lv-EGFP-CSCs组和CSCs组增加(P<0.01);CCK-8检测细胞活力的结果显示,慢病毒转染不影响c-kit^+ CSCs的活力。结论:携带CGRP的慢病毒载体可成功转染至c-kit^+ CSCs,转染Lv-EGFP-CGRP后的c-kit^+ CSCs可合成和分泌CGRP蛋白至上清液中,且转染后c-kit^+ CSCs的活力未受影响。这为基因工程细胞疗法治疗心肌梗死提供了新的理论及实验依据。 荣季冬 李玲 龙仙萍 邓文文 石蓓关键词:降钙素基因相关肽 慢病毒载体 心脏干细胞 细胞活力 小蓬竹根际土壤可培养细菌多样性 被引量:4 2016年 以罗甸县小蓬竹根际土壤为研究对象,采用稀释平板法调查土壤微生物数量,并挑选菌落形态存在差异的细菌菌株,对其16S r DNA序列进行分析,构建系统发育树,研究根际土壤可培养细菌多样性,为小蓬竹的保护以及喀斯特山地土壤微生物多样性研究提供一定的理论依据和技术支撑。结果表明:小蓬竹根际土壤微生物数量由多到少为细菌>放线菌>真菌,干土中所含细菌、真菌、放线菌的平均数量分别为8.32×107、9.19×105、2.32×106CFU/g。分离纯化共获得菌落表型差异的细菌41株,16S r DNA有效序列进行Blast比对,可划分为26个分类单元,ShannonWiener多样性指数H为1.067 9,丰富度指数S为7,均匀度指数J为0.548 8,优势度指数D为0.521 7。基于细菌16S r DNA序列建立系统发育树,结果表明:30株细菌属于厚壁菌门(Firmicutes)(按单元种类数计算所占比例为73.17%),10株属于变形菌门(Proteobacteria)(24.39%),1株属于拟杆菌门(Bacteroidetes)(2.44%),其中芽孢杆菌属(Bacillus)占绝对优势。由结果可知,小蓬竹根际土壤中含有较为丰富的微生物多样性。 李鹏 刘济明 文爱华 高攀 王军才 莫会影关键词:小蓬竹 根际土壤 可培养细菌 微生物多样性 降钙素基因相关肽对c-kit^+心脏干细胞生存活力的影响 被引量:1 2016年 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧状态下c-kit^+心脏干细胞(c-kit^+CSC)生存活力的影响及其可能的机制。方法体外建立细胞缺氧模型,实验随机分为缺氧细胞组、CGRP+缺氧细胞组、CGRP+CGRP8-37+缺氧细胞组和对照组(不缺氧细胞);通过CCK-8法检测细胞的活力,采用流式细胞仪和线粒体膜电位法来检测细胞凋亡。结果在缺氧状态下,缺氧细胞组细胞增殖活力较对照组下降,CGRP作用缺氧细胞后不同时间点,与缺氧细胞组比较,细胞增殖活力均增加(P<0.05),尤其以30 min和60 min最为明显;与CGRP+缺氧细胞组比较,CGRP+CGRP8-37+缺氧细胞组在30 min和60 min细胞增殖活力明显下降(P<0.05)。流式细胞仪结果显示:与对照组比较,缺氧细胞组早期凋亡率最高(P<0.05);与缺氧细胞组比较,CGRP+缺氧细胞组早期凋亡率降低(P<0.05);与CGRP+缺氧细胞组比较,CGRP+CGRP8-37+缺氧细胞组早期凋亡率增高(P<0.05)。线粒体膜电位结果显示:与缺氧细胞组比较,CGRP+缺氧细胞组红色荧光/绿色荧光比值增高(P<0.05);与CGRP+缺氧细胞组比较,CGRP+CGRP8-37+缺氧细胞组红色荧光/绿色荧光比值降低(P<0.05)。结论 CGRP能够促进缺氧状态下c-kit^+CSC增殖存活,抑制细胞早期凋亡。 龙仙萍 郑小宇 邓文文 石蓓关键词:降钙素基因相关肽 细胞存活率 细胞凋亡 小蓬竹内生真菌培养分离条件的优化 2021年 【目的】探明小蓬竹内生真菌合适的分离培养方法,为小蓬竹内生真菌多样性的研究提供。【方法】以喀斯特地区特有濒危物种小蓬竹[Drepanostachyum luodianense(Yi et R.S.Wang)Keng f.]为研究对象,使用次氯酸钠(NaClO)溶液作为主要消毒剂对小蓬竹组织表面进行消毒。并针对不同组织所需的NaClO溶液浓度和消毒时间设置梯度进行探索,系统优化确立小蓬竹内生真菌的分离方法。【结果】小蓬竹各组织表面消毒的最佳方法,叶为2.5%NaClO溶液浸泡1 min,茎为2.5%NaClO溶液浸泡2 min,根为5%NaClO溶液浸泡3 min;小蓬竹分离内生真菌的最佳分离条件为25%双抗PDA培养基,培养温度26℃。小蓬竹根、茎、叶在最佳表面消毒处理后的定殖率分别为83.3%、70%、100%。【结论】在最佳分离条件下,根部内生真菌分离到10~12种菌株。 颜强 柳嘉佳 刘济明关键词:小蓬竹 内生真菌 表面灭菌 小蓬竹根际土壤真菌多样性研究 被引量:3 2017年 为认识喀斯特山地适应竹种小蓬竹根际土壤微生物多样性,本文采用稀释平板法研究小蓬竹根际土壤真菌多样性。结果表明,菌落具有表型差异的真菌共33株,r DNA‐ITS进行BLAST划分为12个属24个种,相似度为75%–100%。子囊菌门真菌11个属、23个种、32株;担子菌门仅有1株,属多年卧孔菌属。子囊菌门的青霉属的菌株数量最多,占总菌株数21.21%。小蓬竹根际真菌数量为9.19×105/cfu?g,Shannon‐Wiener多样性指数H为2.2180,Margalef丰富度指数R为12,Pielou均匀度指数J为0.8926。 刘济明 熊雪 李鹏 柳嘉佳 李丽霞 骆畅关键词:小蓬竹 根际真菌 系统发育 不同天然居群小蓬竹的遗传多样性 被引量:5 2019年 从分子水平探讨不同居群小蓬竹的遗传多样性以及与环境因子的相关性,揭示其濒危原因,为小蓬竹的保护和后续开发利用提供理论支撑,助力实施极危物种最佳保护策略。运用RAPD标记技术和POPGENE32对16个小蓬竹天然居群进行遗传多样性研究和遗传变异分析。结果表明,8个RAPD随机引物共扩增出105条清晰、重复性高的条带,其中多态性条带有98条,分子量300~2000bp;物种水平多态性位点百分率PPL=93.33%,有效等位基因数Ne=1.4942,Nei’s基因多样性H=0.3005,Shannon多样性指数I=0.4586;落湾(ZY1)居群的遗传多样性水平最高(PPL=60.95%,H=0.2329,I=0.3451),[JP3]桃坡(PT1)居群的最低(PPL=44.76%,H=0.1700,[JP]I=0.2523);16个天然居群的遗传分化系数Gst=0.3231,基因流Nm=1.0478,基于Shannon’s多样性指数的分化系数[(HSP-HPOP)/HSP]为0.3429。小蓬竹居群内存在丰富的遗传多样性,各个天然居群间具有一定的遗传分化但分化水平并不高,主要的遗传变异存在于居群内部。 管睿婷 刘济明 王敏 陈敬忠 武梦瑶 童炳丽关键词:天然居群 RAPD 基因