国家自然科学基金(30270132) 作品数:15 被引量:135 H指数:8 相关作者: 刘箭 赵春梅 伊淑莹 杨金莹 孙爱清 更多>> 相关机构: 山东师范大学 中国石油大学(华东) 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
组成型表达线粒体小分子热激蛋白提高番茄抗冷性 2008年 线粒体小分子热激蛋白不但是线粒体的主要热诱导产物,而且也被低温诱导,线粒体小分子热激蛋白可以提高植物的耐热性,但目前还不清楚它是否与植物的耐冷性有关.本实验利用基因工程方法,将番茄线粒体小分子热激蛋白基因(LeHsp23.8)导入番茄,Northern-blotting及Western-blotting分析结果表明,在35sCaMV启动子的驱动下,导入的线粒体小分子热激蛋白基因呈现组成型表达.转基因番茄呈现耐低温性更强的表型,说明组成型表达线粒体小分子热激蛋白基因能提高番茄的抗冷性. 王佳颖 张景霞 王翠 杨传燕 孙艳 刘箭关键词:抗冷性 转基因番茄 RHODAMINE 过表达番茄叶绿体小分子热激蛋白提高植株的耐热性 被引量:10 2008年 小分子热激蛋白是植物受到热胁迫后的主要表达产物之一,与植物细胞耐热有密切关系.我们将由CaMV35S启动子驱动的叶绿体小分子热激蛋白cDNA导入番茄,Northern及Western印迹分析表明,叶绿体小分子热激蛋白在转基因番茄中呈现组成型表达,通过测定转基因番茄和未转基因番茄的耐热性,发现转基因株系基础耐热性强于对照,说明叶绿体小分子热激蛋白的过量表达提高了植株的基础耐热性. 杨传燕 王翠 张景霞 王佳颖 王丽 刘箭关键词:热激蛋白 叶绿体 耐热性 缺失AtArm基因导致拟南芥耐热性下降 被引量:1 2009年 生物信息学数据表明,At3g09350基因编码一种受高温诱导的armadillo,beta-catenin repeat蛋白,但其生物学功能迄今不详,我们利用基因组DNA PCR、RT-PCR和Western-blotting方法,对该T-DNA插入拟南芥突变体进行了筛选,获得At3g09350基因被敲除的T2代纯合突变体,通过表型分析,我们发现,该突变体的获得耐热性明显下降,呈现热敏感表型.分子进化分析结果表明,该基因为微牛物和动物Hsp70s的核苷酸交换因子的同源物,它的缺失可能导致Hsp70s分子伴侣活性下降,进而导致拟南芥耐热性下降. 刘箭 王翠 张景霞关键词:拟南芥 T-DNA插入突变体 HSP70 热激蛋白ClpB的结构和功能 被引量:11 2006年 ClpB是HSP100/Clp蛋白家族的一员,具有分子伴侣功能,通过溶解热胁迫下的蛋白聚集体,减少热激对细胞的伤害,ClpB与细胞的耐热性紧密相关。近年来,ClpB在植物中的功能成为研究的热点,但大多局限在植物胞质ClpB的研究,而对细胞器ClpB的研究较少。文章介绍了热激蛋白ClpB的结构、功能和植物热激蛋白ClpB的研究现状。 杨金莹 孙爱清 刘箭关键词:CLPB 分子伴侣 耐热性 组成型表达的ClpB基因提高番茄植株的耐冷性 被引量:7 2007年 用农杆菌介导法将CaMV35S启动子驱动的ClpB cDNA导入番茄,并比较了转基因和未转基因番茄的抗冷能力。当受冷胁迫后,转基因番茄比未转基因番茄表现出较轻的冷胁迫症状,并维持较高的PSII水平。 秦佳 杨金莹 伊淑莹 赵春梅 李明辉 刘箭关键词:CLPB 耐冷性 转基因番茄 番茄多胁迫诱导型LeMTshsp启动子的分子克隆及其功能分析 被引量:7 2007年 根据Southern杂交结果,选取KpnⅠ与EcoRⅠ双酶切番茄中蔬4号基因组DNA,3kb左右的酶切片段连入pBSⅡKS(+)载体,构建成含有线粒体小分子热激蛋白基因(LeMTshsp)上游2kb左右调控区的质粒文库。通过巢式PCR方法从构建的质粒文库中克隆出LeMTshsp基因上游1915bp的调控区(GenBank登录号为AB239774)。该序列含有TATA box及CAAT box等启动子基本元件,还具有6组典型的HSE元件及多个AT-rich区,另外还有许多逆境反应元件如ABRE,C-repeat—DRE,AP-1。凝胶阻滞结果表明,纯化的HsfA2蛋白与LeMTshsp启动子的HSE元件在体外具有结合活性,且与近端5组HSE的结合活性比与远端HSE的结合活性强。构建该启动子与GUS基因的融合载体,利用农杆菌介导的叶圆盘法转化番茄,GUS组织化学染色结果表明LeMTshsp启动子对热激、低温、外源ABA及重金属胁迫都有应答。 伊淑莹 孙爱清 赵春梅 刘箭关键词:番茄 启动子 逆境 克隆 番茄calnexin基因的克隆及胁迫表达分析 被引量:3 2006年 Calnexin是内质网中重要的类凝集素分子伴侣,其主要作用是辅助糖基化蛋白的折叠和装配,调节内质网中的Ca2+稳态平衡和Ca2+信号传导过程。从番茄(Lycopersicon esculentum)的cDNA文库中克隆到calnexincDNA全序列,将其命名为Lecnx61.0,并以其3’端DNA片段为探针对番茄基因组进行Southern分析,结果表明Lecnx61.0在该基因组中仅有一个拷贝;Northern和W estern分析表明,Lecnx61.0的表达还受热激、冷害、盐害和内质网应激诱导剂衣霉素的诱导,但对干旱胁迫没有明显的反应。LeCNX 61.0蛋白对Ca2+亏缺胁迫的响应呈现组织特异性,但高浓度Ca2+并不影响各组织中LeCNX 61.0蛋白的含量,实验结果表明LeCNX 61.0蛋白可能在植物抵抗特定的环境胁迫中发挥作用。 李明辉 孙颖 赵春梅 孙爱清 胡小然 刘箭关键词:CALNEXIN 分子伴侣 环境胁迫 番茄金属蛋白酶基因LeftsH6的克隆和分子特性(英文) 被引量:5 2006年 从热处理的番茄叶cDNA文库中分离到一个全长为2213-bp的ftsH基因。该基因包括一个2019-bp的读码框,推测的蛋白前体定位到叶绿体中,序列中存在AAA结构域和Zn2+结合结构域等已知的金属蛋白酶FtsH家族的特征结构域。在已克隆的基因中,该ftsH与拟南芥ftsH6最近源,被命名为LeftsH6(Lycopersiconesculentumfilamentationtemperature-sensitiveH6)。体外蛋白酶活性分析结果表明,纯化的FtsH具有蛋白水解活性,能降解酪蛋白但不降解BSA;突变的FtsH(Zn2+结合结构域中的谷氨酸Glu472突变为谷氨酰胺Gln)失去了体外蛋白酶活性。Southern杂交结果表明,该基因在番茄基因组中是单拷贝;Northern和Western杂交均表明该基因表达被热诱导,但其表达不被低温、干旱、盐胁迫、高光等胁迫调节。首次证明了高等植物中存在能被热诱导表达的ftsH基因。 孙爱清 杨金莹 伊淑莹 赵春梅 刘箭关键词:FTSH 番茄 金属蛋白酶 未折叠蛋白应答与疾病的关系 被引量:8 2006年 在Ca2+稳态平衡紊乱、葡萄糖饥饿、错误折叠蛋白质的表达、蛋白质糖基化的抑制或胆固醇合成超载等胁迫条件下,会导致内质网内积累大量的未折叠蛋白质,形成内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),对细胞产生根本性的危害。在应激条件下,内质网会产生未折叠蛋白应答(unfolded protein responseUPR),通过改变细胞的转录和翻译过程来缓解内质网应激,维持细胞功能;但是,如果细胞长时间处于UPR条件下,则会诱导细胞凋亡。 李明辉 刘箭热激蛋白对细胞凋亡的调节作用 被引量:16 2007年 细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热激蛋白是细胞凋亡的调控因子之一。本文着重讨论了热激蛋白在细胞凋亡调节中所发挥的作用。 秦佳 杨金莹 伊淑莹 刘箭关键词:细胞凋亡 热激蛋白 CASPASE