国家质检总局科技计划项目(2011IK169)
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 相关作者：段维军陈先锋张慧丽郭立新夏侯阳更多>>
- 相关机构：宁波出入境检验检疫局宁波大学新疆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 进境台湾芹菜上一株变黑轮枝菌的鉴定被引量：5
- 2012年
- 从进境台湾芹菜组织中分离出一株菌株F03718,经形态学观察和rDNA ITS序列分析,将该分离物鉴定为变黑轮枝菌(Verticillium nigrescens)。这是首次从我国台湾进境旅客携带物芹菜中检出变黑轮枝菌。
- 段维军郭立新张慧丽刘培源夏侯阳陈先锋
- 关键词：进境芹菜
- 环介导等温扩增技术检测油棕猝倒病菌的研究被引量：1
- 2013年
- 油棕猝倒病菌是我国进境植物检疫性有害生物。试验应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术建立了一种快速敏感的油棕猝倒病菌检测方法。根据ITS区基因上的8个位点,共设计了6条引物,并对反应条件和反应体系进行优化。特异性试验结果表明,引物对油棕猝倒病菌的检测具有良好的特异性;灵敏度试验结果表明引物最低检出限为0.12 ng.μL-1比普通PCR高100倍;检测结果经SYBR GreenⅠ染色后,肉眼即可观察结果。该方法能够快速、灵敏、特异地检测油棕猝倒病菌,只需一台水浴锅就可以开展检测,非常适合基层现场检测。
- 张慧丽段维军张吉红王江岭徐瑛陈先锋
- 关键词：环介导等温扩增植物检疫性有害生物
- 基于COI基因分析的植物病原性轮枝菌条形码评价被引量：2
- 2013年
- 数以百万计的真菌种类对真菌识别构成了巨大的挑战。本研究以轮枝菌属中的重要植物病原性轮枝菌及其近似种共13种34个菌株为材料,探讨COI基因作为该属DNA条形码的可能性。结果表明,该DNA片段不存在内含子,PCR扩增与测序成功率较高,但部分测试菌种的COI基因存在种内差异大于种间差异的情况,种间和种内距离存在交叉重叠,序列鉴定成功率为73.5%,难以达到便捷、准确鉴定植物病原性轮枝菌种类的目的。因此,COI基因不宜作为植物病原性轮枝菌的DNA条形码。
- 段维军郭立新顾建锋张慧丽张祥林夏侯阳陈先锋
- 关键词：轮枝菌DNA条形码
- 应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒被引量：3
- 2012年
- 根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测,裸眼判定与仪器监测结果一致。结果证明所建立的TRSV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于TRSV的现场快速检测。
- 郭立新陈先锋徐亚飞邱志君朱迪琦段维军
- 关键词：烟草环斑病毒
- 油棕猝倒病菌实时荧光PCR检测方法被引量：3
- 2012年
- 油棕猝倒病菌(Pythiums plendens)是我国进境植物检疫性有害生物。本试验根据P.splendens rDNA ITS区序列,设计了实时荧光PCR引物pyspF/pyspR及荧光探针pyspT,建立了P.splendens荧光PCR检测方法,检测灵敏度为0.012pg/μL。
- 张慧丽王建峰段维军徐瑛高姗姗陈先锋
- 关键词：实时荧光PCR
- ITS片段作为轮枝菌DNA条形码的评价研究被引量：4
- 2013年
- 以轮枝菌属中的重要植物病原性轮枝菌及其近似种共13种35个菌株为材料,探讨ITS片段作为轮枝菌DNA条形码的可行性。结果表明,ITS成功区分了研究涉及的10个种,其PCR扩增和测序成功率为97.1%,序列鉴定成功率为94.5%,但对个别亲缘关系较近种的物种鉴别能力较弱。
- 段维军张慧丽郭立新顾建锋陈先锋张祥林夏侯阳
- 检疫性轮枝菌及其近似种的鉴定被引量：15
- 2013年
- 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)和黑白轮枝菌(V.albo-atrum)在世界范围内引起多种作物的黄萎病,属于我国重要进境植物检疫对象。本研究对采自我国部分地区和CBS保存的多种植物病原性轮枝菌,包括黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其变种大丽轮枝菌长孢变种(V.dahliae var.longisporum)、三体轮枝菌(V.tricorpus)、变黑轮枝菌(V.nigrescens)和云状轮枝菌(V.nubilum),采用生物学特性观察,结合rDNA-ITS序列分析的方法,进行了比较和分析。结果表明:不同种类轮枝菌在休眠结构形态上具有一定差异,部分菌株不产生任何休眠结构。各供试菌株在15～25℃范围内均可生长,但黑白轮枝菌在30℃下生长受到强烈抑制,而其他菌株受影响较小。对供试菌株rDNA-ITS序列分析结果表明植物病原性轮枝菌可聚为9个分支,包括三体轮枝菌、变黑轮枝菌、云状轮枝菌、V.theobromae、大丽轮枝菌、大丽轮枝菌长孢变种和3个不同的黑白轮枝菌分支,黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其长孢变种亲缘关系较近。采用生物学性状结合rDNA-ITS序列分析能够更加有效地将两种检疫性轮枝菌从其他植物病原性轮枝菌中区分出来。
- 段维军郭立新张祥林夏侯阳张慧丽陈先锋
- 关键词：大丽轮枝菌生物学特性分子鉴定
