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KLF9基因腺病毒载体的构建及其抗ROS功能: 2014年; 目的构建及鉴定KLF9基因过表达的腺病毒载体，初步研究KLF9在对抗反应活性氧方而的功能。方法克隆KLF9过表达质粒，定向克隆人穿梭载体pAdTrack—CMV，PmeI酶切线性化，转化E．coli．BJ5183（含腺病毒载体pAdEasy-1）感受态细菌，产生重组腺病毒载体。重组载体经过卡那霉素抗性筛选和限制性内切酶分析确重组后，再用Pac I线性化重组质粒，同收，转染293A细胞，7—12d包装产生病毒颗粒。利用H2O2和过表达KLF9的腺病毒处理体外培养的C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞，实时定量PCR检测KLF9和抗ROS基因（CAT、SOD2和GPx1）的表达。结果H2O2可以刺激C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞KLF9和抗ROS基因的表达上调（P〈0．05）。定虽PCR以及Western blot结果显示成功包装过表达KLF9腺病毒，感染效率达90％以上。过表达KLF9可以上调抗ROS基因的表达水平（P〈0．05）。结论初步认定KLF9基因可参与C57BL/6J小鼠原代肝脏细胞中抗ROS基因的调节。; 焦涛崔安芳常永生; 关键词：腺病毒

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国家自然科学基金(81170763)