河北省重大科技攻关项目(06780503)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：河北师范大学更多>>
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- 迟缓爱德华菌HB01外膜蛋白OmpS_2基因的克隆表达及其免疫原性研究被引量：7
- 2011年
- 目的:构建重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2),制备防治鱼类爱德华氏菌病的基因工程疫苗。方法:根据GenBank报道的致病性迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpS2基因(AY078509)序列设计引物,通过PCR扩增得到大小为1284bp的迟缓爱德华菌(E.t.)HB01的外膜蛋白基因OmpS2。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,并转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2)。经IPTG诱导后,由SDS-PAGE分析可见Mr在47000的特异蛋白条带。结果:Westernblot检测说明表达的外膜蛋白具有较好的反应原性。将重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2)制成基因工程疫苗,与嗜水气单胞菌(A.h.)溶血素(Hly)基因工程疫苗联合使用分别免疫小鼠与牙鲆(Paralichthys olivaceus)后,获得了较高的保护率,ELISA实验结果表明两种基因工程疫苗均能产生较高抗体水平。结论:本实验制备的基因工程疫苗能有效的预防鱼类爱德华氏菌病,且保护率高,能够起到免疫预防效果。
- 张亚宁李晓玥耿晓娜赵宝华
- 关键词：牙鲆腹水病迟缓爱德华菌嗜水气单胞菌免疫原性
