黑龙江省留学归国人员基金(LC04C03)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：薛震吕松岑安刚邓秋奎赵金东更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省留学归国人员基金哈尔滨市青年科学研究基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA_(3.1)-成骨生长肽真核表达载体在骨髓基质干细胞中的表达(英文)
- 2011年
- 背景:成骨生长肽具有明显的促进成骨细胞增殖、分化、成熟的作用。目的:观察成骨生长肽基因转染兔骨髓基质干细胞后的表达及表达产物对骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的影响。方法:构建重组真核表达载体pcDNA3.1-成骨生长肽,并在脂质体介导下,将其导入兔骨髓基质干细胞。通过G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR方法检测成骨生长肽基因在骨髓基质干细胞内的表达,并观察转染pcDNA3.1-成骨生长肽后骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的情况。结果与结论:实验成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-成骨生长肽,转染pcDNA3.1-成骨生长肽的骨髓基质干细胞可见成骨生长肽mRNA的表达,同时羟脯氨酸的分泌水平增加,碱性磷酸酶活性增高。证实经pcDNA3.1-成骨生长肽转染的兔骨髓基质干细胞不仅可以表达成骨生长肽,而且具有向成骨细胞分化的特性。
- 安刚吕松岑郭亚山薛震邓秋奎
- 关键词：成骨生长肽骨髓基质干细胞基因转染
- 重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体的构建及转染兔骨髓基质干细胞的实验研究被引量：5
- 2007年
- [目的]构建人骨形态发生蛋白-7(human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)基因真核表达载体,评价其转染兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的诱导成骨能力。[方法]从人类胎盘组织中克隆出hBMP-7基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,成功构建了重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体;从兔骨髓中分离培养BMSCs,分为3组:A pcDNA3.1-hBMP-7转染组;B空载体pcDNA3.1转染组;C未转染组。使用RT-PCR、免疫组织化学等方法检测hBMP-7在BMSCs中的表达。检测各组细胞碱性磷酸酶,胶原,骨钙蛋白合成情况。[结果]RT-PCR、免疫组织化学检测显示经hBMP-7转染的BMSCs中有BMP-7表达。经hBMP-7转染BMSCs的碱性磷酸酶于转染后第2 d显著增高,到第8 d达到最高;经hBMP-7转染的BMSCs合成胶原、骨钙蛋白能力也显著提高,与转染空载体、未转染的BMSCs相比有显著性差异(P<0.05)。[结论]成功构建了pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体;外源的hBMP-7基因可在兔BMSCs中充分、高效的表达,并且这种外源性hBMP-7基因具备了促进兔骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力,这为hBMP-7的基因治疗提供了坚实的理论基础。
- 薛震吕松岑赵金东田坤
- 关键词：基因转染骨髓基质干细胞
- pcDNA_(3.1)-OGP基因转染兔骨髓基质干细胞的表达及生物学效应的观察被引量：2
- 2010年
- [目的]观察成骨生长肽(osteogenic growth peptid,OGP)基因转染兔骨髓基质干细胞后的表达及表达产物对骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的影响。[方法]构建重组真核表达载体pcDNA3.1-OGP,并在脂质体介导下,将其导入兔骨髓基质干细胞。通过G418筛选获得阳性克隆。用RT-PCR方法检测OGP基因在骨髓基质干细胞内的表达。I型胶原和碱性磷酸酶的检测观察转染pcDNA3.1-OGP后骨髓基质干细胞向成骨细胞分化情况。[结果]成功构建真核表达载体pcDNA3.1-OGP,用RT-PCR方法及碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原检测证实OGP基因能在骨髓基质干细胞中表达并促进其向成骨细胞分化。[结论]经pcDNA3.1-OGP转染的兔骨髓基质干细胞不仅可以表达OGP,而且具有向成骨细胞系分化的特性。
- 安刚吕松岑邓秋奎薛震李冀宏
- 关键词：成骨生长肽骨髓基质干细胞基因转染
