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国家教育部博士点基金(20120101120108)
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王欣鹃
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2013
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DC-SIGN启动子活化信号通路对HIV-15’LTR活性的影响
2013年
目的研究诱导DC-SIGN启动子活化的信号通路对HIV-15’LTR活性的影响。方法PCR法扩增DC-SIGN启动子及HIV-15’LTR序列,通过双酶切重组到荧光素酶报告质粒中,构建DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒。以PMA分化的THP-1细胞作为细胞模型,分别转染DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒,并以相应的信号通路阻断剂处理,以1000IU/ml的IL-4诱导24h后检测荧光素酶活性。结果HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒的活性明显弱于DC-SIGN启动子,IL-4诱导可以使DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒的活性升高至2倍以上。ERK、JAK-STAT和NF-KB信号通路阻断剂均能够降低DC-SIGN启动子荧光素酶报告质粒的活性,其中ERKl/2抑制剂抑制活性最强,几乎完全阻断了IL-4的诱导效应。对于HIV-15‘LTR荧光素酶报告质粒,NF-κB信号通路阻断剂阻断效果最明显,阻断效率为52.32%,ERK信号通路阻断剂阻断效率为43.31%。结论IL-4诱导的信号通路在活化DC-SIGN启动子的同时,对HIV-15’LTR也具有一定的活化作用,并主要通过NF-κB和ERK信号通路实现。
吴丽娟
白石
刘福民
吴丽香
王欣鹃
靳昌忠
关键词:
DC-SIGN
信号通路
树突状细胞
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