星火计划(2010)
- 作品数:9 被引量:31H指数:3
- 相关作者:万晴姣乙引洪鲲吴勇刘后才更多>>
- 相关机构:贵州师范大学贵阳市动物疫病预防控制中心毕节职业技术学院更多>>
- 发文基金:星火计划长江学者和创新团队发展计划贵州省社会发展科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 齿兰环斑病毒运动蛋白基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量:2
- 2013年
- 采用RT-PCR技术从感染齿兰环斑病毒贵州分离物(ORSV-GZ)的苋色藜叶片中扩增出该病毒的运动蛋白(MP)基因。测序结果表明:该MP基因全长912 bp,编码303个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-MP,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25℃以1.0 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白基因。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为54 kDa,与预测相符合。以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备的抗体效价达1:25600。该多抗与ORSV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他5种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。
- 詹瑞基李欲轲李明健洪鲲乙引万晴姣
- 关键词:齿兰环斑病毒运动蛋白原核表达多克隆抗体
- 建兰花叶病毒贵州分离物的分子鉴定被引量:1
- 2014年
- 采用生物学方法对ELISA检测为阳性的建兰花叶病毒贵州长瓣兜兰分离物(CyMV-GZ)进行纯化。RT-PCR技术克隆其外壳蛋白(CP)基因并测序,使用DNAMAN7.0和MEGA5.0软件对CyMV-GZ的CP基因进行同源性分析。结果表明:成功克隆该病毒CP基因,其序列长度为672 bp,编码223个氨基酸残基;序列同源性分析显示,该分离物的CP基因与16种已报道的CyMV各地分离物同源性均达95%以上,而与同属其他3种病毒CP基因同源性均低于48%,由此证明该长瓣兜兰分离物为CyMV。
- 李欲轲洪鲲张宇斌乙引万晴姣
- 关键词:建兰花叶病毒外壳蛋白分子鉴定
- 奶牛布鲁菌病三种血清学诊断方法的比较研究被引量:1
- 2014年
- 为给奶牛布鲁菌病诊断提供技术参考,采用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)三种血清学方法分别对420份奶牛血清样本进行比较检测。结果表明,RBT、SAT和CFT的阳性检出率依次为13.81%(58/420)、9.29%(39/420)和8.81%(37/420)。以SAT定量检测结果为参照标准,CFT的符合率较RBT高,且待检血清CFT溶血程度与SAT抗体效价呈现一定的相关性。
- 徐春志方英蔺俐仲白璧袁翠霞李永明
- 关键词:布鲁菌病血清学诊断方法符合率
- 贵州齿兰环斑病毒的分子鉴定被引量:7
- 2014年
- 为有效地控制贵州兰花的病毒,将经ELISA方法检测为齿兰环斑病毒(ORSV)阳性的蝴蝶兰样品摩擦接种至其枯斑寄主苋色藜进行纯化,RT-PCR 克隆并连接至 pMD18-T 载体后测序,用 DNA-MAN7.0和MEGA5.0软件进行核苷酸序列分析。结果表明:成功克隆该病毒CP基因,其序列长度为477 bp,编码158个氨基酸残基;序列同源性分析显示,该分离物的CP基因与已报道的11种ORSV各地分离物序列同源性高达96%~99%,而与同属其他3种病毒CP基因同源性均低于70%。证明,贵州蝴蝶兰上感染的病毒为 ORSV。
- 万晴姣李欲轲马骏乙引洪鲲
- 关键词:齿兰环斑病毒外壳蛋白分子鉴定
- 毕节地区玉米抗旱栽培技术被引量:1
- 2010年
- 从品种选择、种子处理、播种、移栽、施肥、田间管理、病虫害防治等方面阐述了玉米抗旱栽培技术。
- 彭永贤吴勇龙庭友刘后才
- 关键词:玉米抗旱栽培技术
- 奶牛布鲁氏菌病的病原分离与鉴定被引量:1
- 2013年
- 为给奶牛布鲁氏菌病实验室诊断提供技术参考,对疑似布鲁氏菌病病例进行了病原分离培养,并采用平板直接凝集试验、革兰氏染色镜检、柯兹洛夫鉴别染色镜检和PCR方法对分离菌株进行了鉴定。结果表明:分离的4株细菌均为布鲁氏菌属细菌。
- 徐春志方英蔺俐仲白璧李永明
- 关键词:奶牛布鲁氏菌病
- 贵州辣椒轻斑驳病毒分离物的分子鉴定被引量:16
- 2013年
- 为了对贵州辣椒轻斑驳病毒分离物进行分子鉴定,采用生物学方法对ELISA检测为阳性的辣椒轻斑驳病毒贵州分离物(PMMoV-GZ)进行纯化,以RT-PCR技术克隆其外壳蛋白(CP)基因并测序,使用DNAstar和MEGA5.0软件对PMMoV-GZ的CP基因进行同源性分析。结果表明:成功克隆了该病毒分离物的CP基因(474bp),该基因编码157个氨基酸残基;同源性分析显示,该分离物的CP基因及相应的氨基酸序列与11种已报道的PMMoV各地分离物的同源性均在95%以上,而其基因序列与6种同属的其它病毒同源性低于60%。证明该病毒分离物为辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)。
- 郑兴华洪鲲杨立昌乙引万晴姣
- 关键词:辣椒分离物外壳蛋白分子鉴定
- 贵阳市家畜布鲁菌感染情况调查与分析
- 2016年
- 为了解贵阳市2015年家畜布鲁菌的感染情况,以指导全市家畜布鲁菌病的防控工作,采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对全市8 381份牛、羊、猪血清开展布鲁菌感染情况调查。结果表明,牛、羊和猪布鲁菌病阳性率依次为0.29%(13/4 530)、0.39%(11/2 848)和0%(0/1 003)。说明贵阳市家畜布鲁菌病的流行率在国家控制标准以内,今后宜实行检疫和扑杀相结合的防控策略。
- 徐春志蔺俐仲方英白璧袁翠霞景书灏范伟兴
- 关键词:家畜布鲁菌病
- 毕节地区农作物生产抗旱对策研究被引量:3
- 2011年
- 通过对毕节地区农业生产抗旱现状、植物抗旱性生理机制和植物抗旱特点的分析,阐述了目前毕节地区农作物抗旱研究的对策,包括合理利用作物生产技术,搜集、保护和利用品种资源,加强农作物抗旱品种引种、改良和选育工作。
- 彭永贤吴勇李忠利龙庭友刘后才张世攀邹明春
- 关键词:农作物抗旱