国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-30-yz-7)
- 作品数：29 被引量：163H指数：8
- 相关作者：王跃进张朝红张剑侠牛茹萱赵凯更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学塔里木大学新疆维吾尔自治区葡萄瓜果研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 欧洲葡萄体胚诱导及农杆菌介导的遗传转化研究被引量：1
- 2012年
- 以欧洲葡萄(Vitis vinifera L.)品种"无核白"(‘Thompson Seedless’)、"佳利酿"(‘Carignane’)、"红地球"(‘Red Globe’)的雄蕊、雌蕊和花蕾为外植体,对花器官体细胞胚诱导及农杆菌介导的转芪合成酶基因进行研究。结果表明:所采用的5种胚性愈伤组织诱导培养基中,MC培养基较适于雄蕊胚性愈伤组织的诱导,"无核白"、"佳利酿"和"红地球"雄蕊的胚性愈伤组织诱导率分别为1.7%、0.3%和11.8%;PIV培养基可诱导"无核白"和"佳利酿"雌蕊胚性愈伤组织形成,诱导率分别为4.0%和3.2%,而"红地球"雌蕊在MC培养基上诱导率最高,达5.6%;仅"红地球"的花蕾在MS1培养基上可诱导产生胚性愈伤组织,诱导率为0.5%。改良X6液体培养基较有利于次生胚的诱导;B培养基有利于体细胞胚萌发成苗。转基因材料经抗性筛选和植株再生,获得了2株"无核白"抗性苗,经PCR和PCR-Southern检测表明,目的基因被整合到转基因植株中。
- 谭超张剑侠王跃进
- 关键词：葡萄花器官体细胞胚植株再生转基因
- 葡萄抗白粉病相关基因γVPE的克隆与表达分析被引量：3
- 2016年
- 该研究采用RT-PCR技术,从抗病的中国野生华东葡萄‘白河-35-1’和感病的欧洲葡萄‘佳丽酿’中克隆了液泡加工酶基因(γVPE),分别命名为VpγVPE和VvCγVPE。克隆的2个γVPE基因cDNA长度均为1 624bp,ORF为1 482bp,编码493个氨基酸。氨基酸多序列对比分析发现,‘白河-35-1’、‘佳丽酿’、‘无核白’和‘黑比诺’葡萄中的γVPE基因底物结合口袋域的3个关键氨基酸之一的丝氨酸(Ser395)均变为丙氨酸(Ala),与其他植物的VPE基因底物口袋结合域有所不同。实时荧光定量PCR表明,在白粉菌诱导后的不同时期内,γVPE基因在感病葡萄和抗病葡萄中的表达模式不同,抗病株系中VpγVPE基因的表达量在诱导后的前期(4h和48h)和后期(168h)均有所增加,而感病株系中VvCγVPE基因在诱导后4h表达量最高,随后降低。γVPE基因在白粉菌诱导后不同时期内表达量的变化,表明γVPE基因在一定程度上与葡萄的抗性相关。研究结果为进一步揭示γVPE基因在抗病过程中的分子机理奠定了基础。
- 王晏青张小莹宋珈凝王跃进张朝红
- 关键词：葡萄基因克隆白粉病
- 葡萄SVP类MADS-box基因的克隆及表达分析被引量：16
- 2012年
- 从无核白葡萄(Vitis vinifera cv.Thompson seedless)中克隆获得一个胚珠发育相关MADS-box基因。该基因cDNA全长1 248bp,ORF为729bp,编码一个含有243个氨基酸的蛋白。氨基酸多序列比对和系统发育分析显示,该基因属于SVP类MADS-box基因。采用半定量技术进行表达分析表明,该基因在葡萄的根、茎、叶、花蕾、盛花和胚珠中均有表达,但是有强弱差异。实时定量PCR技术分析表明在无核葡萄品种无核白胚珠发育过程中基因表达量先升后降,而在有核葡萄品种黑比诺胚珠发育过程中表达量一直呈下降趋势。
- 杨堃张朝红李树秀张旭彤王跃进
- 关键词：葡萄
- 无核白葡萄脱水素等位基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2012年
- 以欧洲葡萄无核白品种(Vitis vinifera cv.Thompson Seedless)为研究材料,根据霞多丽品种脱水素基因序列设计引物并PCR扩增。PCR产物用地高辛标记并Southern杂交分析,发现无核白基因组含有2个不同的脱水素基因。设计并采用一种基于对琼脂糖凝胶梯状切割回收的方法克隆这2个不同脱水素基因的DNA片段,分别命名为DHN1-L和DHN1-S。进一步用反向PCR法获得这2个脱水素基因DNA片段的侧翼序列,获得基因DNA全长序列(NCBI登录号分别为EF371882和EF371881)。与已公布葡萄基因组序列比对,这2个基因位于第4号染色体相同位置,为等位基因,说明无核白品种脱水素基因为杂合体。2个脱水素基因所翻译蛋白在疏水性及三级结构方面有差异。无核白葡萄脱水素基因等位基因DNA序列的获得为进一步分析等位基因变异对植物抗逆性的影响提供了依据。
- 吴康杨亚州张朝红张剑侠郭翠英王跃进
- 关键词：无核白葡萄脱水素基因等位基因克隆
- 叶面喷施亚硒酸钠对葡萄果实品质及叶片衰老的影响被引量：18
- 2018年
- 以3年生露地栽培葡萄户太8号为试材,采用不同浓度、不同时期叶面喷施亚硒酸钠的方法,探究提高葡萄果实硒含量方法及其延缓叶片衰老的效应。结果表明,喷硒后新抽生出副梢新叶中的硒含量与老叶中硒含量呈高度正相关(r=0. 99),硒在葡萄植株内具有移动性,可重复利用。不同浓度处理以50 mg/L亚硒酸钠处理后的果实品质最好;不同时期处理下始着色期处理后的果实品质最好。50 mg/L亚硒酸钠处理后延缓叶片衰老效果最明显。叶面喷施亚硒酸钠可有效提高葡萄果实含硒量从而提高果实品质,有效提高叶片叶绿素含量从而增加叶片光合量进一步延缓叶片衰老。
- 薛竟一王瑞雪魏蓉张朝红
- 关键词：葡萄亚硒酸钠果实品质硒含量叶片衰老
- 葡萄类TIAR基因的克隆及其在胚珠发育过程中的表达分析被引量：4
- 2014年
- 【目的】研究葡萄类TIAR蛋白与无核葡萄胚珠败育的关系,探索无核葡萄胚珠败育分子机理。【方法】以‘无核白’葡萄(Vitis vinifera‘Thompson Seedless’)浆果发育过程中差异表达的EST序列为基础,克隆目的基因全长序列,并通过实时荧光定量PCR技术分析了该基因在无核葡萄品种‘无核白’和有核葡萄品种‘黑比诺’胚珠发育过程中的表达变化。【结果】获得一条1 593 bp的同源序列,命名为VvTIAR-like(GenBank登录号:KF523863),其ORF长1 269 bp,编码422个氨基酸,蛋白理论分子质量为45.8 kD。生物信息学分析显示所得基因具有典型的TIAR蛋白质特征,与其他植物来源的类TIAR蛋白也具有较高同源性,认为该序列为编码葡萄类TIAR蛋白的基因。实时荧光定量PCR技术分析结果显示,VvTIAR-like在‘无核白’与‘黑比诺’胚珠发育过程中表现出不同的表达模式。在‘无核白’胚珠开始败育的前期和关键时期,该基因表现出明显的表达高峰,而在‘黑比诺’中则表达量低且无明显变化。【结论】获得了‘无核白’葡萄中类TIAR基因VvTIAR-like的cDNA全长,对该基因在无核葡萄品种‘无核白’和有核葡萄品种‘黑比诺’胚珠发育过程中的表达分析显示,VvTIAR-like可能与‘无核白’葡萄胚珠败育相关。
- 魏蓉巩培杰李树秀王跃进张朝红
- 关键词：葡萄基因克隆
- 抗寒无核葡萄胚挽救影响因素的研究被引量：7
- 2013年
- 以7个种子败育型无核葡萄作母本,2个抗寒欧山杂种为父本进行杂交,将杂交胚珠接种于培养基上进行胚挽救,研究了不同培养基配方、不同种类氨基酸、亲本基因型对胚发育率和成苗率的影响。结果表明:在3种胚珠培养的培养基中,以ER+水解络蛋白(CH)500mg/L+GA30.5mg/L+IAA 1.5mg/L培养基获得了最高的胚发育率和成苗率,但CH和GA3+IAA的添加对胚发育率及成苗率无显著影响;添加不同种类氨基酸对‘波尔莱特’ב北醇’组合胚的发育率及成苗率有不同影响,以1mmol/L丝氨酸的促进效果明显,烟酸的添加对胚发育率和成苗率有一定的抑制作用。在以欧山杂种(‘玫瑰香’ב黑龙江实生’)‘00-1-5’作父本的6个杂交组合中,以‘京大晶’作母本获得了最高胚发育率和成苗率,分别为36.66%和4.16%;在以欧山杂种‘北醇’作父本的2个杂交组合中,分别以‘皇家秋天’和‘红无籽露’作母本,胚的发育率和成苗率无差异;以‘北醇’作父本比‘00-1-5’作父本胚的发育率和出苗率有所提高,但结果不显著。通过该研究共获得了抗寒无核葡萄胚挽救新种质39个株系。
- 赵凯刘巧张剑侠牛茹萱李桂荣王跃进
- 关键词：无核葡萄抗寒性种质胚挽救
- 叶面喷硒对葡萄光合特性及抗氧化酶活性的影响被引量：1
- 2018年
- 为探究叶面喷施硒肥对葡萄幼苗生长的影响并确定最佳喷施浓度,本实验以2年生巨峰葡萄扦插坐地苗为试材,喷施不同浓度亚硒酸钠,测定幼苗叶片叶绿素含量、净光合速率、SOD、POD和CAT酶活性,同时调查植株茎粗等状况。结果表明:叶面喷施不同浓度硒肥均可提高植株的叶绿素含量,以1 mg·L-1硒处理下的叶绿素含量最高,高于对照24.20%;各处理都显著增加了植株茎粗,与对照相比,0.5 mg·L-1亚硒酸钠处理下的植株茎粗显著提高,高于对照14.03%;叶片净光合速率(Pn)随喷施浓度的增加而升高,与气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)变化趋势相同,胞间CO2浓度(Ci)随喷施浓度的增加而降低,且均低于对照水平;随喷硒浓度增加叶片POD、SOD、CAT酶活性均呈先升后降的趋势。
- 薛竟一王瑞雪张朝红
- 关键词：葡萄硒光合特性抗氧化酶
- 6-BA对抗寒无核葡萄胚挽救的影响被引量：6
- 2015年
- 【目的】探讨提高抗寒无核葡萄胚挽救育种效率的方法。【方法】以4个种子败育型无核葡萄品种‘火焰无核’‘海王星’‘木星’和‘红宝石无核’为母本,欧山杂种(品种)‘北醇’为父本进行杂交,将杂交胚珠接种于添加不同质量浓度6-BA的MM3+500 mg·L-1水解酪蛋白(CH)+1 mmol·L-1丝氨酸(Ser)培养基上进行培养。【结果】除‘海王星’ב北醇’外,供试的其他杂交组合均在添加6-BA质量浓度为0.5 mg·L-1时,胚珠发育率、萌发率和成苗率最高,差异达到显著水平;当6-BA的质量浓度为1.0 mg·L-1时,对胚挽救效率具一定程度的促进作用或作用不显著;当6-BA的质量浓度为1.5 mg·L-1时,对‘火焰无核’ב北醇’‘木星’ב北醇’‘海王星’ב北醇’杂交后代胚的成苗起到一定程度的抑制作用。【结论】不同的杂交组合对不同质量浓度6-BA的敏感程度不同,0.5 mg·L-16-BA能够提高无核葡萄胚挽救效率;首次选用的抗寒无核品种‘木星’和‘海王星’均可作为无核葡萄胚挽救育种的母本。
- 刘巧张剑侠于冬冬王跃进
- 关键词：无核葡萄杂交胚挽救6-BA
- 两个无核葡萄品种胚及胚乳败育的细胞学研究被引量：8
- 2016年
- 以2个引自美国的种子败育型无核葡萄品种"木星"、"海王星"为试材,采用石蜡切片技术和铁矾苏木精染色法,对这2个品种的胚、胚乳进行细胞学观察,以期了解其胚败育的时期,从而确定其用作胚挽救母本时的最佳取样时期。结果表明:花后38d和36d,"木星"、"海王星"的胚分别开始发生败育;"木星"、"海王星"用作胚挽救母本的最佳取样时期分别是花后38d和36d。
- 刘巧张立华王跃进张剑侠
- 关键词：无核葡萄胚败育石蜡切片胚挽救
