国家科技重大专项(2011zx09102-001-31)
- 作品数：6 被引量：28H指数：4
- 相关作者：臧林泉潘雪刁杨周萍杨志英周四桂更多>>
- 相关机构：广东药学院深圳市第二人民医院广州中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响。方法应用10~80μmol/L芹菜素处理NCI-H460细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关信号分子Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达水平。结果芹菜素对NCI-H460细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;芹菜素处理组细胞出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征;NCI-H460细胞凋亡率随着芹菜素浓度增加逐渐增高;芹菜素处理组细胞Bax和caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低。结论芹菜素能够抑制人肺癌NCI-H460细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降,caspase-3活化有关。
- 潘雪刁杨周萍杨志英周四桂张海涛臧林泉
- 关键词：芹菜素肺癌细胞增殖BAXBCL-2CASPASE-3
- 芹菜素抗肺癌SPC-A1细胞增殖和诱导凋亡作用被引量：4
- 2014年
- 目的：探讨芹菜素对人非小细胞肺癌SPC—Al细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外常规培养人肺癌细胞株SPC—Al细胞，用5～80μmol·L^-1不同浓度芹菜素作用SPC—Al细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率；Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化；流式细胞术FITC—AnnexinV／碘化丙啶（PI）双标记染色法检测细胞凋亡率。结果：芹菜素对SPC—Al细胞增殖的抑制作用呈时间和浓度依赖性，芹菜素干预24，48，72h的IC50值分别为319．02，37．23，18．59μmol·L^-1；Hoechst33258染色后倒置荧光显微镜下观察可见芹菜素给药后出现细胞数逐渐减少，凋亡细胞核固缩，染色质凝集，着色深而呈亮蓝色；流式细胞术检测结果显示芹菜素可诱导SPC—Al细胞出现不同程度的凋亡。结论：芹菜素能抑制人非小细胞肺癌SPC—Al细胞的增殖和诱导其凋亡。
- 杨周萍臧林泉黄婕潘晓彤张正兵张海涛杜侃潘雪刁
- 关键词：芹菜素SPC-A1细胞细胞增殖凋亡
- 芹菜素对人肺腺癌LTEP-a2细胞增殖及凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨芹菜素对人肺腺癌LTEP-a2细胞增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测不同浓度芹菜素对LTEP-a2细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化;采用FITCAnnexin V/PI双标记染色检测细胞凋亡率。结果 MTT法检测显示芹菜素对LTEP-a2细胞增殖的抑制作用具有时间和剂量依赖性;Hoechst33258染色后观察可见经芹菜素处理组细胞数量逐渐减少、细胞核固缩、染色质凝集等细胞凋亡特征;流式细胞术检测显示芹菜素可明显诱导LTEP-a2细胞凋亡,且具有一定的剂量依赖性。结论芹菜素能明显抑制人肺腺癌LTEP-a2细胞株的增殖,并诱导其凋亡。
- 杨周萍张正兵潘晓彤彭彤唐旗羚黄婕臧林泉潘雪刁
- 关键词：芹菜素肺腺癌细胞MTT法流式细胞术
- 芹菜素对人肺癌A549细胞凋亡及相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响被引量：12
- 2013年
- 目的研究芹菜素对人肺癌A549细胞增殖抑制和凋亡诱导作用与Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法 10～80μmol/L不同浓度芹菜素作用A549细胞,采用MTT法检测芹菜素对A549细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258细胞核染色法观察芹菜素诱导细胞凋亡形态学的变化;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Westernblot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的变化。结果 MTT法显示,芹菜素对A549细胞有显著的增殖抑制作用(P<0.01),且具浓度和时间依赖性;荧光显微镜下观察到芹菜素处理组细胞出现典型的凋亡形态学改变:细胞核固缩、染色质凝集和核碎片化等;流式细胞仪分析结果显示,芹菜素呈浓度依赖性诱导A549细胞凋亡;Westernblot结果显示,促凋亡蛋白Bax随着芹菜素浓度升高表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2随着芹菜素浓度升高表达减少。结论芹菜素具有抑制人肺癌A549细胞增殖,诱导其凋亡的作用,其机制可能与上调Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。
- 潘雪刁杨周萍周四桂杨志英臧林泉王桂香
- 关键词：芹菜素肺肿瘤细胞凋亡原癌基因蛋白质C-BCL-2
- 肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽。方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆进行DNA测序并翻译为氨基酸序列;化学合成异硫氰酸荧光素标记的多肽(FITC-ZS-5),采用细胞和组织免疫荧光法鉴定FITC-ZS-5与肺癌细胞的亲和力及特异性。结果通过3轮减性筛选后,与NCI-H1299细胞结合的噬菌体克隆得到有效的富集;ELISA结果显示5号克隆对NCI-H1299细胞亲和力最高,将其命名为Phage ZS-5;测序结果显示Phage ZS-5所表达的多肽序列在国内外均未见报道,细胞及组织免疫荧光实验结果显示FITC-ZS-5对肺癌细胞及组织具有较高的亲和力和特异性。结论应用噬菌体随机肽库技术筛选到肺癌靶向性多肽ZS-5,为肺癌的靶向治疗和诊断奠定基础。
- 潘雪刁何冰王桂香刘金泳曹成明臧林泉
- 关键词：肺癌噬菌体展示技术多肽肽库
- 咖啡酸在大鼠体内的绝对生物利用度及其在肠道吸收特性的研究被引量：6
- 2013年
- 目的:研究咖啡酸在大鼠体内的绝对生物利用度及其在肠道的吸收特性。方法:大鼠分别采用静脉(2 mg·kg-1)、灌胃(10 mg·kg-1)给药研究咖啡的绝对生物利用度;建立大鼠原位肠血管灌流模型研究咖啡酸在肠道的吸收率;采用Caco-2细胞模型研究咖啡酸的双向转运情况。结果:咖啡酸静脉(2 mg·kg-1)、灌胃(10 mg·kg-1)给药后,在大鼠体内的药动学行为均符合二室模型,咖啡酸的绝对生物利用度为14.7%;咖啡酸在肠血管灌流模型中的吸收率为12.4%;咖啡酸的P appAP→BL及P appBL→AP不随浓度的变化而变化,且在实验浓度的范围内,P appBL→AP/P appAP→BL均大于2。结论:咖啡酸绝对生物利用度低,肠道吸收率少,在Caco-2细胞单层模型中的转运途径可能为主动转运。
- 曾洁王素军杨本坤钟运鸣臧林泉王羚郦
- 关键词：咖啡酸生物利用度通透性
