国家自然科学基金(40976100)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：国家海洋局第三海洋研究所厦门大学更多>>
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- 对虾白斑综合症病毒透射电镜分析中病毒固定条件的优化
- 2013年
- 电镜观察是研究对虾白斑综合症病毒(WSSV)形态和结构的重要手段.本研究采用不同浓度的多聚甲醛和戊二醛对纯化的WSSV粒子进行固定,从中寻找最优的固定条件用于病毒的透射电镜(TEM)分析.实验结果显示,经过多聚甲醛或者戊二醛固定的WSSV粒子对吸附、染色等实验操作的耐受性较未固定样品有显著提高,在制样过程中没有发生明显的结构破坏.其中1.00%(V/V)多聚甲醛常温固定20 min对WSSV粒子的结构保持得最好.进一步地分析表明,1.00%多聚甲醛固定后的病毒粒子更有利于金标免疫电镜的研究.
- 邬君君谷力李钫
- 关键词：海洋生物学对虾白斑综合症病毒多聚甲醛戊二醛
- 对虾白斑综合症病毒结构蛋白质VP12的研究
- 2013年
- VP12是对虾白斑综合症病毒的一种结构蛋白,该蛋白质由病毒基因wsv009编码,分子量为10.9kDa.转录时相分析表明wsv009属于早期基因.本研究通过PCR扩增获得了该全长基因,成功构建了重组质粒pET-His-vp12.将该质粒转化到E.coliBL21中表达并纯化了重组VP12蛋白,用该重组蛋白制备了特异性鼠抗血清.纯化的病毒粒子经0.5%Triton X-100处理后,VP12被发现存在于病毒WSSV的囊膜部分,Western blot杂交实验和免疫电镜实验也证实该结果.对VP12的深入研究将有助于了解病毒的感染和包装的机制,为病毒的诊断和控制提供科学依据.
- 李建波邬君君杨丰
- 关键词：海洋生物学对虾白斑综合症病毒免疫电镜
