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国家自然科学基金(30873069)

作品数：2 被引量：2H指数：1
相关作者：侯宁袁文常刘启才罗健东更多>>
相关机构：广州医学院兰州军区乌鲁木齐总医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金广东省高校优秀青年创新人才培养计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇心肌
  • 2篇心肌细胞
  • 2篇细胞
  • 2篇肌细胞
  • 1篇代谢
  • 1篇心肌细胞肥大
  • 1篇乳鼠
  • 1篇乳鼠心肌细胞
  • 1篇瘦素
  • 1篇瘦素诱导
  • 1篇能量代谢
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇重组腺病毒载...
  • 1篇细胞肥大
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇腺病毒载体
  • 1篇基因
  • 1篇肥大
  • 1篇Α基因

机构

  • 2篇广州医学院
  • 1篇兰州军区乌鲁...

作者

  • 2篇侯宁
  • 1篇罗健东
  • 1篇刘启才
  • 1篇袁文常

传媒

  • 1篇广东医学
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2011
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体及在乳鼠心肌细胞中的表达被引量：1
2012年
背景:过氧化物酶体增生因子活化受体α是调节心脏脂肪酸氧化的重要核转录因子,利用基因工程技术构建其重组腺病毒载体对研究心脏能量代谢障碍机制具有重要意义。目的:构建大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体,评价其在原代培养的乳鼠心肌细胞中的表达效率。方法:采用RT-PCR法自SD大鼠肝脏扩增过氧化物酶体增生因子活化受体α基因,将其克隆至带有增强型绿色荧光蛋白的穿梭质粒载体pAd-Track-CMV。线性化重组穿梭质粒载体并转化入含有腺病毒骨架质粒pAd-Easy-1的感受态大肠杆菌BJ5183构建重组腺病毒载体质粒。用脂质体将线性化的重组腺病毒载体质粒转染于人胚肾293细胞以包装、扩增,纯化病毒后计算滴度。用纯化的重组腺病毒转染心肌细胞,荧光显微镜观察转染效率;荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增生因子活化受体αmRNA、蛋白表达。结果与结论:成功构建携带大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为3.5×1011pfu/L。重组腺病毒转染心肌细胞的效率达90%以上,被转染细胞目的基因mRNA、蛋白表达显著增高。该载体的成功构建为研究过氧化物酶体增生因子活化受体α基因在心肌能量代谢障碍中的作用奠定基础。
侯宁袁文常罗承锋刘启才罗健东
关键词：重组腺病毒心肌细胞能量代谢
PPARα在瘦素诱导心肌细胞肥大中的作用被引量：1
2011年
目的探讨PPARα是否参与瘦素诱导的新生大鼠心肌细胞内氧活性物质(ROS)增多和心肌细胞肥大。方法 0.01、0.1、1和10μmol/L PPARα拮抗剂GW6471与瘦素共同孵育心肌细胞,ROS敏感的荧光染料DCF-DA检测细胞内ROS的水平;分别用RNA敏感的荧光染料碘化丙叮(PI)、考马斯亮蓝检测细胞内RNA和总蛋白含量。以11、01、00和1 000 ng/mL瘦素孵育细胞,荧光定量PCR、Western blot法分别检测心肌细胞内PPARαmRNA和蛋白表达变化。结果 PPARα拮抗剂GW6471能够浓度依赖性地抑制瘦素诱导的心肌细胞内DCF-DA荧光信号强度增加(P<0.05)和心肌细胞肥大(P<0.05);瘦素浓度依赖性上调心肌细胞内PPARαmRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论 PPARα在瘦素诱导的心肌细胞ROS堆积和心肌细胞肥大过程中发挥重要的介导作用。
侯宁罗建东
关键词：瘦素心肌细胞肥大
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