国家自然科学基金(81170186)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 抗TNF-α中和抗体通过升高脂联素水平减轻小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：2
- 2012年
- 目的:阐明心肌缺血/再灌注(MI/R)时,脂联素(APN)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系,以及使用中和抗体阻断TNF-α可否提高血浆APN,进而发挥心肌保护作用。方法:96只成年雄性C57小鼠和36只ob/ob小鼠均采用30 min缺血/再灌注(I/R)建立MI/R模型。96只C57小鼠分为假手术组、手术+盐水对照组及手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=32);36只ob/ob小鼠分为ob/ob假手术组、ob/ob手术+盐水对照组及ob/ob手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=12)。假手术或缺血20 min后,腹腔注射给予单次抗TNF-α中和抗体或盐水干预。分别采用ELISA检测TNF-α与APN血浆水平;小鼠心脏超声评估心脏LVEF;伊文氏蓝/TTC染色检测心脏梗死面积;以及TUNEL/Caspase-3活性检测观察心肌细胞凋亡。结果:血浆ELISA测定发现,MI/R后,小鼠血浆TNF-α水平在再灌后1 h即显著升高,后缓慢下降。注射抗TNF-α中和抗体可在再灌后1 h即中和TNF-α(P<0.01),同时在再灌注3 h、8 h、1 d及3 d后4个时间点,较给予盐水对照显著升高血浆APN(P<0.01)。通过小鼠心脏超声、伊文氏蓝/TTC染色和TUNEL/Caspase-3活性检测发现,与给予盐水的对照相比,腹腔注射抗TNF-α中和抗体可提高小鼠的心肌功能(P<0.05)、减少梗死面积(P<0.01)及心肌细胞的凋亡(P<0.01)。而在ob/ob小鼠中,通过以同样的实验方法证实,单次注射抗TNF-α中和抗体已不能提高血浆APN的含量,其减轻心肌损伤的作用同样被显著削弱,但给予APN球状片段仍可发挥心肌保护作用。结论:以抗TNF-α的中和抗体阻断TNF-α可逆转MI/R后血浆APN的降低并发挥心肌保护作用,提示抗TNF-α中和抗体发挥的心肌保护作用可能部分通过提高APN实现。
- 高超刘毅杨强孙璐杨璐陶凌王海昌
- 关键词：脂联素小鼠
- 白黎芦醇减轻Ⅱ型糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨白黎芦醇(RSV)减轻Ⅱ型糖尿病(T2DM)小鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用及其机制。方法:采用喂养高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM小鼠模型。造模成功后立即给予RSV(10 mg/kg)每日1次灌胃,连续3周。实验分为正常假手术组、正常手术对照组、DM假手术组、DM手术对照组、RSV组、CpC组,每组20只。手术方式采用心脏冠状动脉左前降支结扎30 min、再灌注3 h或24 h。抑制剂组于术前1 h腹腔注射Compound C(20 mg/kg)。用TTC染色法检测心肌梗死(MI)面积,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,ELISA法检测caspase-3活性、血浆脂联素(APN)水平,Western blot法检测AMPK、p-AMPK及脂肪组织APN的含量。结果:喂养高脂饮食结合小剂量STZ能够成功建立T2DM小鼠模型。与DM手术对照组相比,RSV饲喂能够减轻T2DM小鼠MI/RI,减小MI面积、减少心肌细胞凋亡(P<0.01),降低caspase-3的活性(P<0.05)。RSV还能够上调脂肪组织APN表达,逆转T2DM小鼠低APN血症(P<0.01)。AMPK抑制剂Compound C可显著减弱RSV的心肌保护作用(P<0.05)。结论:RSV可通过逆转T2DM小鼠的低脂联素血症,在MI/RI时发挥对心肌的保护作用。
- 杨强王海昌高超冯世栋孙璐刘毅陶凌
- 关键词：白藜芦醇脂联素小鼠
- TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤中的作用被引量：6
- 2015年
- 目的研究硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(H/R)损伤中的作用。方法分离培养C57BL/6J小鼠CMECs,随机分为对照组、H/R损伤组、H/R+Scrambled siRNA组和H/R+TXNIP siRNA组。各组处理后使用ELISA试剂盒检测细胞IL-1β水平,采用免疫共沉淀的方法检测TXNIP和NLRP3的相互作用,Western blot检测TXNIP和NLRP3的表达水平,乳酸脱氢酶试剂盒检测细胞培养上清LDH释放情况和细胞Caspase-3活性。结果与对照组相比,H/R后CMECs的NLRP3表达水平明显升高(P<0.05),NLRP3炎症小体激活(IL-1β水平升高,P<0.01),且TXNIP和NLRP3的结合效果明显增强(P<0.01)。运用TXNIP siRNA抑制TXNIP表达后行H/R处理,与H/R+Scrambled siRNA组相比,NLRP3炎症小体激活水平明显下降(IL-1β水平降低),细胞Caspase-3活力和LDH释放水平均显著降低(均P<0.05)。结论在CMECs发生H/R损伤时,NLRP3炎症小体激活,TXNIP和NLRP3的相互作用增强;抑制TXNIP表达后,NLRP3炎症小体激活水平降低,内皮损伤减轻。说明TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活参与CMECs的H/R损伤,可能成为CMECs的H/R损伤的新机制。
- 许倡涛刘毅朱迪辛超杜志超穆楠陶凌
- 关键词：NLRP3心肌微血管内皮细胞
- 生长分化因子11在白色脂肪细胞棕色化中的作用研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨生长分化因子11(GDF11)在白色脂肪细胞棕色化中的作用。方法由C3H10T1/2细胞诱导分化而来的成熟白色脂肪细胞随机分为正常对照组,GDF11组;Western blot检测GDF11孵育成熟白色脂肪细胞后UCP1蛋白的表达;实时PCR检测GDF11对棕色脂肪标志基因表达的影响。结果分别加入浓度为25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml的GDF11,与正常对照组相比加入100 ng/ml的GDF11能够明显促进UCP1的表达(P<0.05),而25 ng/ml和50 ng/ml的GDF11可以在一定程度上诱导UCP1的表达却无显著统计学差异;同时,100 ng/ml的GDF11能够促进棕色脂肪标志基因ucp1、cidea、cox7α、dio2和elovl3的表达(P<0.05)和线粒体DNA拷贝数的增加(P<0.05)。结论 GDF11可显著促进白色脂肪细胞向棕色脂肪细胞转化。
- 闫柄文刘毅裴海峰王姍张玲陶凌
- 抑制1-磷酸鞘氨醇裂解酶活性加重缺血性心力衰竭被引量：1
- 2014年
- 目的:观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)裂解酶(SPL)在小鼠缺血性心衰(HF)模型中的作用。方法:将60只成年雄性C57/BL6J小鼠随机分为以下4组:假手术(Sham)组、心肌梗死(MI)组、假手术+THI(Sham+THI)组[THI是SPL的抑制剂]及MI+THI组,每组15只(n=15),将25 mg/L THI溶于饮水中,于手术24 h后连续饲喂2周。MI4周后,采用ELISA试剂盒测定心肌中S1P的含量。根据心脏质量/体质量(HW/BW)评价心肌肥厚。用小动物心脏超声评估小鼠心脏结构和功能,经Masson三色染剂染色法观察心脏纤维化。用Western blot检测转化生长因子-β(TGF-β)蛋白的表达。实时PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)和平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)mRNA的水平。结果:与MI组相比,MI+THI组小鼠心肌组织中S1P的含量增加(P<0.01);左心室射血分数(LVEF)降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVESD)和舒张末期内径(LVEDD)均增加(均P<0.05),HW/BW增加(P<0.01),心脏纤维化加重;TGF-β蛋白的表达增加(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原、ANP、BNP和α-SMA mRNA的水平均显著增加(均P<0.01)。与Sham组相比,Sham+THI组小鼠上述指标无显著差异。结论:抑制SPL的活性可能增加梗死后心肌病理性S1P信号的激活,加重MI后的心脏重构和HF。
- 周芬夏云龙张富洋杨璐闫文俊杜朝升陶凌
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇心肌梗死心力衰竭小鼠
