国家自然科学基金(30400063)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：刘兴汉李冀宏赵炜明徐建永李丹更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学黑龙江省生物医药工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人内皮抑素的纯化及抗肿瘤活性研究被引量：6
- 2005年
- [目的]从高效表达的基因工程菌中纯化重组人内皮抑素,对其抗肿瘤活性进行研究。[方法]经异丙基硫代鄄β鄄D鄄半乳糖苷(IPTG)诱导,重组人内皮抑素在大肠杆菌基因工程菌中以包涵体形式高效表达。通过凝胶层析纯化重组内皮抑素蛋白。应用鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM),肺癌细胞MTT试验及细胞迁移抑制实验,裸鼠皮下移植喉癌抑瘤实验、病理组织切片、免疫组化指标的测定等检测研究重组人内皮抑素的抗肿瘤活性。[结果]重组内皮抑素的复性率可达40%。重组内皮抑素在体外直接抑制肺癌细胞的增殖及迁移。用药21天,对裸鼠皮下移植喉癌的抑瘤率达到40.66%,HE染色、免疫组化及CAM实验表明其对肿瘤组织新生血管的生成有较强的抑制作用。[结论]重组人内皮抑素具有抑制肿瘤组织新生血管生成和直接抑制肿瘤细胞生长和迁移的双重抗肿瘤活性。
- 张广美王淑静任明华徐建永刘远莉陶占华李冀宏刘兴汉
- 关键词：内皮抑素蛋白表达蛋白纯化
- 人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究被引量：13
- 2007年
- 目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽，检测其生物活性。方法 人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸（30肽，序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、胃癌7901细胞（SGC-7901）半数抑制浓度IC50为36μg／ml、47μg／nl，显著低于内皮抑素IC50179μg／ml、202μg／ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47．8％，效果优于内皮抑素28．7％。结论 30肽具有更强抗肿瘤活性，有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。
- 李丹刘兴汉赵炜明李冀宏马洪星张宇雯栗亚
- 关键词：内皮抑素RGD序列抗肿瘤活性
- 人内皮抑素基因改造、表达、纯化及活性检测被引量：1
- 2005年
- 目的克隆诱变的人内皮抑素(human endostatin,hES)氨基端基因,并检测其活性。方法双酶切已诱变的人内皮抑素基因,电泳回收氨基端片段,与质粒pTYB-2重组,转化E．coli BL-21(DE3)。通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,MTT实验,HE染色及流式细胞术检测重组小分子人内皮抑素对新生血管生成、细胞增殖和细胞凋亡的影响。结果基因重组小分子内皮抑素对鸡胚尿囊膜新生血管生成具有明显的抑制作用；对脐静脉内皮细胞和肝癌细胞增殖的抑制存在量效关系；作用24h后,观察到细胞凋亡现象；与对照组相比,细胞凋亡数增加。结论成功构建了人内皮抑素氨基端基因工程菌,得到了具有生物活性的氨基端小分子内皮抑素,为便利临床应用奠定了基础。
- 徐建永林雪松赵炜明王淑静刘兴汉
- 关键词：人内皮抑素基因改造DNA重组
