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HPV E7在人食管鳞癌细胞系EC9706中基因沉默的研究被引量：2: 2015年; 目的探讨基因沉默人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）阳性食管鳞癌细胞系EC9706中E7基因后对细胞内基因表达的影响.方法使用RNAi专用逆转录病毒载体构建可干扰HPV18 E7基因的质粒,转入EC9706细胞系,筛选获得稳定表达干扰片段的细胞株.使用Real-timePCR和Western Blot对胞内相关基因和蛋白进行检测,并比较细胞活力差异.结果通过质粒构建与转染,获得了两株稳定表达干扰片段的细胞株EC9706R8-1及EC9706R8-4.Real-time PCR检测结果发现病毒基因E6、E7均被下调.Western Blot检测结果表明在病毒蛋白E7通路中控制细胞周期的p27蛋白表达量有显著的提高.同时,E6及E7基因下调后,细胞活力也明显下降.结论 EC9706食管癌细胞系中HPV18 E7基因的沉默很可能与食管上皮细胞的癌变有关,该结果为HPV相关食管癌的基因沉默治疗研究提供了一定的理论基础.; 武双刁明坤李劲涛刘洪伟李凡龚平钟儒刚曾毅; 关键词：乳头状瘤病毒基因细胞系

安阳地区不同食管鳞癌标本HPV感染率的比较研究被引量：1: 2012年; 目的对安阳地区的食管鳞癌新鲜手术标本和石蜡标本进行HPV检测，比较两种不同标本来源食管鳞癌HPV感染检测结果，统计学分析二者之间的差异，并同其他区域检测结果进行比较，分析不同标本对检测结果的影响。方法对安阳的23例新鲜手术标本及23例石蜡标本分别进行核酸提取；分别用通用引物PCR鉴定，并用人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒对样品进行分型检测；比较两种标本来源检测结果并进行统计分析；比较分析检测结果与其他地区检测结果的差异。结果经检测新鲜标本HPV感染率为82．6％，其中HPV16型感染率34．8％，HPV18型感染率34．8％。石蜡包埋组织标本HPV感染率78．2％，其中HPV16型感染率30．4％，HPV18型感染率17．4％。结论首次证明两种来源标本对HPV检测结果无显著性影响，均可作为检测HPV的样本，为HPV科研检测提供更广的标本来源。; 曲鹏李劲涛王立东曾毅楚秀生

BALB／c3T3细胞转化实验的优化及其在致癌物协同作用研究中的应用: 2009年; 目的优化BALB／c3T3细胞转化实验，并应用于致癌物间协同致癌作用的研究。方法从血清浓度、培养基类型和致癌物作用时间三个因素对BALB／c3T3细胞转化实验进行优化。采用优化的实验方案，选择致癌物作用7d后重新接种，再以含5％胎牛血清的DMEM／F12（1：1）培养基培养进行细胞转化实验，对致癌物间的协同作用进行检测，通过小鼠体内致瘤实验对转化灶细胞的恶性特征进行验证。结果二乙基亚硝胺（DEN）与2、3、7、8．四氯二苯并二恶英间有较强的协同致癌作用。微囊藻毒素单独具有较强促细胞恶性转化能力，但这种促转化能力却受到DEN的抑制。实验诱发的转化灶具有Ⅱ型转化灶的特征，并可在体液与细胞免疫缺陷（SCID）小鼠体内致瘤。结论经优化的BALB／c3T3细胞转化方案既充分模拟了致癌物联合作用的方式，又缩短了实验周期，可有效应用于致癌物间协同作用的研究。; 张磊赵蕊钟儒刚周玲李德昌吴永宁曾毅; 关键词：细胞系细胞转化病毒小鼠近交BALB/C

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国家科技支撑计划(2006BA119803)