郑州市科技三项费用支持项目(052SGYS33210)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:吴逸明张慧珍许东范清堂杨继要更多>>
- 相关机构:郑州大学更多>>
- 发文基金:郑州市科技三项费用支持项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建被引量:1
- 2006年
- 目的:构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库,为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础。方法:提取肺癌转移淋巴结总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB 5E中,电转化至感受态的大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,形成噬菌体单链抗体库,采用限制性内切酶鉴定其多样性。结果:从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA,逆转录PCR扩增出人可变区基因,连接形成单链抗体,最终构建了库容为1.2×108的抗人肺癌单链抗体库。BstNⅠ酶切法证明构建的抗体库具有良好的多样性。结论:成功地构建了噬菌体展示的抗人肺癌单链抗体库,为进一步筛选肺癌相关蛋白的可溶性抗体奠定了基础。
- 张慧珍杨继要许东范清堂吴逸明
- 关键词:肺肿瘤噬菌体展示