海南省耐盐作物生物技术重点实验室开放基金(shkfjj0515)
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
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- 胡萝卜ISSR反应体系优化的研究被引量:6
- 2010年
- 以改良CTAB法提取胡萝卜基因组DNA作为ISSR-PCR模板,通过单因素试验建立了一套适合胡萝卜ISSR-PCR的优化的反应体系,即25μL反应液中含10×buffer2.5μL,2.0mmol.L-1Mg2+,200μmol·L-1dNTPs,Taq酶1.5U,引物0.5μmol·L-1,DNA模板20ng。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性40s,48~58℃退火45s,72℃延伸2min,进行35个循环,72℃延伸8min,在16℃保存。应用该优化反应体系筛选出了24条有效引物。
- 邱丰艳邓用川林栖凤刘国民
- 关键词:胡萝卜ISSR