山西省自然科学基金(2006011128)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：山西省眼科医院浙江省人民医院山西医科大学第一医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 兔口腔黏膜上皮细胞的体外培养方法被引量：1
- 2008年
- 目的培养兔口腔黏膜上皮细胞,建立稳定的口腔黏膜上皮细胞体外培养体系。方法取兔口腔黏膜组织,用0.25%中性蛋白酶(DispaseⅡ)分离上皮与皮下组织,采用无血清及无3T3细胞培养体系,即角质细胞培养液(DefinedK-SFM)培养兔口腔黏膜上皮细胞,并进行形态学观察及免疫细胞化学检测。结果用中性蛋白酶可成功分离上皮与皮下组织,原代培养11d细胞可融合成片,呈铺路石样,鉴定为单一口腔黏膜上皮细胞。结论利用角质细胞培养液可成功培养出兔口腔黏膜上皮细胞。
- 张岚薛明花李冰
- 关键词：口腔黏膜上皮细胞原代培养
- 兔口腔黏膜上皮干细胞分化为角膜上皮样细胞的体外研究被引量：1
- 2011年
- 目的以羊膜做载体将兔口腔黏膜上皮干细胞诱导为角膜上皮样细胞,探讨口腔黏膜上皮细胞作为种子细胞体外培养构建组织工程角膜的技术方法,为眼表重建提供材料。方法用Ⅳ型胶原黏附法分离纯化口腔黏膜上皮干细胞,对体外培养的口腔黏膜干细胞进行免疫表型鉴定。将筛选后获得的口腔黏膜上皮干细胞种植在去上皮羊膜表面体外培养,待细胞融合成单层后置入插入式培养皿中进行气液界面培养,促进细胞分化形成复层。培养数日后进行苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学、光镜及透射电镜检测,观察羊膜-复层上皮组织结构,免疫荧光检测干细胞特异性标志物P63以及角膜上皮细胞标志物角蛋白3(K3)并与角膜上皮组织比较。结果体外诱导培养数天后,羊膜载体的口腔黏膜上皮细胞形成复层,在组织形态及生物学特性上与角膜上皮相似。并且组织细胞P63、K3表达明显,角膜特异性生物学标志物免疫组织化学染色呈阳性。结论在本实验的培养条件下,获得的口腔黏膜上皮干细胞可在体外培养扩增,呈克隆性生长,具有很强的增殖能力。口腔黏膜上皮干细胞体外培养可构建类角膜上皮。
- 张岚李冰郑晓汾史静华
- 关键词：干细胞细胞培养技术
