国家自然科学基金(30760057)
- 作品数:5 被引量:23H指数:2
- 相关作者:谭德勇余敏马明星杨慧向明钧更多>>
- 相关机构:云南大学云南省第一人民医院云南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省科技攻关计划云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>
- human Arrest-defective-1 (hARD 1) protein is overexpressed in breast cancer in vivo and promotes MCF-7 cell proliferation
- The identification and characterization of genes highly expressed in cancer tissues can indicate a potential r...
- 马明星黄超余敏赖建华杨慧黄惟巍谭德勇
- 关键词:IMMUNOHISTOCHEMISTY
- 人细胞周期素D1和B1真核表达载体的构建及对HeLa细胞的转染
- 2011年
- 目的:构建人细胞周期素cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,并将其瞬时转染到HeLa细胞株中。方法:以HeLa细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增cyclin D1和cyclin B1基因编码的cDNA,并将扩增的cDNA片段插入p3XFLAG-CMV^(TM)-14真核表达载体,分别构建p3XFLAG-cyclin D1和p3XFLAG-cyclin B1重组质粒,重组子经酶切分析和测序鉴定后,用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染HeLa细胞,用Western-blot技术检测细胞中FLAG融合蛋白的表达。结果:经酶切鉴定和Western印迹分析证实人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体构建成功,并能在瞬时转染的HeLa细胞中表达分子量大小相符的重组蛋白。结论:成功构建了人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,为两种细胞周期素及其相关蛋白的功能研究奠定了基础。
- 熊伟陈贵元何敏马明星余敏谭德勇
- 关键词:细胞周期素瞬时转染真核表达
- 一种简便的STR重复次数测定方法被引量:1
- 2008年
- 短串联重复(STR)的多态性分析是生物个体识别最有效的一种手段,在法医学鉴定中已被广泛用于身份识别.但目前使用的方法成本太高,以致不便在更广泛的范围推广.针对法医上常选用的4 bp重复单位的STR基因座,采用PCR产物小于160 bp的迷你STR(Mini STR)和优化聚丙烯酰胺凝胶电泳条件,提高分辨率,使重复单位之间能有效分辨.设计PCR引物,使STR基因座扩增产物的大小为4 bp的倍数,应用8 bp的DNALadder即能精确测定整数倍STR重复单位数.这一方法操作简便,成本低廉,尤其是用于制作人基因身份证,使得人人制作一张基因身份证成为可能.
- 余敏马明星卢培吴松锜任永富谭德勇
- 关键词:DNALADDER
- 血清抑制基因Si1编码蛋白的亚细胞定位研究
- 2009年
- 为进一步研究血清抑制相关基因(Si1)的生物学功能,用绿色荧光蛋白EGFP融合的EGFP/Si1重组蛋白在HeLa细胞中成功表达.结果显示该蛋白定位在细胞核中,这一结果与生物信息学预测结果相符合.通过构建不同长度的EGFP/Si1基因突变体观察其核定位信号所在区段,发现核定位信号区在465~531氨基酸残基之间.Si1基因编码框中肿瘤相关1639位点的改变,虽然并不在入核信号相关结构区,但影响Si1基因表达蛋白的细胞核迁移,进而影响基因功能.
- 赵文秀伍红谭德勇
- 关键词:亚细胞定位核定位信号突变
- 抗hARD1抗血清制备及其肿瘤免疫组化初步分析
- ARD1(Arrest defective 1)最初在酵母细胞中发现,是 N—乙酰基转移酶 NatA 的一个亚基,另一个亚基是 Nat1。NAT1和 ARD1中任何一个亚基的缺失都导致 NatA 活性丧失,致使酵母表现出...
- 余敏黄超马明星赖建华杨慧黄惟巍王泽华焦杨谭德勇
- 关键词:免疫组化分析肿瘤
- Functional characterization of the Serum inhibited-related (SI1) gene
- Previously,to investigate novel serum-inhibitory genes and study their roles in cell cycle regulation,a novel ...
- 伍红马明星石应辉黄惟巍谭德勇
- 抗hARD1抗血清制备及其初步肿瘤免疫组化分析被引量:5
- 2008年
- 人ARD1(human arrest defective1,hARD1)基因被确定具有N-乙酰基转移酶活性,但其生理学功能并不清楚。为了探讨hARD1基因与肿瘤的关系,检测hARD1蛋白在不同肿瘤中的表达,克隆了hARD1基因并进行原核表达,利用镍离子螯合(His-bind)柱层析纯化,得到纯度达95%以上的hARD1蛋白。以纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备了抗hARD1蛋白的抗血清。利用抗hARD1多抗血清检测常见的临床肿瘤病理组织,发现hARD1蛋白在乳腺肿瘤、前列腺癌,以及肺癌中有较高频率的表达,其中乳腺肿瘤中的表达频率最高,达到70%,远高于其他肿瘤组织。表明hARD1蛋白的高表达可能是乳腺肿瘤组织的一个标志,为进一步揭示hARD1与乳腺肿瘤的关系奠定了基础。
- 余敏黄超向明钧赖建华杨慧马明星谭德勇
- 关键词:免疫组化分析肿瘤
- 人外周血ILP2蛋白水平与乳腺肿瘤的关系
- 乳腺癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤,并已成为威胁我国女性生命的最严重的癌症。从近些年乳腺癌诊断的发展趋势看,乳腺癌标志物检测是目前较为准确、快捷的方法,尤其适用于肿瘤的早期诊断。由于外周血具有采集方便,取样创伤小的优点,...
- 马明星向明均余敏严敏黄惟巍谭德勇
- 关键词:双向电泳