转基因生物新品种培育专项(2009ZX08008-010B) 作品数:17 被引量:58 H指数:6 相关作者: 景志忠 贾怀杰 何小兵 房永祥 曾爽 更多>> 相关机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 甘肃农业大学 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 转基因生物新品种培育专项 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
Toll样受体2、4对病毒囊膜蛋白的识别 被引量:6 2011年 TLR2、4是TLRs家族中重要的成员,通过识别囊膜病毒的PAMPs/DAMPs,活化依赖和非依赖于MyD88的信号通路,诱导促炎性细胞因子和趋化因子等的释放,介导先天性抗病毒免疫反应。本文就TLR2、4的基本概况、结构特征、抗病毒信号通路以及对不同囊膜病毒的天然免疫反应等相关研究进展进行简要综述。 何小兵 房永祥 贾怀杰 陈国华 曾爽 景志忠关键词:TOLL样受体 先天性免疫 囊膜蛋白 抗病毒免疫 猪TLR3胞外区片段重组载体的构建、表达和多克隆抗体的制备 被引量:1 2012年 为制备猪TLR3(poTLR3)胞外区蛋白的多克隆抗体,从poTLR3克隆载体扩增胞外区基因序列连接到pGEX-4T-1载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下,表达GST-poTLR3融合蛋白,将表达的融合蛋白纯化,免疫家兔制备抗体,并以间接ELISA法测定抗体效价,利用Western-blot和细胞免疫荧光验证抗体与真核表达蛋结合的白特异性.结果表明:制备的多克隆抗体的效价可达1∶128 000,poTLR3胞外区蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,并且制备的多克隆抗体特异性好、滴度高. 管齐赛 房永祥 贾怀杰 何小兵 周涛 杨孝朴 景志忠关键词:胞外区 原核表达 多克隆抗体 DNA识别受体在天然免疫反应中的作用 被引量:1 2012年 近年来,随着人们对哺乳动物模式识别受体(Patternrecognition receptors,PRRs)的发现和研究的不断深入,PRRs对病原,尤其是对病原生命物质基础——DNA和RNA的识别成为天然免疫学研究的热点和重点领域^[1]。PRRs主要包括Toll样受体(TLRs)家族、RIG-I样受体(RLRs)家族和蛋白激酶R(RNA-ativated protein kinase R, 何小兵 房永祥 贾怀杰 陈国华 曾爽 景志忠关键词:TOLL样受体 免疫反应 KINASE PRRS 哺乳动物 抗菌肽Shiva-1a基因真核表达载体的构建及序列分析 抗菌肽是生物体与生俱来的抗病原微生物感染的小分子多肽,在先天性免疫抗感染的过程中起着十分重要的作用。天蚕素类(Cecropins)抗菌肽是由单基因编码的、细胞核糖体翻译的碱性小分子蛋白,具有分子量小、热稳定性强、无免疫性... 宫晓炜 郑福英 蔺国珍 曹小安 王光华 周继章 才学鹏关键词:真核表达载体 感受态细胞 真核表达质粒 酶切鉴定 抗菌肽 文献传递 正痘病毒干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径 被引量:3 2011年 正痘病毒属的牛痘病毒、痘苗病毒以及猴痘病毒等成员是最重要的动物源性人兽共患病病原。作者围绕这些正痘病毒编码的干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径,重点介绍了病毒阻断宿主干扰素反应、抑制宿主TNF诱导的反应以及失活宿主防御反应的免疫成分等策略,以加深对痘病毒感染的宿主特异性、免疫逃避以及致病的分子机制的理解。 景志忠 贾怀杰 周涛 何小兵关键词:病毒感染 宿主免疫反应 分子机制 痘病毒病:值得高度重视的一类人兽共患病 被引量:6 2011年 痘病毒(poxvirus)是已知的病毒粒子中基因组最大、最复杂的以及宿主范围最广和成员最多的病毒家族,其大部分成员又都能引起动物源性人兽共患病。目前猴痘、羊口疮、禽痘、鼠痘及羊痘在国内外普遍流行、危害严重。本文通过对动物源性人兽共患痘病毒病的介绍,来促进我国加强对痘病毒病的基础理论研究以及防控技术战略储备,以保障人类、动物健康和国家安全。 景志忠 贾怀杰 周涛关键词:痘病毒 公共卫生 口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达 2011年 为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。 魏衍全 田宏 吴锦艳 陈妍 尚佑军 窦永喜 刘湘涛 才学鹏关键词:口蹄疫病毒 增强型绿色荧光蛋白 抗菌肽Shiva 1a基因真核表达载体的构建及序列分析 2011年 为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-Shiva 1a重组表达质粒,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染将重组质粒转染到CHO-K1细胞,荧光显微镜观察其表达情况。通过生物信息学软件对抗菌肽Shiva 1a的二级结构和三级结构进行预测分析。其结果为进一步研究Shiva 1a的抗菌活性和在动物抗病育种方面的应用奠定了基础。 宫晓炜 郑福英 蔺国珍 曹小安 王光华 周继章 才学鹏关键词:抗菌肽 真核表达 猪γδ T淋巴细胞亚群的研究进展 2011年 在概述猪γδ T淋巴细胞亚群的发现、组织分布及其细胞所占比例的基础上,重点介绍了其基因结构与多样性以及细胞的功能和抗原识别的机制,以加深对猪天然免疫应答独特性的理解。 李玩生 曾爽 陈国华 景志忠关键词:T淋巴细胞 T细胞抗原受体 基因结构 天然免疫 病毒感染对宿主TLRs模式识别与免疫应答信号的影响 被引量:6 2012年 TLRs是一类古老的天然模式识别分子,通过识别病毒的PAMPs,活化依赖和非依赖于MyD88的信号通路,诱导IFNs、促炎性细胞因子和趋化因子等分子的释放和表达,清除病毒的感染;同时,病毒为了感染宿主,采用多种免疫逃避策略干扰机体TLRs的信号,尤其调节MyD88、NF-κB、TRIF和IRFs等重要信号分子,以逃避机体天然PRRs的监视、识别和清除。因此,本文重点以VACV、HCV和HIV为例,介绍病毒感染对宿主TLRs模式识别与免疫应答信号的调节,以进一步理解病毒与宿主相互作用的复杂性,为病毒病的有效防治提供理论依据。 景志忠 何小兵 房永祥 贾怀杰 周涛关键词:天然免疫 TOLL样受体 免疫逃避机制