吉林省科技厅重大项目(20040202-1)
- 作品数：7 被引量：32H指数：3
- 相关作者：金宁一郑敏李昌田明尧金扩世更多>>
- 相关机构：军事医学科学院广西壮族自治区兽医防疫检疫站吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅重大项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 口蹄疫病毒重组鸡痘病毒活载体疫苗和DNA疫苗免疫牛的试验研究被引量：7
- 2006年
- 将本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导牛产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫组以及联合免疫组(vUTAL3CP1/pVIRIL18P1,pVIRIL18P1/vUTAL3CP1)诱导的中和抗体滴度分别达到1∶64、1∶64和1∶54,已接近于常规灭活疫苗水平(1∶90),而特异性的T淋巴细胞增殖反应则比后者高得多(P<0.01)。该研究结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。
- 郑敏金宁一秦晓冰金扩世刘棋田明尧郭建顺徐敬龙李昌
- 关键词：口蹄疫重组鸡痘病毒DNA疫苗体液免疫
- 表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗在豚鼠中的免疫原性研究被引量：1
- 2005年
- 目的评价本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的非复制型重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT诱导FMDV模型动物豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将上述2种重组疫苗分别单独或联合接种豚鼠,然后测定FMDV特异性结合抗体、中和抗体和T淋巴细胞增殖反应,并用250ID50的FMDV进行攻击,观察其保护效果。结果这2种重组疫苗均能诱导豚鼠产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。其中以pVRI-OAT/vUTA2-OAT的联合免疫方式的效果最好,其诱导的抗体水平接近于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。攻击保护结果显示3个重组疫苗组均有一定保护效果,完全保护率和部分保护率分别为1/4和2/4。而PBS对照组发病率为4/4。结论证实了这2种重组疫苗在豚鼠体内具有良好的免疫原性。上述研究结果为FMDV基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 郑敏金宁一尹革芬夏志平刘棋田明尧贾雷立李昌
- 关键词：DNA疫苗免疫应答
- 牛对表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗联合免疫的免疫应答被引量：3
- 2006年
- 将构建的共表达口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复合多表位基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vVTA2-OAT(首免/加强免疫)、pVRI-OAT/vUTA2-OAT(首免/加强免疫)和vUTA2-OAT/pVRI-OAT(首免/加强免疫)等3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明,这3种方式均能诱导牛产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答,其中pVRI-OAT/vUTA2-OAT联合免疫方式的免疫效果最佳,诱导的中和抗体达1∶64,已接近于常规灭活疫苗免疫方式,而且其可以诱导比灭活疫苗免疫方式高得多的细胞免疫水平(P<0.01)。上述试验结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。
- 郑敏金宁一田明尧李昌秦晓冰刘棋贾雷立张林
- 关键词：DNA疫苗
- 牛对表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗联合免疫的免疫应答研究
- 将本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vUTFA2-OAT、pVRI-OAT/vUTA2-...
- 郑敏金宁一田明尧李昌秦晓冰刘棋贾雷立张林
- 关键词：口蹄疫重组鸡痘病毒DNA疫苗体液免疫
- 文献传递
- vUTAL3CP1重组载体疫苗与pVIRIL18P1 DNA疫苗在猪体内的免疫原性研究被引量：3
- 2006年
- 目的评价本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及免疫辅助基因的重组鸡痘病毒vUTAL3CP1和重组DNA疫苗pVIRIL18P1在猪体内诱导特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将上述2种疫苗采用4种不同的组合方式单独或联合给猪进行肌肉注射,用ELISA方法和中和实验检测猪产生的抗体水平,T淋巴细胞增殖反应、CTL反应以及T淋巴细胞亚类。结果这2种基因工程疫苗均能诱导猪产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中单独免疫组vUTAL3CP1/vUTAL3CP1的效果最好,其诱导的抗体水平已接近于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。联合免疫组中vUTAL3CP1/pVIRIL18P1可以诱导比vUTAL3CP1/vUTAL3CP1更高的CTL杀伤活性,但体液免疫水平略低。结论证实了这2种基因工程疫苗在猪体内均有良好的免疫原性。同时初步筛选出vUTAL3CP1/vUTAL3CP1和pVIRIL18P1/vUTAL3CP1组等较佳的免疫策略,为下一步的攻毒保护试验奠定了基础。
- 金宁一郑敏秦晓冰金扩世刘棋马鸣潇田明尧李昌万遂如
- 关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒DNA疫苗免疫原性
- O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达被引量：14
- 2005年
- 首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP 1基因的3个抗原表位,与另外扩增的流行毒株VP 1基因末端273 bp片段相连,构建出O型VP 1嵌合基因片段(VP 1O)。然后,将VP 1O基因连接到原核表达载体pET 28a上,构建了重组表达质粒pET 28a-VP 1O,转化大肠杆菌BL 21(DE 3)进行诱导表达。SDS-PAGE电泳表明,VP 1O基因在大肠杆菌中获得表达。W estern b lotting检测证实表达的VP 1O蛋白具有良好的生物学活性。对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化,获得了较高纯度的VP 1O蛋白。
- 郑敏金宁一鲁会军韩松金扩世李昌
- 关键词：口蹄疫病毒VP1基因
- 重组鸡痘病毒在哺乳动物细胞内复制研究
- 痘病毒表达系统是按照痘苗病毒载体思路发展起来的一种新型痘病毒载体。其继承了与痘苗病毒载体相同的优点,避免了病毒基因重组整合入宿主细胞染色体的可能性,然而在人和哺乳动物细胞内
- 金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏李昌计越
- 文献传递
- 口蹄疫重组鸡痘病毒和DNA疫苗的豚鼠免疫保护试验研究
- 将构建的携带FMDV衣壳蛋白P1-2A基因和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及编码FMDV P1-2A基因和猪IL-18基因的重组DNA疫苗pVIRIL18P1,分别以单独和混合的方式给豚鼠进行...
- 郑敏金宁一张洪勇李昌田明尧马鸣潇贾雷立
- 关键词：DNA疫苗
- 文献传递
- 重组鸡痘病毒和DNA疫苗对口蹄疫病毒的豚鼠免疫保护被引量：5
- 2005年
- 将构建的携带FMDV衣壳蛋白P1-2A和蛋白酶3C编码基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及编码FMDVP1-2A基因和猪IL-18基因的重组DNA疫苗pVIRIL18P1,分别以单独和混合的方式给豚鼠进行2次免疫,然后测定FMDV特异性结合抗体、中和抗体和T淋巴细胞增殖反应,并用250ID50的FMDV进行攻击,观察其保护效果。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导豚鼠产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。其中以vUTAL3CP1两次免疫组的效果最好,其诱导的抗体水平已接近于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。攻击保护结果表明该组完全保护率可达3/4,而另外两组也具有一定保护效果。上述研究结果为进一步进行大动物免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。
- 郑敏金宁一张洪勇李昌田明尧马鸣潇贾雷立
- 关键词：重组鸡痘病毒DNA疫苗口蹄疫病毒免疫保护力口蹄疫
- 口蹄疫重组鸡痘病毒在豚鼠体内的毒性、分布、抗体消长规律的研究被引量：1
- 2006年
- 以病毒为重组疫苗的载体构建的活载体基因重组疫苗免疫哺乳动物,抵抗传染病的研究已获得成功,其中鸡痘病毒存在着很大的潜在优势。然而,作为非复制的载体其安全性迫切需要检验。选择重组鸡痘病毒vUTAL 3CP1分别以正常剂量、超大剂量,肌肉注射、静脉注射接种豚鼠,第一次免疫后间隔14 d分别进行二免、三免;对妊娠豚鼠的不同阶段进行免疫,通过PCR、RT-PCR、EL ISA、中和抗体检测和免疫组化等检测方法,对疫苗在豚鼠体内的基因和蛋白分布、抗体消长规律以及毒性,和对妊娠豚鼠和子代体内的基因和蛋白分布、抗体消长规律以及毒性进行研究。实验结果表明:肌肉接种FMD重组疫苗株后,临床观察、病理组织学和检测表明在整个试验期间,试验组免疫动物精神状态良好、饮水、采食等临床表现一切正常;病毒培养表明只在接种的部位免疫3 h可以培养出病毒,其他组织和其他时间点均未能培养出病毒,证明重组鸡痘病毒vUTAL 3CP1在体内是一过性感染,免疫3 h的病毒是未完全吸附的病毒,而不是复制的病毒;通过PCR,RT-PCR检测,可在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、脑、肠系膜淋巴结内检测到了FPV 4b DNA和FMDV VP1 DNA,且在大部分组织能存留5 d左右;增加免疫剂量和进行多次免疫,其在体内存留时间仍然很短,重组疫苗可诱导豚鼠产生较高水平的抗FMDV特异性抗体和中和抗体;静脉注射也在体内检测到病毒的DNA,但其在体内的分布和存留时间短,诱导豚鼠产生的抗FMDV特异性抗体和中和抗体水平比肌肉注射低、且持续时间短,病毒培养表明只在任何组织和任何时间点均未能培养出病毒;对妊娠豚鼠的不同阶段均无毒性,未造成流产、早产、死胎等不良反应,子代未检测到病毒的DNA。以上均证明重组鸡痘病毒vUTAL 3CP1在豚鼠体内存留时间短,对妊娠豚鼠、子代无毒性,且能产�
- 金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏李旭计越刘慧娟霍晓伟兰晓葳
- 关键词：毒性抗体消长
