转基因生物新品种培育专项(2008ZX08007-001) 作品数:5 被引量:18 H指数:3 相关作者: 刘同欣 陈敏 张嘉保 赵志辉 高妍 更多>> 相关机构: 中国农业大学 吉林大学 吉林省农业科学院 更多>> 发文基金: 转基因生物新品种培育专项 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 更多>>
SDS-PAGE-薄层扫描联用法测定3种不同来源的乳铁蛋白 被引量:9 2011年 目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100~2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。 邢志恩 王军 戴蕴青 陈燕卉 陈敏关键词:牛乳铁蛋白 薄层扫描 草原红牛肌生成抑制素基因内含子1多态性及部分屠宰性状的相关性分析 被引量:4 2010年 以草原红牛为研究对象,采用PCR-SSCP方法检测肌生成抑制素(MSTN)基因内含子1基因的多态性。结果表明:在内含子1发现多态性位点,有AA、AB和BB 3种基因型;测序结果显示在1 452 bp处存在C→T的碱基突变;该位点的多态性对草原红牛的净肉率有显著影响(P<0.05),BB型和AB型显著高于AA型(P<0.05),BB型和AB型之间差异不显著(P>0.05);其他屠宰性状在不同基因型间差异不显著(P>0.05)。由此可以初步推断MSTN基因可能是影响草原红牛肉质性状的一个主效基因或是一个影响肉质性状的QTL连锁的基因。 张胜 张永宏 高妍 张犁苹 刘同欣 秦莹 马倩 张嘉保 赵志辉 张国梁 邢沈阳关键词:草原红牛 PCR-SSCP 屠体性状 重组人乳铁蛋白对原代肝·肾细胞的毒性研究 2011年 [目的]通过模拟肝、肾毒性的体外细胞试验,研究重组人乳铁蛋白是否对小鼠原代肝肾细胞具有毒性作用,为其进一步的安全性评价提供依据。[方法]采用模拟体外消化试验所得的重组人乳铁蛋白消化产物及重组人乳铁蛋白为受试物,牛乳铁蛋白为对照,以小鼠原代肝、肾细胞为平台,用MTT法检测受试物对细胞活性的半数抑制浓度(IC50),研究细胞毒性剂量-反应关系。[结果]在设定的试验条件下,未发现重组人乳铁蛋白对肝、肾细胞存在靶毒性,结果能与已进行的亚慢性毒性试验相互印证。[结论]为重组人乳铁蛋白的进一步安全性评价及其他转基因食品的安全性评价方法提供了参考。 梁佳 戴蕴青 车会莲 陈敏关键词:肾细胞 细胞毒性试验 转基因食品安全性评价 草原红牛血液蛋白多态性及与生产性能相关性 被引量:5 2009年 为探索草原红牛血液蛋白多态性与生产性能的相关关系,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测了13头草原红牛和18头利×草杂交牛的血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)和后白蛋白(Pa)3个血液蛋白多态性位点,结果发现Hb、Alb、Pa分别受2个等位基因控制,其中Hb在草原红牛中发现1头牛有4条带的变异;血液蛋白多态性位点与生产性能的方差分析表明,3个蛋白位点对草原红牛及其利木赞改良牛群体的某些性状存在正相关或负相关。 潘英树 张永宏 高妍 秦莹 马倩 刘同欣 陈承祯 刘国文 王哲 赵志辉 张嘉保关键词:草原红牛 血液蛋白多态性 错配PCR对牛X染色体相关基因杂合子的检测 2009年 利用DNA测序技术,在荷斯坦奶牛胎儿中找到X染色体基因GLRA2 3’端的杂合位点(C/T),设计错配引物在该位点对胎儿及其父本、母本基因组进行PCR扩增,建立起GLRA2基因的错配PCR技术,该技术可以快速在群体基因组中检测这一杂合位点. 曹更生 王毅彰 周文平关键词:杂合子 单核苷酸多态