国家高技术研究发展计划(无)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：孙玉文王翠花牟晋华徐文玲寇洪超更多>>
- 相关机构：安徽农业大学山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：山东省农业重大应用技术创新课题山东省农业良种工程项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大白菜抗软腐病基因BrWRKY33植物表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 利用农杆菌侵染法获得抗软腐病转BrWRKY33基因大白菜,首先要构建植物表达载体。本实验根据BrWRKY33基因的序列及pROK2表达载体的酶切位点设计引物(FN/RN),获得BrWRKY33基因,然后将该基因连接到克隆载体pGEM-TEasy,重新构建了克隆载体T-WRKY。经测序及酶切验证,选取PCR反应中错配率最低的产物,构建了表达载体pROK2-WRKY,并将该表达载体转入到根癌农杆菌EHA105中,并对其转化子进行了鉴定。结果表明,PCR扩增获得目的基因BrWRKY33全长约1443bp,PCR及酶切结果鉴定表明克隆载体T-WRKY已经重新构建成功。表达载体的PCR及BamHⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定表明有4个重组子表现阳性,表明目的基因已经插入到pROK2表达载体,表达载体构建成功。PCR鉴定表明表达载体pROK2-WRKY已经转入根癌农杆菌EHA105中。本实验结果将为进一步研究大白菜抗软腐病基因的转化奠定基础。
- 寇洪超王翠花孙玉文徐文玲牟晋华
- 关键词：大白菜软腐病植物表达载体
