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国家自然科学基金(s30672474)

作品数：1 被引量：4H指数：1
相关作者：刘毅何贤辉曾学思徐丽慧孙建方更多>>
相关机构：中国医学科学院北京协和医学院暨南大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇四聚体
  • 1篇淋巴
  • 1篇淋巴细胞
  • 1篇淋巴细胞性
  • 1篇淋巴细胞性脉...
  • 1篇脑膜
  • 1篇脑膜炎
  • 1篇聚体
  • 1篇LCMV
  • 1篇病毒
  • 1篇H-

机构

  • 1篇暨南大学
  • 1篇中国医学科学...

作者

  • 1篇孙建方
  • 1篇徐丽慧
  • 1篇曾学思
  • 1篇何贤辉
  • 1篇刘毅

传媒

  • 1篇生物工程学报

年份

  • 1篇2008
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
H-2D^b四聚体的制备及其在检测LCMV特异性CD8^＋T细胞中的应用被引量：4
2008年
MHC四聚体技术是研究抗原特异性淋巴细胞应答的关键技术之一。为研究H-2D^b基因型(如C57BL/6)小鼠的特异性CD8^+T细胞免疫应答,需要建立H-2D^b四聚体制备技术平台。首先以RT-PCR方法克隆H-2D^b重链基因的cDNA,进而构建H-2D^b胞外域与生物素化酶BirA底物肽(BSP)融合蛋白的表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。在LCMV GP_(33-41)抗原肽(KAVYNFATC,KAV)和人β_2-微球蛋白存在时,通过稀释法复性获得H-2D^b/KAV单体。该单体经生物素化并纯化后与PE-链亲和素按4:1的比例混合,即形成四聚体。通过流式细胞术检测经KAV肽免疫的C57BL/6小鼠体内的LCMV特异性CD8^+T细胞的频率.结果表明在外周血、引流淋巴结和脾脏中均可检测到一定频率的LCMV特异性CD8^+T细胞,其中以对外周血标本染色的效果最佳。成功建立了小鼠H-2D^b四聚体制备技术平台,为监测及分析基于H-2D^b基因型小鼠的实验性免疫治疗创造了条件。
刘毅徐丽慧曾学思孙建方何贤辉
关键词：淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒原核表达
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