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国家自然科学基金(31170748)

作品数：15 被引量：15H指数：2
相关作者：石亚伟彭婷婷任页玫杨艳王慧更多>>
相关机构：山西大学太原科技大学山西医学科学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 4篇医药卫生

主题

  • 5篇蛋白
  • 4篇腓骨
  • 4篇腓骨肌
  • 4篇腓骨肌萎缩
  • 4篇腓骨肌萎缩症
  • 4篇肌萎缩
  • 4篇肌萎缩症
  • 3篇蛋白相互作用
  • 3篇细胞
  • 3篇相互作用
  • 3篇结构域
  • 3篇EZRIN
  • 2篇荧光
  • 2篇埃兹蛋白
  • 2篇N端
  • 1篇荧光光谱
  • 1篇脂质体
  • 1篇双分子
  • 1篇酸性
  • 1篇髓鞘

机构

  • 9篇山西大学
  • 3篇太原科技大学
  • 1篇山西医科大学...
  • 1篇山西医学科学...

作者

  • 8篇石亚伟
  • 4篇彭婷婷
  • 3篇任页玫
  • 3篇杨艳
  • 2篇王慧
  • 1篇段英俊
  • 1篇贾原
  • 1篇肖虹
  • 1篇杨廷
  • 1篇梁敏

传媒

  • 5篇中国生物化学...
  • 1篇医学综述
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇中国科学：生...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 4篇2015
  • 2篇2014
  • 1篇2012
共 15 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
荧光双分子互补分析Ezrin与L-periaxin的互作模式被引量：2
2015年
腓骨肌萎缩症4F亚型是Periaxin基因的突变所导致一种脱髓鞘型遗传病.Periaxin蛋白是外周神经系统中特异且大量表达的蛋白,在髓鞘成熟与维护中发挥重要作用.而Ezrin是一种膜骨架连接蛋白,在细胞形态的维持、运动、黏附等方面发挥重要作用.在前期已证实L-periaxin与Ezrin间存在蛋白互作的基础上,本文通过分子荧光互补实验,结合免疫荧光定位实验、免疫共沉淀等技术,进一步分析并揭示了L-periaxin蛋白与Ezrin蛋白之间的互作方式,具体为L-periaxin(1-200 aa)与Ezrin(1-296 aa)以及L-periaxin(1060-1461 aa)与Ezrin(475-585 aa)以"头对头"与"尾对尾"的方式发生相互作用.Ezrin可能是一种引导L-periaxin在施万细胞膜上堆积的新的分子配体,二者可能通过蛋白分子间更加紧密的方式完成在细胞膜处的堆积,参与到髓鞘的维护中.
彭婷婷王慧石亚伟
关键词：EZRIN蛋白相互作用
L-periaxin与DRP2蛋白互作的精细分析
2015年
轴周蛋白L-periaxin作为外周神经系统中特异表达的骨架蛋白之一,在髓鞘成熟与维护过程中发挥重要作用.肌营养不良相关蛋白2(DRP2)是目前报道与L-periaxin存在明确相互作用的唯一蛋白,但两蛋白精细的互作区域及互作的分子机制仍不清楚.本研究通过双分子荧光互补、免疫共沉淀、GST pull-down、荧光光谱、细胞定位等技术,进一步揭示了periaxin蛋白的核定位信号NLS结构域上3段不同的亚结构域中,NLS1只参与periaxin蛋白的核定位,NLS2和NLS3参与DRP2蛋白的互作;DRP2蛋白中spectrin like2和WW结构域参与和L-periaxin蛋白的互作.L-periaxin与DRP2互作区域的精细定位,为进一步在蛋白水平探讨L-periaxin与脱髓鞘型腓骨肌萎缩症4F亚型的发生机制之间的关系提供参考.
杨艳石亚伟
关键词：SPECTRIN蛋白相互作用
双分子荧光互补系统分析S-periaxin蛋白的聚合被引量：4
2014年
S-periaxin蛋白是施旺氏细胞特异性表达的一种蛋白,在维持髓鞘的稳定方面发挥重要作用,该蛋白基因的突变引起腓骨肌萎缩症4F亚型的发生。Periaxin基因由于mRNA剪切方式的不同可以编码两种长短不同的含PDZ结构域的蛋白,即L-periaxin和S-periaxin。两种蛋白在施旺氏细胞的定位存在明显的差异,相对L-periaxin而言,S-periaxin无论是分子结构还是生物学功能均未见相关研究。该文从大鼠的施旺氏细胞系RSC96克隆了S-periaxin基因,构建了原核表达载体pETM-3C-S-periaxin,在大肠杆菌中进行重组表达,经Ni-NTA亲和柱和Sephacryl S-200凝胶层析柱获得电泳纯的目的蛋白。体外戊二醛交联分析蛋白的聚合状态表明,S-periaxin蛋白在体外易于形成不同聚合度的聚合物。免疫共沉淀也表明,S-periaxin蛋白存在同源蛋白间相互作用。另外,构建了原、真核双分子荧光互补系统,并利用该系统分析了细胞内S-periaxin蛋白间的相互作用。
任页玫石亚伟
关键词：免疫共沉淀
PICK1中N端酸性区域对其PDZ结构域脂质结合能力的调节被引量：1
2012年
蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(protein interacting with Cαkinase 1,PICK1)是衔接膜上受体和蛋白激酶Cα的重要蛋白.利用荧光光谱结合定点突变技术、蛋白与脂质覆盖法等方法,分析了PICK1蛋白N末端区域几个酸性氨基酸残基对PDZ结构域与膜脂结合的影响,以及钙离子结合N末端酸性区域对PDZ脂结合能力的调节.结果显示,带有上游酸性区域的PDZ结构域(NPDZ)的脂质结合能力仅相当PDZ结构域的15%,相比单独的PDZ结构域与脂质的解离常数Kd(PDZ)为1.58×103μg.L-1,NPDZ与脂质解离常数Kd(NPDZ)为3.3×104μg.L-1,其中在N末端酸性残基中D8与D12两个天冬氨酸是影响脂质结合能力减弱的关键残基,若将二者分别突变为丙氨酸后,NPDZ与脂质的解离常数分别为:Kd(D8/A)=4.42×103μg.L-1;Kd(D12/A)=1.73×103μg.L-1接近于PDZ结构域与脂质结合能力;钙离子会增强NPDZ脂结合能力,当钙离子浓度达到30μmol/L时,NPDZ的脂结合能力提高2.3倍,但只相当于PDZ的50%的结合能力.
杨廷贾原肖虹石亚伟
关键词：PDZ结构域脂质体荧光光谱CA2+
Periaxin与腓骨肌萎缩症4F亚型被引量：1
2015年
Periaxin是施万细胞特异表达的一种蛋白,在维持髓鞘稳定性方面起重要作用,该基因突变将导致脱髓鞘型常染色体隐性遗传的腓骨肌萎缩症4F亚型发生。从分子遗传学角度探讨腓骨肌萎缩症4F亚型发病的机制已成为目前研究的热点。从periaxin的分布、结构与功能开展研究,寻找与其相互作用的蛋白质并揭示其互作的生物学意义,从蛋白质水平上研究腓骨肌萎缩症的发病机制具有重要意义。
任页玫石亚伟
L-Periaxin蛋白与Ezrin蛋白相互作用初步分析被引量：4
2014年
Periaxin是施旺(Schwann)细胞中特异表达的支架蛋白之一,参与髓鞘成熟及稳定.Periaxin的基因缺失或突变导致脱髓鞘型腓骨肌萎缩症(CMT)4F亚型的发生.埃兹蛋白(ezrin)是一种膜骨架连接蛋白,其在维持细胞形态和运动方面具有重要作用,与肿瘤细胞转移密切相关.本文通过免疫共沉淀、双荧光共定位、YFP双分子荧光互补、GST-pull-down等实验方法,分析了L-periaxin蛋白与ezrin蛋白之间的相互作用.结果表明,L-periaxin蛋白与ezrin蛋白可在细胞质中共定位并可发生相互作用.
王慧任页玫段英俊彭婷婷石亚伟
关键词：埃兹蛋白蛋白相互作用
Periaxin蛋白与腓骨肌萎缩症被引量：2
2015年
Periaxin是施旺氏细胞(Schwann cells)与晶状体纤维细胞中特异表达的支架蛋白之一.在施旺氏细胞包裹轴突形成髓鞘过程中,periaxin蛋白参与髓鞘的延展、修复及再生等.PRX基因的缺失或突变将引起脱髓鞘型腓骨肌萎缩症(CMT)4F亚型的发生.本文就periaxin蛋白分子结构特点、生理学功能、以及其基因突变与脱髓鞘型腓骨肌萎缩症CMT4F亚型的发生等进行综述.
杨艳彭婷婷石亚伟
关键词：髓鞘
敲除L-periaxin基因的大鼠RSC96细胞系的建立被引量：1
2016年
轴周蛋白(Periaxin)是外周神经系统非致密性髓鞘中特异表达的蛋白,编码Periaxin的基因经由选择性剪接产生两种蛋白异构体L-periaxin和S-periaxin,对髓鞘形成的初始化有重要作用。至今在Periaxin基因上已发现有18种不同的位点突变导致外周脱髓鞘神经疾病腓骨肌萎缩症4F亚型(CMT4F)的发生。利用转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)靶向基因敲除技术对大鼠RSC96细胞的periaxin基因进行敲除,根据TALENs设计原则,确定L-periaxin基因的敲除靶点在其编码NLS结构域部分,设计相应的TALEN左臂与右臂的识别序列,构建含上述识别序列的L-periaxin基因敲除载体TALEN-L和TALEN-R,并将其转入RSC96细胞,经嘌呤霉素药物筛选,获得L-periaxin基因敲除细胞株,经测序确认大鼠RSC96细胞中的基因组中L-periaxin基因区段已被敲除,成功构建了L-periaxin基因敲除细胞模型。计算L-periaxin基因敲除载体的突变率为21.6%。Western blotting实验证明,在RSC96细胞中只能检测到S-periaxin蛋白的表达。通过流式细胞术及MTT实验检测基因敲除细胞的细胞周期和生长速度,发现敲除L-periaxin基因的细胞生长速度缓慢,G1期细胞增多,S期细胞减少。
梁敏彭婷婷石亚伟
关键词：基因敲除
L-periaxin与Ezrin的N端FERM结构域结合依赖其第3段核定位信号序列被引量：1
2017年
L-periaxin是外周神经系统特异表达的骨架蛋白之一,占外周神经系统髓鞘总蛋白质的16%,参与髓鞘形成和维护。埃兹蛋白(Ezrin)属于Ezrin-Radxin-Moesin(ERM)蛋白质家族,与细胞黏附、迁移、生存以及肿瘤的发生、发展相关。作者前期研究证实,L-periaxin与Ezrin通过"头对头,尾对尾"的模式相互结合。本文通过双分子荧光互补、免疫共沉淀、GST pull down、荧光共定位、海肾荧光素酶互补、荧光光谱以及分子对接等方法,揭示L-periaxin的核定位信号区(nuclear location signal,NLS)与蛋白质Ezrin的FERM(Ezrin Radixin Moesin)结构域的"头对头"相互结合,依赖Lperiaxin第3段核定位信号序列NLS3与Ezrin的FERM结构域的F3亚结构域。本结果为进一步理解Ezrin在髓鞘化过程中的作用,以及阐明调节L-periaxin蛋白功能的信号通路奠定基础。
郭涛杨艳杨艳
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