浙江省自然科学基金(M303606) 作品数:12 被引量:40 H指数:6 相关作者: 朱小春 周艳 王晓冰 夏晓茹 孙莉 更多>> 相关机构: 温州医学院附属第一医院 温州医学院 温州大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 温州市科技局资助项目 温州市科技局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响 被引量:9 2008年 探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响。将发病早期和晚期的MRL/lpr狼疮鼠分别接受ATO、环磷酰胺(CTX)和生理盐水(NS)治疗2个月,然后用ELISA法测血清中IFN-γ、IL-4的浓度和抗ds-DNA抗体水平及四色流式细胞术测脾脏CD3+(T)细胞、CD3+CD4+(Th)细胞、CD3+CD4+IFN-γ+IL-4-(Th1)细胞和CD3+CD4+IL-4+IFN-γ-(Th2)细胞的百分率,从而研究ATO对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响。发现给药后,3、5月龄ATO组MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体水平明显下降(P<0.05),其血清IFN-γ和IL-4浓度、Th1、Th2和CD3+细胞百分率均低于相应月龄的NS组(P<0.05),且NS组中5月龄组Th1/Th2值较3月龄组显著升高(P=0.003),而在ATO组中差异无统计学意义(P=0.187)。因此,研究显示ATO能显著降低发病早期和发病晚期的MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,可抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-4的血清水平和细胞诱生水平,并在一定程度上逆转发病晚期的MRL/lpr狼疮鼠的Th1偏移。 王晓冰 陈培荣 张挺 朱小春 周艳 孙莉 陈朝生关键词:三氧化二砷 IL-4 三氧化二砷对BXSB狼疮鼠生存时间及脾细胞分泌白细胞介素-4干扰素-γ的影响 被引量:8 2007年 目的探讨三氧化二砷(ATO)对BXSB狼疮小鼠生存时间、外周血抗dsDNA抗体水平及离体脾脏单个核细胞白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ分泌水平的影响。方法BXSB狼疮小鼠44只,随机分为2组,治疗组予腹腔内注射ATO,对照组注射等量生理盐水,酶联免疫吸附试验(ELISA)测其外周血抗dsDNA抗体水平,并将生存时间作比较:另外,通过体外培养脾脏单个核细胞比较C57和BXSB小鼠脾脏单个核细胞分泌IL-4、IFN-γ水平的差异,然后观察ATO对BXSB小鼠脾脏单个核细胞IL-4、IFN-γ分泌水平的影响,同时观察ATO对细胞活性的影响。结果ATO可延长BXSB狼疮小鼠的生仔时间,显著降低其外周血中抗dsDNA抗体的水平:1μmol/L浓度的ATO对小鼠脾脏单个核细胞的活性无明显影响:与C57小鼠相比,BXSB很疮小鼠脾脏单个核细胞在体外经有丝分裂原刺激之后分泌IL-4、IFN-γ水平较高,ATO能显著抑制其分泌。结论ATO可延长BXSB狼疮鼠的生仔时间,降低其外周血抗dsDNA抗体的水平,提示ATO对BXSB狼疮鼠有一定的治疗作用:ATO抑制该小鼠脾脏单个核细胞IL-4和IFN-γ的分泌可能是其发挥治疗作用的重要机制之一。 林素仙 周艳 陈丹 朱小春 许菲菲关键词:白细胞介素4 三氧化二砷 三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响 被引量:3 2009年 目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响。方法MRL/lpr狼疮鼠随机分为ATO组(0.4mg·kg-1·d-1,ip)、环磷酰胺(CTX)组(50mg·kg-1每周1次,ip)和生理盐水(NS)组(按体重取量,ip),给药2个月。取脾脏制成脾细胞悬液,加入佛波醇酯(PMA)和ionomycin活化,同时加monensin抑制蛋白转运,于37℃,5%CO2培养4h后,用四色流式细胞术测脾脏CD3+(T)细胞和CD3+CD4+(Th)细胞的百分率以及CD3+CD4+(Th)细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平;分离血清,用ELISA法测血清中抗ds-DNA抗体、IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的浓度。结果①给药后,ATO组小鼠血清的抗ds-DNA抗体水平较给药前明显下降(P<0.01),而NS对照组则明显升高(P<0.05)。②ATO组CD3+细胞和CD3+CD4+百分率均显著低于NS组(P<0.01);③ATO组的血清IFN-γ和IL-12浓度均低于NS组(前者P<0.01,后者P=0.018);④ATO组Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12表达均显著低于NS组(P<0.01)。结论三氧化二砷能显著降低MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-12的血清水平和Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平。 王晓冰 陈丹 章圣辉 朱小春 孙莉关键词:三氧化二砷 细胞因子 三氧化二砷对狼疮小鼠存活率和自身免疫反应的影响(英文) 被引量:8 2007年 目的探讨三氧化二砷(ATO)在治疗系统性红斑狼疮中的应用价值并探讨其作用机制。方法① BXSB狼疮小鼠随机分为ATO治疗组和对照组,每组17只。ATO治疗组隔日ip ATO0.4 mg·kg-1至d105,实验持续至d 210结束,观察两组小鼠的存活率,采用ELISA法检测小鼠血清IgG和抗ds-DNA抗体水平。②另外20只BXSB狼疮小鼠,同上分组处理,至d 90处死取脾和肾组织,提取总RNA,用RT-PCR方法检测脾和肾组织中干扰素γ(IFN-γ)mRNA的表达。结果至d210,ATO治疗组小鼠死亡8只,对照组死亡13只。至d90和d105,治疗组小鼠血清抗ds-DNA抗体(A450 nm)分别为0.335±0.011和0.223±0.017,对照组分别为0.688±0.016和0.683±0.014。至d90 ATO治疗组小鼠脾和肾组织IFN-γ mRNA表达较对照组亦明显下降。至d 105,ATO治疗组血清IgG水平较对照组明显下降,分别为(4.9±1.3)和(6.9±1.0)g.L-1。结论 ATO可提高BXSB狼疮小鼠的存活率,降低血清IgG和抗ds-DNA抗体水平,抑制脾和肾组织IFN-γ mRNA的表达。 夏晓茹 徐宏 朱小春关键词:三氧化二砷 存活率 自身免疫 细胞凋亡在系统性红斑狼疮发病机制中的作用 被引量:6 2007年 系统性红斑狼疮(SLE)是一种多因素疾病,其病因和发病机制尚未明确。越来越多的研究证实,SLE患者的细胞凋亡率增加,同时又存在对凋亡细胞的清除障碍。未被清除的凋亡物质获得免疫原性,不断攻击机体免疫系统,破坏了对自身抗原的中枢和外周耐受机制,导致SLE的发病。因此,认识到SLE是一种细胞凋亡失调的自身免疫性疾病,有助于治疗策略的调整。 王晓冰 朱小春关键词:系统性红斑狼疮 细胞凋亡 自身免疫应答 三氧化二砷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用及对TGF-β1异常表达的影响 2010年 目的研究三氧化二砷(Arsenictrioxide,ATO)对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用及对。肾小管TGF-β1表达的影响。方法将MRL/lpr狼疮鼠45只随机平分为ATO组、CTX组和NS组,观察各组MRL/lpr狼疮小鼠治疗前后尿蛋白(半定量)的变化、肾组织病理改变、肾组织免疫球蛋白IgG、补体C3的表达及用免疫组织化学方法检测肾组织TGF—β1的表达。结果尿蛋白分析:给药后ATO组较NS组有明显减少(P〈0.01)、CTX组较NS组也有减少(P〈0.01)。免疫荧光IgG、补体c3的表达:在NS组可见IgG沿肾小球系膜区,毛细血管袢弥漫沉积(+-3+),而ATO组、CTX组则明显减少(--+),经统计发现ATO组、CTX组较NS组明显减少(P〈0.05);补体C3的表达差异无统计学意义。肾小球细胞数及肾组织活动积分在ATO组及CTX组中均较NS组明显减少(P〈0.05)。免疫组化:TGF-β1在肾小管可见明显表达,肾小球表达不明显,ATO组的阳性小管数较NS组明显减少(20.28±1.90对68.23±2.87,P〈0.01),CTX组的阳性小管数较NS组明显减少(23.26±1.71对68.23±2.87,P〈0.01)。结论三氧化二砷可以下调肾组织TGF-β1的表达改善小管病变,同时可以通过缓解肾小球、小管间质炎症及减少免疫复合物的沉积达到改善狼疮性。肾炎的进展。 陈丹 王晓冰 李凡凡 陈孝倩 朱小春三氧化二砷对BXSB狼疮小鼠自身免疫及其生存时间的影响 被引量:8 2007年 目的探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对BXSB狼疮小鼠自身免疫及其生存时间的影响。方法BXSB狼疮小鼠随机平分两组,即ATO治疗组和对照组,ATO0.4mg/(kg.d)隔日腹腔注射至90天和105天,观察至210天实验结束,比较两组小鼠生存时间的差异;采用ELISA法检测小鼠血清抗ds-DNA抗体和IgG表达水平,RT-PCR法分别检测脾和肾组织干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)mRNA表达水平。结果两组BXSB小鼠(每组各17只)生存时间比较,至210天时,ATO治疗组总死亡8只,而对照组总死亡13只,两组比较差异有显著性(χ2=4.20,P<0.05);血清抗ds-DNA抗体(OD值)对照组为0.566±0.080,ATO组为0.392±0.087,低于对照组(P<0.001)。ATO组105天的血清IgG水平较治疗前和对照组均明显下降(P<0.05)。治疗组与对照组小鼠脾组织IFN-γmRNA表达(灰度比值)分别为0.540±0.300和2.320±0.522(P<0.01);肾组织IFN-γmRNA表达(灰度比值)分别为0.338±0.163和0.588±0.104(P<0.05)。结论ATO能够延长BXSB小鼠的生存时间,降低外周血抗ds-DNA抗体和IgG的表达水平,抑制脾和肾组织IFN-γmRNA的高表达。 夏晓茹 林素仙 周艳 朱小春 高申孟 许菲菲关键词:三氧化二砷 系统性红斑狼疮 干扰素-Γ 砒霜对狼疮鼠脾Th细胞及分泌细胞因子的影响 被引量:1 2011年 目的:探讨砒霜(Arsen ic Trioxide,As2O3)对体外MRL/lpr狼疮小鼠脾Th细胞及分泌相关细胞因子IFN-γ和IL-10的调节作用。方法:通过免疫磁珠分别分选MRL/lpr和C57BL小鼠脾Th细胞,Th细胞随机分PHA组和空白组,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法比较MRL/lpr和C57BL小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的差异,然后观察As2O3对MRL/lpr小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)观察不同浓度(0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L)及作用时间As2O3对Th细胞增殖的影响。结果:(1)与C57BL相比,MRL/lpr小鼠各组Th细胞分泌的IFN-γ和IL-10水平显著增高,1.0μmol/L的As2O3能明显抑制MRL/lpr小鼠各组上述因子的分泌;(2)PHA组的IL-10 mRNA和IFN-γmRNA水平在MRL/lpr小鼠中表达均高于C57BL小鼠,As2O3能抑制MRL/lpr小鼠Th细胞空白组和PHA组中IL-10mRNA和IFN-γmRNA的高表达;(3)除0.5μmol/L的As2O3能刺激Th细胞的增殖,≥1.0μmol/L的As2O3能抑制Th细胞的生长,但浓度增加对细胞存活率有明显的影响。结论:适当浓度的砒霜能有效下调Th细胞因子IL-10和IFN-g mRNA的异常分泌及而影响因子的表达,但并不产生过度的免疫抑制,并能下调MRL/lpr狼疮小鼠脾脏Th细胞的异常增殖而不影响其存活率,从而调节狼疮鼠的异常免疫功能,可能是砒霜治疗SLE的重要机制之一。 夏晓茹 孙莉 陈培荣 朱小春关键词:砒霜 TH细胞 IFN- 三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和脾淋巴细胞亚群增殖的影响 被引量:9 2008年 目的研究三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和淋巴细胞亚群的影响。方法将MRL/lpr狼疮鼠随机分为:ATO组、生理盐水(NS)组和环磷酰胺(CTX)组。另设正常C57/BL小鼠,随机分为ATO治疗组(0.4 mg/kg.d)和对照组(0.25 mL)。以上每组各6只,隔日腹腔注射,给药2个月后处死,称体重和脾脏重量算出脾脏指数;ELISA法测各组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平;流式细胞术测脾脏细胞亚群百分比。结果(1)MRL/lpr小鼠ATO治疗组脾脏指数、血清抗ds-DNA抗体水平和CD19+、CD3+、CD3+CD4+细胞百分比均低于NS对照组(P<0.01或P<0.05),NK细胞百分比明显高于NS对照组(P<0.05);(2)ATO治疗组小鼠的脾脏指数和CD3CD4双阳性细胞百分比显著低于CTX组(P<0.01),CTX治疗组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平均较对照组明显降低(P<0.01),但ATO治疗组的抗体水平较CTX治疗组高(P<0.05);(3)在C57/BL小鼠中,ATO治疗组和NS治疗组之间以上指标均无差异。结论ATO抑制MRL/lpr狼疮鼠T、B淋巴细胞活化同时上调NK细胞功能,减少体内自身抗体产生;但是对正常小鼠的抗体水平和细胞亚群并无明显影响。 王晓冰 章圣辉 邹贤斐 周艳 朱小春 陈朝生关键词:三氧化二砷 淋巴细胞亚群 NK细胞 三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4^+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用 被引量:2 2009年 目的探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响。方法免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,进而将CD4+T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L-1+IL-21000u·mL-1),ATO组[PHA20mg·L-1+IL-21000u·mL-1(48h)后+ATO1.0μmol·L-1],体外共培养至72h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4+T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平。结果①分选后获得的CD4+T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4+T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4+T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平[(562.287±60.345)ng·L-1]明显高于C57BL小鼠对照组[(253.208±59.434)ng·L-1](P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平[(41.332±8.039)ng·L-1]与ATO组[(23.046±3.253)ng·L-1]和C57BL小鼠对照组[(29.303±8.038)ng·L-1]比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01)。结论MRL/lpr小鼠存在CD4+T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4+T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼 夏晓茹 邹贤斐 张挺 孙莉 朱小春关键词:三氧化二砷 CD4^+T细胞 白介素-4