国家自然科学基金(30500533)
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
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- 牵张成骨术整复猕猴腭裂后胰岛素样生长因子-1与碱性磷酸酶表达研究被引量：3
- 2009年
- 目的 以牵张成骨术整复猕猴腭裂骨缺损，定量分析不同时段新生成骨胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-I，IGF-1）与碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）表达水平，探讨其成骨调控机制。方法用猕猴建立腭裂动物模型。实验组动物21只以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损，关闭裂隙后固定。于牵张成骨术后第1、2．4…6、8、12及24周分别取材，各3只动物。采用实时定量PCR法分析比较IGF-1与ALP的mRNA表达水平，并以酶联免疫吸附试验法（EusA）定量分析其IGF—I与ALP含量，结果与实验对照及健康对照组（动物各2只）进行比较。结果固定期第1—2周为成骨早期，第1周时IGF-1和ALP的mRNA表达明显上调，分别为3．67±0．35和3．30±0．21，第2周时达最高峰，分别为7．55±0．32和5．91±0．21，随后逐渐下降，至第12周与健康对照组无明显差异（P〉0．05）。ELISA结果显示：固定期第1～2周，IGF-1和ALP表达均增强。IGF-1含量于第2周表达最高，为（2．0±0．06）ng／mg，第4周为（1．46±0．08）ng／mg，第6周为（0．84±0．11）ng／mg，其表达逐渐下降；同期ALP则呈高水平表达，第4周为（25．34±0．44）U／mg，第6周为（26．21±0．82）U／mg。第8～12周，IGF-1和ALP的表达均下降至接近健康对照组。结论腭骨牵张成骨区域，新骨的原位增量生成明确，增殖过程正常，最终以膜内成骨的方式形成新骨整复了腭裂骨切开牵张间隙区域。
- 陈刚刘延山刘毅马恒香王之奇李宏捷
- 关键词：骨生成牵张腭裂胰岛素样生长因子-1碱性磷酸酶
- 大动物腭裂模型的建立及其牵张整复研究
- 2006年
- 目的探讨外科方法建立大动物腭裂模型的解剖基础及其稳定性,以及牵张成骨术整复其硬腭部骨质缺损治疗腭裂的价值。方法20只家猫中,18只采用外科手术方法切除一侧硬腭0.8cm×2.5cm软硬组织并延长至软腭内约1.5cm,形成口鼻腔组织洞穿缺损,建立人工腭裂实验模型。腭裂实验模型中,3只为实验对照组,笼养6周后取材观察腭裂缺损畸形稳定性;实验组15只,应用新设计的牵张成骨术,以每次0.4mm的速度,每日2次的频率和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损,至裂隙完全封闭。术后第2、4、6、8及12周分5批处死动物,每批3只,观察缺损区及牵张间隙区组织整复情况。另设空白对照组2只,进行对比。结果建立的腭裂实验动物模型畸形症状类似人腭裂临床表现,且6周后无自行修复。牵张成骨术后12周,缺损区为骨运送盘移行封闭,且牵张间隙为原位新生骨组织修复。结论外科方法建立大动物腭裂实验动物模型,稳定性高,畸形特征典型,具有很好的治疗方法学研究应用价值。
- 陈刚王大章申岱杜咏梅马恒香
- 关键词：腭裂动物模型牵张成骨
- 牵张成骨矫治猕猴腭部软硬组织缺损的组织学及荧光标记研究
- 2010年
- 目的观察猕猴牵张成骨术整复腭裂过程中，新骨组织形成与改建活动的特点，探讨新骨生成的规律。方法建立猕猴腭裂动物模型，以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损，以每天2次、每次0．4mm的速率牵引，直至骨运送盘移动关闭裂隙后原位固定。分别于固定期第1、2、4、6、8、12及24周取材，每时相点3只实验动物。取材前6d，实验组动物（21只）均肌肉注射四环素（30mg／kg）标记。各组标本包埋切片行组织学及荧光标记观察。结果与实验对照组及空白对照组（动物各2只，同法标记）对比。结果实验组骨运送盘移动至裂隙对侧关闭缺损，牵开间隙内以膜内成骨方式原位成骨，成功整复腭部软硬组织缺损。牵张成骨术后固定期从1至24周逐渐延长，呈现出成骨-改建-成熟的动态变化过程：牵张区新骨形成的量及其钙化程度不断增加，与此同时，新骨组织亦呈现不断改建成熟的趋势，软组织随着新骨的形成不断地延伸，对照组裂隙无法自行修复。结论应用牵张成骨术整复腭裂缺损，在良好的固定下，通过膜内成骨的方式，新骨不断的成熟和改建，直至成功修复软硬组织缺损。
- 刘毅陈刚刘延山申岱朱彤王之奇
- 关键词：骨生成牵张组织学观察
- 牵张成骨矫治腭裂成骨区碱性磷酸酶表达的研究被引量：2
- 2007年
- 目的:研究牵张成骨术整复腭裂骨缺损新骨生成过程中碱性磷酸酶(ALP)的表达与分布,探讨新骨生成与改建的变化规律。方法:家猫20只为实验对象。实验组:建立腭裂模型后以0.4mm/次,2次/d速率牵张整复腭部组织缺损。术后第2、4、6、8及12周分别处死3只动物,分析ALP在新骨组织中表达与分布。结果与实验对照组及空白对照组比较。结果:术后2周为成骨早期,即出现ALP高水平表达;术后4～6周为成骨中期,ALP强表达于成骨细胞膜及骨基质;术后8～12周则为成骨后期,ALP表达趋于静止。结论:牵张成骨法以新生骨组织修复腭裂骨缺损并最终改建成熟。
- 陈刚王大章杜咏梅王之奇乔峰
- 关键词：骨生成腭裂碱性磷酸酶
- 牵张成骨矫治腭裂动物模型新骨Ca、P元素能谱分析被引量：2
- 2007年
- 目的应用牵张成骨术整复腭裂实验动物（猫）模型硬腭部骨质缺损的基础上，观察研究不同时间间期牵张区新生骨质的Ca、P元素含量的动态变化，并探讨新骨生成与改建的发展变化规律。方法家猫20只为实验对象。其中18只动物建立人工腭裂实验模型。实验组（动物15只）：应用牵张成骨术，以每；P-0.4mm的速度，每日两次的频率和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损，至裂隙完全封闭。于牵张术后第2、4、6、8及12周分别对3只动物施以安乐死，取标本测定Ca、P元素能量谱曲线并计算Ca、P元素质量比及原子计数比。结果与实验对照组（动物3只）及空白对照组（动物2只）对比。结果通过对新骨的Ca、P元素能量谱、Ca／P质量比及原子计数比的分析可将DO后的固定期分为三个阶段，即2周左右为新骨形成早期，4-6周为中期，8-12周时为后期，显示了新骨不断钙化成熟的趋势。结论牵张推移骨运送盘至健侧裂隙缘后，牵张间隙有规律地为新骨组织完全修复，最终恢复骨连续性且结构正常。DO新生骨组织显示了不断钙化成熟的趋势，证明D0的成骨活动未经过软骨中介体。
- 陈刚王大章申岱乔峰王之奇
- 关键词：牵张成骨腭裂
- 牵张成骨整复猕猴腭裂模型成骨区骨形态发生蛋白-2的表达被引量：5
- 2010年
- 目的观察牵张成骨术整复腭裂新骨形成的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达分布规律。方法猕猴23只以外科方法建立腭裂动物模型。其中实验组动物21只,以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损,至骨运送盘移动关闭裂隙后原位固定。分别于固定期第1、2、4、6、8、12及24周取材3只实验动物,标本行免疫组化染色,观察其不同时间的表达分布,并与实验对照组及空白对照组结果对比。结果免疫组化实验表明,BMP-2于新骨形成过程中主要存在于成骨细胞胞浆中,在牵张成骨早期新生骨小梁的周围存在大量成骨细胞,染色为强阳性;4～6周时,成骨细胞进一步增多,BMP-2表达也呈现强阳性,表明成骨过程到达高峰;8周时成骨细胞数量减少,BMP-2表达趋于减弱;至12周时,成骨过程已基本完成,免疫组化染色基本无着色。结论术后固定成骨期内,BMP-2的表达与分布是一个由弱变强,达到成骨高峰后,随着新骨改建成熟又逐渐趋弱的动态变化过程。
- 刘毅陈刚李宏捷王建刘延山王之奇
- 关键词：牵张成骨腭裂骨形态发生蛋白
- 牵张成骨矫治腭裂的激光共聚焦荧光定量分析
- 2007年
- 目的:利用激光共聚焦显微镜与计算机辅助荧光定量分析,研究牵张成骨术矫治腭裂新骨生成随时间间期不同的动态变化趋势,为临床矫治腭裂应用提供理论与实验依据。方法:以家猫20只为实验对象。其中18只动物建立人工腭裂实验模型。实验组(动物15只):应用牵张成骨术,以0.4mm×2次/d的速率牵张整复封闭其腭部组织缺损。术后第2、4、6、8及12周前6d以四环素肌注标记(30mg/kg)后各取材3只动物,标本制片后激光共聚焦显微镜观察荧光沉积并进行计算机定量分析,结果与实验对照组(动物3只)及空白对照组(动物2只)对比。结果:实验组不同时间间期标本的荧光强度平均值及其总量,显示出明确的动态变化规律,自2周组起,成骨活动明显活跃,到4周组达到顶峰,至8、12周组逐渐减弱,但仍显著高出无明显荧光沉积的空白和试验对照组。结论:应用牵张成骨术移动骨运送盘封闭组织缺损,牵张间隙逐渐被膜内成骨新骨生成修复,恢复了骨连续性。随时间间期的延长,新骨逐渐改建成熟。成骨活动呈现短期达到高峰后,逐步减弱的动态变化规律。
- 陈刚王大章廖运茂申岱杜咏梅
- 关键词：牵张成骨腭裂动物模型荧光标记
- 牵张成骨术整复猕猴腭裂骨桥蛋白与骨钙蛋白表达研究
- 2009年
- 目的以牵张成骨术整复猕猴腭裂骨缺损，定量分析新骨在不同时期骨桥蛋白（osteopotin，OPN）与骨钙蛋白（osteocalcin，OC）的表达水平，探讨新骨生成与改建的规律。方法以猕猴为对象建立腭裂动物模型。实验组动物21只行牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损，关闭裂隙后固定。固定期第1、2、4、6、8、12及24周分别取材，各3只动物。采用实时定量PCR法（real—time，RT-PCR）定量比较OPN与OC的mRNA表达水平，并以酶联免疫吸附试验法（ELISA）定量分析其OPN与OC含量，与实验对照组及健康对照组（各2只动物）结果进行比较。结果固定期第2周OPN mRNA表达上调，第4周达最高（7．59±0．37）；而OC mRNA表达则自第4周开始上调（4．98±0．21），第6周时达最大值（7．94±0．31）；随后开始下降，至第24周时两者的mRNA表达水平接近健康对照组（P〉0．05）。ELISA结果显示：固定期第4、6周OPN分别为（4．75±0．15）ns／mg和（4．86±0．09）ng／mg，OC分别为（3．18±0．16）ng／mg和（3．63±0．33）ng／mg，两者均为高水平表达。至第8～12周以后蛋白表达趋势与其对应mRNA表达基本一致。结论应用牵张成骨术整复腭裂骨缺损，其牵张区域新骨生成，裂隙被骨运送盘移动封闭，腭部裂隙被完全修复。
- 刘延山陈刚刘毅李蕊王之奇申岱
- 关键词：骨生成牵张腭裂骨桥蛋白骨钙蛋白
