卫生部科技专项基金(WKJ20042006)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:陆祖宏朱颖刘必成吕林莉更多>>
- 相关机构:东南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科技专项基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 基于琼脂糖膜为载体的抗体芯片工作条件的优化被引量:2
- 2008年
- 目的:优化以琼脂糖修饰的玻片为载体的抗体微阵列的制备方法,提高微阵列信噪比及检测灵敏度。方法:选取单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)作为待检的靶蛋白,在琼脂糖膜上首先固定MCP-1捕获抗体,经过洗涤、封闭,然后依次加入标准抗原、生物素标记的检测抗体以及亲和素标记的cy3,分别孵育、洗涤后,激光共聚焦扫描仪扫描获取图像,分析各点的荧光强度,根据荧光强度确定捕获抗体的最佳固定时间、温度以及最适宜的洗涤缓冲液。结果:与4、37℃过夜固定相比,捕获抗体室温(25℃左右)过夜固定时,蛋白质在载体上的固定效率和反应活性最高;捕获抗体过夜固定比固定2 h获得更高的检测灵敏度;另外,通过比较相同pH值不同溶质缓冲液的洗涤效应,pH 7.4的缓冲液PBST可获得更优信号强度。结论:本研究优化了以琼脂糖修饰的玻片为载体的蛋白质微阵列的反应条件,提高了微阵列的检测灵敏度。
- 朱颖吕林莉陆祖宏刘必成
- 关键词:抗体芯片琼脂糖玻片灵敏度
- 提高抗体芯片检测灵敏度的方法
- 2007年
- 抗体芯片作为蛋白质芯片的一种,具有高通量、高特异性及平行性分析的优点,目前已被应用到许多领域,成为蛋白质组学研究过程中不可缺少的技术。但是如何构建高敏感度、微型化及检测动力学范围广的抗体芯片以满足样品检测的需要,仍然是抗体芯片发展过程中所面临的重要挑战。就如何提高其检测灵敏度作一综述。
- 朱颖刘必成陆祖宏吕林莉
- 关键词:抗体芯片免疫检测灵敏度