国家自然科学基金(39960078)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：王秦秦唐睿珠陈新明姜平李继梅更多>>
- 相关机构：昆明医学院第一附属医院广东出入境检验检疫局大理医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 麦芽凝聚素层析柱纯化的肺癌相关抗原
- 2000年
- 目的纯化并分析肺癌相关抗原的有关特性。方法采用商品化麦芽凝聚素 Wheatgerm L ectin- Sepharose- 6 MB层析柱和自制抗人肺癌单克隆抗体 N- 35 - Sepharose- 4B层析柱纯化肿瘤相关抗原 ,比较纯化结果 ;用免疫印技术测定肺癌相关抗原在肺癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌细胞及正常人心脏及肺组织的存在及分布情况 ;用差速离心技术分析肺癌相关抗原在亚细胞结构的布状况 ;用免疫荧光技术探测肺癌相关抗原在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位。结果经麦芽凝聚素纯化的肺癌相关抗原 N35以不同分子量形式存在于肺癌、肝癌、宫颈癌及乳腺癌细胞的蛋白组分中 ,在正常人心脏及肺组织中无表达 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ,并定位于肿瘤细胞有丝分裂中期 (methaphase)的中心粒 (centriole)结构上。结论肺癌相关抗原 N35是一种重要的肿瘤相关抗原 ,其功能很可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关。麦芽凝集素亲和层析法是纯化肺癌相关蛋白 N35简便有效的途径。
- 王秦秦姜平李继梅唐睿珠陈新明
- 关键词：肺癌相关抗原肺肿瘤
- N35肺癌相关蛋白的特性被引量：8
- 2000年
- 目的：分析和确定N35肺癌相关蛋白的有关特性及其潜在的临床应用价值。方法：利用抗人肺癌单克隆抗体N35作为免疫探针，经免疫沉淀和免疫印迹法测定其相关抗原在肺癌细胞系GLC82、宫颈癌细胞系Hela、肝癌细胞系HepG2、乳腺癌细胞系PMC、正常人心脏及肺组织中的存在及分布情况；用N聚糖酶酶解方法确定肿瘤相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系；采用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系GLC82亚细胞结构中的胞膜、胞核及线粒体成分，分别取样经免疫印迹法测定肿瘤相关蛋白N35在亚细胞结构中的分布状况并与免疫组化结果相印证；用免疫荧光技术探测肿瘤相关蛋白N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位；用多种免疫亲和层析技术尝试获得大量纯化肿瘤相关蛋白N35的有效方法。结果：肿瘤相关蛋白N35是一种糖蛋白分子，不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中，而以不同分子量形式分布于GLC82、Hela、HepG2和PMC细胞蛋白中；在亚细胞结构中主要分布于胞核，线粒体次之，胞膜上分布最少，似不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在；在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2期时明确地定位于中心粒（centriole）结构上，强烈提示其功能可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关；麦芽凝集素亲和层析法是大量纯化肿瘤相关蛋白N35最有效的途径。结?
- 王秦秦姜平李继梅唐睿珠陈新明
- 关键词：肺肿瘤肿瘤相关蛋白
- 抗人肺鳞癌单克隆抗体的制备及其特性鉴定
- 2012年
- 目的:制备和鉴定抗人肺鳞癌单克隆抗体(mAb),为肺癌的早期诊断和靶向治疗提供候选抗体药物及为肺癌抗原的筛选提供工具。方法:用肺癌细胞株YTMLC-90做抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,间接ELISA和有限稀释法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞获得mAb。染色体计数法鉴定杂交瘤细胞,并进行mAb同种型鉴定;对细胞培养上清液和腹水中的mAb采用间接ELISA法进行初步特异性检测及效价测定;采用Western blot法鉴定其与不同组织抗原结合活性;采用免疫组化染色法鉴定其在肺癌组织中的分布。结果:筛选出5株可稳定分泌抗肺鳞癌mAb的杂交瘤细胞株E2、F9、E11、D5和C6,分泌的抗体均为IgG1亚类,κ亚型。C6染色体数目为89～112条,细胞培养上清和腹水效价分别为1∶1 004和1∶104,ELSA和Western blot结果显示其能特异性与肺癌细胞结合,未见与其他高发癌组织和正常组织结合。结论:成功地制备了能够特异识别肺癌组织的mAb。
- 贾建桃倪亚萍马海智李小进栗昭辉马丽菊王秦秦
- 关键词：肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞
- 单克隆抗体N35对肺癌相关抗原的识别被引量：8
- 2000年
- 研究和确定肺癌相关抗原的有关特征及其意义。方法 :利用抗人肺癌单克隆抗体N 35作为免疫探针 ,经免疫沉淀和免疫印迹法测定其相关抗原在肺癌细胞系GLC 82、宫颈癌细胞系HeLa、肝癌细胞系HepG 2、乳腺癌细胞系PMC、正常人心脏及肺组织的存在及分布情况 ;用N 聚糖酶酶解方法确定肿瘤相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系 ;用差速离心技术分离肺腺癌细胞系GLC 82亚细胞结构中的胞膜 ,胞核及线粒体成分 ,分别取样经免疫印迹法测定肿瘤相关抗原N35在亚细胞结构中的分布状况 ;用免疫荧光技术探测肺腺癌相关抗原N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位 ;用 2种免疫亲和层析技术尝试获得大量纯化肿瘤相关蛋白N35的有效方法。结果 :肺腺癌相关抗原N35是一种糖蛋白分子 ,不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中 ,而以不同Mr形式分布于GLC 82 ,Hela,HepG 2和PMC细胞蛋白中 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ;在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2 期时明确地定位于中心粒 (centriole)结构上。结论 :肿瘤相关蛋白N35可能是一种只存在于肿瘤细胞并与其增殖活动密切相关的重要的肿瘤细胞生长调节蛋白 。
- 王秦秦姜平李继梅唐睿珠陈新明
- 关键词：单克隆抗体肺癌相关抗原亚细胞结构
