辽宁省高校创新团队支持计划(2007t017)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 相关作者：常亚青丁君孙巍王媛程德金更多>>
- 相关机构：大连海洋大学大连水产学院更多>>
- 发文基金：辽宁省高校创新团队支持计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 虾夷马粪海胆谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2011年
- 采用同源克隆方法，结合cDNA末端快速扩增（RACE）技术，从虾夷马粪海胆中克隆到谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽硫转移酶基因的全长cDNA序列，并对其基因结构进行了分析。同时用实时定量PCR方法对这2个基因在脂多糖（I。PS）刺激后不同时间的表达差异情况进行了研究。谷胱甘肽过氧化物酶基因（GPX）的cDNA全长1042bp，其中开放间读框含有657bp，编码219个氨基酸残基，无跨膜结构，无信号肽，为胞内蛋白。实时定量PCR检测发现GPX基因在LPS刺激9h时，表达量最高为对照组的4．47倍（P〈0．01），刺激32h时，表达量恢复到刺激前水平。谷胱甘肽硫转移酶基因（GST）的cDNA全长1931bp，其中开放阅读框含有684bp，编码228个氨基酸残基，无跨膜结构，无信号肽，为胞内蛋白。实时定量PCR检测发现GST基因经LPS刺激8h时表达量最高，48h后表达量恢复到刺激前水平。结果表明，谷胱甘肽过氧化物酶基因GPX、谷胱甘肽硫转移酶基因GST在虾夷马粪海胆免疫方面起到了重要的作用，为深入研究海胆免疫防御机制，改良种质和培育抗病品系，奠定了基础。
- 丁君常亚青孙巍
- 关键词：虾夷马粪海胆GPXGST
- 用改良的TRIZOL法快速提取仿刺参和中间球海胆的总RNA被引量：3
- 2009年
- 用改良的TRIZOL法和普通TRIZOL法分别提取仿刺参Apostichopus japonica体壁、肠、体腔液和中间球海胆Strongylocentrotus intermedius的管足、性腺、齿间肌的总RNA。结果表明:用普通TRIZOL法提取时间长,电泳条带不很清晰,存在降解且各个组织提取的状况不稳定,杂质量多;而用改良TRIZOL法能够快速提取仿刺参、海胆组织的总RNA,电泳后得到的28S rRNA和18S rRNA条带清晰、完整性好、纯度高、得率高,其A/A为2.04~2.14,总RNA浓度为44.96~115.02 ng/μL。
- 纪丽凤程德金刘长伟常亚青
- 关键词：仿刺参海胆总RNA提取
- 海胆胚胎不同发育期P-糖蛋白(P-glycoprotein)药物外排功能的研究被引量：2
- 2009年
- 通过研究添加维拉帕米(Verapamil,VER)后,灭蝇胺(Cyromazine)和杀虫丹(Ethiofencarb)对海胆胚胎致死中浓度(LC50)的变化,探讨了不同发育期海胆胚胎P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的功能.结果表明:灭蝇胺和杀虫丹对海胆胚胎的平均LC50分别为2.50mg·L-1和3.50mg·L-1,在加入0.75μmol·L-1P-gp抑制剂VER后,其LC50平均降低40%～42%,说明海胆胚胎P-gp具有药物外排作用.药物浓度可影响P-gp功能,随药物浓度的升高,P-gp外排功能逐渐减弱,甚至达到饱和.实验同时通过分子模拟方法研究了灭蝇胺和杀虫丹的分子结构特征,实验和理论结果均证实了这两种药物分子为海胆胚胎P-gp的底物.
- 孙雪峰丁君黄洪辉王媛王永华
- 关键词：P-糖蛋白维拉帕米灭蝇胺杀虫丹
- 黑嘴病及生殖对虾夷马粪海胆五种生理生化指标的影响被引量：2
- 2009年
- 对虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus interm edius)患"黑嘴病"及生殖后体腔液中5种生理生化指标进行了检测,结果表明病理情况下的虾夷马粪海胆过氧化氢含量和丙二醛含量明显高于对照组,而过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力明显低于对照组,其中,过氧化氢含量、总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性差异显著(P<0.05),丙二醛含量、过氧化氢酶活性差异极显著(P<0.01)。生殖后除过氧化氢含量外其他4种生理生化指标均降低,其中总抗氧化能力和丙二醛含量差异显著(P<0.05),过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性差异极显著(P<0.01)。研究表明以海胆体腔液中丙二醛含量和过氧化氢酶活性作为海胆黑嘴病发生的监测指标是可行的。
- 张勃丁君王媛董旭常亚青
- 关键词：虾夷马粪海胆生殖
- 虾夷马粪海胆性腺cDNA文库构建及部分EST序列分析被引量：3
- 2011年
- 应用Gubler-Hoffman cDNA文库技术,构建虾夷马粪海胆（Strongylocentrotus intermedius）性腺cDNA文库。测试结果表明,其库容量为2.10×106 PFU/mL,长度范围在0.5~4.2 kb,插入片段平均长度为1.4 kb,达到建库要求。对虾夷马粪海胆cDNA克隆测序,将获得的819条EST序列与NCBI数据库进行BLAST比对,获得了65个有研究价值的EST序列和cDNA克隆,其EST序列已提交到GenBank,序列号分别为GO448010–GO448016、GR410172–GR410229,虾夷马粪海胆性腺cDNA文库的成功构建,使短期内获得大量调控海胆性腺生长和营养性状的关键基因表达信息成为可能,为进一步开发海胆的生物资源提供参考。
- 丁君孙巍常亚青
- 关键词：虾夷马粪海胆CDNA表达序列标签
- 4种免疫促进剂对2种虾夷马粪海胆群体免疫影响被引量：3
- 2011年
- 研究2种免疫促进剂（灵芝多糖、脂多糖）对虾夷马粪海胆红、白色管足群体免疫细胞的影响，以及4种免疫促进剂（灵芝多糖、脂多糖、葡聚糖、双链RNA）对这2个群体抗氧化酶活力的影响，研究结果表明：1）脂多糖刺激后，2个群体管足内色素细胞都呈现先下降后上升的趋势，变化不显著（P〉0．05），红色管足内色素细胞数量明显高于白色管足的；刺激后2个群体体腔液内吞噬细胞数量均上升，红色群体数量高于白色群体的，刺激后红色群体变化差异不显著（P〉0．05），白色群体差异显著（P〈0．05）；刺激后体腔液内色素细胞均呈上升趋势，刺激后白色群体变化极显著（P〈0．01）。灵芝多糖刺激后，白色群体管足内色素细胞没有明显变化，红色群体色素细胞数量呈稍下降趋势；刺激后白色群体体腔液内吞噬细胞数量呈下降趋势，而红色群体的呈现先上升后下降的趋势，且白色群体数量高于红色群体的；刺激后体腔液内色素细胞均出现先上升后下降的趋势。2）4种免疫促进剂对虾夷马粪海胆2个不同群体体腔液内抗氧化酶（T—AOC，CAT，SOD）活力有影响。处理后3种酶活力均出现不同程度上升，且红色群体上升的更为明显；灵芝多糖、脂多糖可增加虾夷马粪海胆体腔液内免疫细胞数量，但对管足内细胞没有明显作用；4种免疫促进剂均可提高T—AOC，CAT，SOD的活力。
- 赵新亚常亚青丁君张伟杰
- 关键词：免疫促进剂虾夷马粪海胆免疫性状
