国家自然科学基金(30070756)
- 作品数：23 被引量：86H指数：6
- 相关作者：陈晓春陈朝晖曾甫清胡晓勇鲁功成更多>>
- 相关机构：华中科技大学湖北省肿瘤医院郑州大学第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导前列腺癌细胞凋亡的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对前列腺癌细胞的凋亡诱导作用。方法 10 μg/L～ 10 0 μg/L的TRAIL处理培养的PC 3M细胞 4～ 2 4h后 ,采用Annexin V荧光染色、透射电镜、原位末端转移酶标记技术 (TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡 ;流式细胞术和MTT比色检测凋亡率、细胞生长抑制率与TRAIL的时间、浓度依赖关系。结果 10 μg/L～ 10 0 μg/LTRAIL作用 4～ 2 4h ,肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变 ,随着TRAIL浓度的增加或药物作用时间的延长 ,肿瘤细胞凋亡率也增加 ,为 13 .8%～ 79.6% ,同时细胞生长抑制率出现明显增加 ,药物作用 8h为 7.5 %～ 3 7.9% ,12h为 16.7%～ 87.9% ,2 4h为 3 9.7%～ 97.6%。结论 TRAIL能够迅速和显著地诱导PC 3M细胞凋亡 ,可能成为晚期前列腺癌治疗的新方法。
- 谷龙杰陈朝晖陈江平浩肖亚军陈晓春
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体前列腺癌细胞PC-3M细胞细胞生长抑制肿瘤细胞凋亡荧光染色
- GM-CSF引起的MAPK途径磷酸化在激素非依赖性前列腺癌增殖中的作用被引量：1
- 2006年
- 目的:研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径中Erk1/2分子磷酸化在粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)促进前列腺癌增殖中的作用。方法:前列腺癌PC-3M细胞经过GM-CSF刺激前后,流式细胞术和半定量RT-PCR分别检测细胞周期和细胞周期蛋白K i-67表达的变化;W estern印迹法对比GM-CSF作用前后Erk1/2分子磷酸化程度的变化。结果:GM-CSF可以显著增加PC-3M细胞S期和G2/M期的百分率以及K i-67蛋白的表达,同时Erk1/2分子磷酸化程度显著增强。结论:Erk1/2分子磷酸化可能是GM-CSF促进前列腺癌增殖的重要分子机制。
- 陈朝晖王华芳鞠文李恒肖亚军曾甫清肖传国
- 关键词：前列腺癌ERK1/2粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
- 阿霉素增强TRAIL诱导的人骨髓瘤细胞系KM3细胞凋亡的分子机制研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨阿霉素增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导人骨髓瘤细胞系KM3细胞凋亡的分子机制。方法采用TUNEL法和流式细胞术比较单独TRAIL及联合应用阿霉素对KM3细胞凋亡率的影响。Westem blot法检测阿霉素诱导前后KM3细胞核内转录因子NF-κB亚单位蛋白P65以及死亡受体DR5表达的变化。结果流式细胞术分析显示，10、20、50、100ng／ml的TRAIL联合应用1μg／ml阿霉素诱导KM3细胞后，细胞凋亡率分别为20．88％、40．03％、57．87％和60．82％，显著高于单独应用阿霉素或TRAIL诱导的细胞凋亡率；与TUNEL法检测结果一致。KM3细胞经不同浓度阿霉素（0．5、1．0、2．0、4．0μg／m1）联合20ng／ml TRAIL处理后，DR5受体的表达量随应用阿霉素浓度的增加而上升，而细胞核内P65蛋白表达量则随阿霉素浓度的增加而下降。结论骨髓瘤细胞膜DR5表达量提高和NF-κB的核转移是阿霉素协同TRAIL诱导凋亡反应的重要分子机制。
- 王华芳陈朝晖孙春艳胡豫
- 关键词：阿霉素KM3细胞细胞凋亡
- TRAIL受体在前列腺癌组织中的表达和意义被引量：4
- 2003年
- 陈朝晖肖亚军陈晓春
- 关键词：TRAIL前列腺癌
- Omi／HtrA2对前列腺癌细胞的促凋亡作用被引量：7
- 2006年
- 目的检测人前列腺癌细胞(PC-3M)中Omi／HtrA2的表达情况,并构建其小干扰 RNA(siRNA)表达载体,探讨Omi／HtrA2对PC-3M凋亡的影响。方法以细胞免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Omi／HtrA2在前列腺癌细胞系(PC-3M)和正常前列腺细胞中的表达。利用软件辅助设计Omi／HtrA2特异性siRNA序列,体外合成后将其克隆入真核表达载体 psiRNA-hHlneo。以脂质体法转染psiRNA-Omi／HtrA2载体至PC-3M中,以RT-PCR和Western blot法检测psiRNA-Omi／HtrA2对Omi／HtrA2转录和表达的沉默效应。用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞法检测siRNA导致Omi／HtrA2基因沉默后,PC-3M细胞凋亡的变化。结果细胞免疫组织化学和RT-PCR均显示Omi／HtrA2在PC-3M细胞中高表达。酶切和DNA测序证实合成的siR- NA基因序列正确,并已被准确克隆入psiRNA-hHlneo载体中。psiRNA-Omi／HtrA2载体可特异性抑制PC-3M细胞中Omi／HtrA2的表达。转染psiRNA-Omi／HtrA2载体的PC-3M细胞凋亡下调。结论促凋亡因子Omi／HtrA2可导致前列腺癌细胞凋亡,Omi／HtrA2的表达对前列腺癌的发展有重要作用。
- 胡晓勇陈晓春陈朝晖曾甫清鲁功成
- 关键词：小干扰RNA前列腺癌脱噬作用
- 肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的研究
- 2003年
- 范民陈朝晖陈晓春
- 关键词：膀胱癌EJ细胞细胞凋亡肿瘤坏死因子凋亡诱导配体
- 阿霉素协同TRAIL真核表达载体诱导前列腺癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨阿霉素与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)真核表达载体诱导前列腺癌细胞凋亡的协同作用。方法RT-PCR方法克隆人TRAIL全长基因,并插入真核表达载体pLX IN多克隆位点,经酶切和测序鉴定。将pLX IN-TRAIL质粒转染PC3-M细胞,RT-PCR方法检测外源性TRAIL表达率,TUNEL染色和流式细胞术比较单独表达TRAIL和联合应用阿霉素对PC3-M细胞凋亡率的影响,W estern b lot法检测经阿霉素诱导前后PC-3M细胞死亡受体-5(DR5)的表达变化。结果成功构建pLX IN-TRAIL真核表达载体,外源性TRAIL表达可以诱导PC-3M细胞凋亡,阿霉素能够增强TRAIL的凋亡诱导效应,6μg pLX IN-TRAIL质粒DNA组,加入1 mg/L阿霉素前后平均凋亡率分别为11.8%和20.7%,同时可提高PC-3M细胞DR5的表达。结论TRAIL真核表达载体介导的细胞凋亡是治疗前列腺癌的新途径,阿霉素可以通过提高DR5表达而增强PC-3M细胞对TRAIL诱导的凋亡敏感性。
- 陈朝晖王华芳费世宏肖亚军曾甫清
- 关键词：前列腺肿瘤阿霉素凋亡
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在前列腺癌细胞株PC-3M中对核因子kappa B活化的影响(英文)被引量：2
- 2008年
- 目的:研究TRAIL诱导激素非依赖前列腺癌细胞株PC-3M过程中核因子kappaB(NF-κB)的活化和失活现象。方法:当不同浓度的TRAIL和LPS作用于细胞后,我们通过细胞免疫组化染色和凝胶电泳迁移试验(EMSA)来检测NF-κB核转位的情况。并通过RT-PCR的方法粗略评定二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对抑制蛋白IκB的影响。结果:EMSA和免疫组化分析显示PC-3M细胞中NF-κB的核转位可被TRAIL或LPS明显地激活。以PDTC预处理可以上调抑制蛋白IκB的表达,阻断NF-κB的核转位。结论:TRAIL的作用于激素非依赖前列腺癌细胞时主要的负作用在于其可以显著地刺激NF-κB的活化。另一方面,在PC-3M细胞凋亡过程中NF-κB的核转位可以被PDTC有力地抑制,同时IκB的表达升高和降解减少(PDTC引起的)是抑制NF-κB活化的潜在因素,为我们提出了增强TRAIL疗效的可能性方案。
- 钟伟何炜马望张克亮魏少忠陈朝晖陈晓春曾甫清肖传国
- 关键词：前列腺肿瘤肿瘤坏死因子NF-ΚB肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- TRAIL受体在前列腺癌中的表达被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 (TRAIL)受体在前列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌恶性度的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中DR4、DR5及DcR1的表达。结果 前列腺癌组织DcR1表达水平显著低于良性前列腺增生组织 (P <0 .0 1) ,DR4、DR5的表达水平两者无显著性差异。前列腺癌组织中DR4、DR5及DcR1的表达程度与前列腺癌组织的病理分级和临床分期无关 (P >0 .0 5 )。
- 陈江陈晓春曾甫清
- 关键词：TRAIL受体前列腺癌免疫组织化学
- 高分级前列腺上皮内瘤和前列腺癌中Ezrin的表达及意义被引量：4
- 2006年
- 目的探讨埃兹蛋白（Ezrin）在高分级前列腺上皮内瘤（HGPIN）及前列腺癌（CAP）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测44例CaP、12例HGPIN、20例前列腺增生（BPH）及10例正常前列腺（NP）组织中Ezrin的表达。结果31例（70．45％）CaP中Ezrin呈中等或强表达，12例HGPIN中Ezrin均呈弱或中等表达．20例BPH和10例NP中Ezrin没有或星弱表达。在CaP中。Gleason评分（GS）8～10分组的Ezrin表达明显高于7分组和5～6分组（P〈0．05），7分组Ezrin表达明显高于5～6分组（P〈0．05）。结论Ezrin的表达可能与CaP的发生有关，其对诊断HGPIN和判断CaP的转移及预后有重要意义。
- 梁涛陈晓春胡晓勇朱朝辉陈朝晖曾甫清鲁功成
- 关键词：埃兹蛋白前列腺肿瘤前列腺癌
