国家重大科学仪器设备开发专项(2011YQ170067) 作品数:38 被引量:142 H指数:6 相关作者: 刘晓晴 曾茂茂 陈洁 徐建军 魏益平 更多>> 相关机构: 东华理工大学 江南大学 军事医学科学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家重大科学仪器设备开发专项 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
miR-21抑制物对A549细胞球增殖的影响及机制 被引量:3 2014年 目的研究miR-21抑制物在A549细胞球增殖的作用及其相关机制。方法在无血清培养基中培养A549细胞球,形成细胞球后进行CD133+CD44+表达检测。实验分为A549细胞球组:未经处理;IHN组:miR-21抑制物转染A549细胞球组;IHN-NC组:miR-21抑制物阴性对照物转染A549细胞球组。Western印迹检测A549细胞和A549细胞球中DKK2、β-catenin蛋白以及QPCR检测miR-21在两种细胞中的表达;合成miR-21抑制物和阴性对照,分别转染A549细胞球48 h后,应用QPCR检测转染前后miR-21的表达变化,以及使用Western印迹分析DKK2、β-catenin蛋白的表达变化,利用噻唑蓝(MTT)检测12、24、48 h细胞的增殖能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为65.800%;IHN组miR-21的表达以及β-catenin蛋白的表达较A549细胞球组和IHN-NC组显著下调(P<0.05),而DKK2蛋白表达显著升高(P<0.05);MTT结果示IHN组和IHN-NC组在12、24、48 h时抑制率显著高于A549 sphere组(P<0.05),IHN组在24、48 h时相点抑制率明显高于IHN-NC组(P<0.05)。结论miR-21抑制物可有效抑制A549 sphere的增殖,其可能成为治疗肺癌的潜在靶点。 胡欣春 魏益平 喻东亮 彭金华 徐建军关键词:MIR-21 抑制物 肺癌 常压敞开式离子化质谱技术研究进展 近年来,无需复杂样品前处理、且在开放环境下实现离子化的常压敞开式离子化质谱技术(Ambient ionization mass spectrometry, AI-MS)的研制与应用成为质谱学领域的前沿及备受关注的研究方向... 贺玖明 李铁钢 何菁菁 罗志刚 再帕尔·阿不力孜关键词:质谱 气流 文献传递 质谱分析及其在肺癌分子标志物研究中的应用 被引量:2 2014年 常压直接质谱分析技术和质谱成像技术是近年来质谱分析的重要进展,它们在生物样品分析中具有广泛应用价值。肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,早期筛查和诊断是改善其临床诊治现状的重要途径。本文就质谱分析及其在肺癌分子标志物研究中的应用作一综述。 陈立如 徐建军 魏益平关键词:质谱 肺癌 分子标志物 非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因检测技术研究进展 被引量:3 2014年 棘皮动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like 4-anaplastic lymphomakinase,EML4-ALK)融合基因是继表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)之后的又一非小细胞肺癌驱动基因。EML4-ALK基因检测对临床治疗至关重要。目前,EML4-ALK基因的检测方法包括免疫组化、免疫荧光原位杂交、基于PCR扩增方法等。近年来,国内外学者对血清蛋白质组学在肿瘤检测、诊断、疗效预测方面做了大量有益的探索。该文综述了EML4-ALK的检测方法以及ALK血清蛋白质组学等方面的研究进展。 陈健 李治桦 刘晓晴关键词:非小细胞肺癌 EML4-ALK 蛋白质组学 质子转移反应-飞行时间质谱检测呼出气体中痕量挥发性有机物 被引量:4 2018年 通过对自主研制的质子转移反应飞行时间质谱(PTR-TOF-MS)进样口的改造,实现了对呼出气体的实时、在线定量检测,并对23名志愿者(11名男性健康受试者、11名女性健康受试者和1名胃病患者)的呼出气体进行28天的实时在线监测。结果表明,健康人群呼出气体中主要的挥发性有机物(VOCs)为甲醛、丙烯、乙醛、丙酮、异丙醇和异戊二烯等,浓度基本服从对数正态分布,且甲醛、丙烯、异丙醇主要集中在40~100 ppb浓度范围内,乙醛的浓度主要集中在80~180 ppb浓度范围内,丙酮主要集中在500~1500 ppb浓度范围内,异戊二烯主要集中在8~20 ppb的浓度范围内;呼出气体浓度在性别上也存在差异,其中,受试人群中男性呼出气体中丙酮的浓度高于女性,而乙醛和异丙醇浓度低于女性。胃病患者的呼出气体中甲醛和丙酮含量明显高于健康人群;乙醇和乙醛是饮酒者呼出气体的主要标志物,乙醛是乙醇的代谢产物,随着乙醇浓度的变化而变化。 韩明聪 董俊国 彭真 徐丽 程平 周振肺腺癌组织微RNA表达谱及在CD133^+肺癌细胞中的表达研究 被引量:2 2014年 目的探讨肺癌组织中微RNA(miRNA)的表达谱以及在CD133+A549中的表达。方法取肺腺癌患者的肺癌组织标本和癌旁组织标本,进行miRNA表达芯片分析。利用流式细胞术(FCM)分选并培养CD133+A549细胞2周,检测CD133+、CD44+表达分析并应用实时荧光定量PCR检测miRNA-892b和miRNA-4686在CD133+A549细胞中的表达情况。结果肺癌组织中有27个miRNA表达较癌旁组织中的表达上调(P<0.05),6个miRNA的表达较癌旁组织中的表达下调(P<0.05)。CD133+A549细胞CD133+、CD44+双阳性表达率为75.0%。CD133+A549细胞中miRNA-892b和miRNA-4686的表达显著高于A549细胞(P<0.01)。结论肺腺癌组织中miRNA存在异常表达谱,miRNA-892b和miRNA-4686可能在维持CD133+肺癌细胞生物学特性中发挥着一定的作用。 胡欣春 徐建军 喻东亮 彭金华 魏益平关键词:微RNAS CD133 Veristrat分类法在晚期非小细胞肺癌个体化治疗中的应用 2015年 随着质谱技术在生物研究领域的广泛应用,Veristrat分类法开始在非小细胞肺癌(NSCLC)等肿瘤个体化治疗中得到应用。肿瘤科医生根据患者外周血Veristrat分类法检测结果选择个体化的治疗方案。诸多试验均证实Veristrat分类法在NSCLC等肿瘤一线和多线个体化治疗中的指导作用。Veristrat分类法为NSCLC等肿瘤个体化治疗指导提供了新的思路。 王林 许晶 刘晓晴关键词:质谱法 个体化医学 MALDI-TOF质谱筛查NSCLC患者血清特异性多肽的探索性研究 被引量:4 2013年 背景与目的早期诊断是提高肺癌生存率的关键,传统的肺癌诊断技术仍存在一定局限性。鉴于近年来以质谱为核心技术的肿瘤蛋白组学在癌症诊断方面的初步研究,本研究探索性应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of ight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者和健康人群的血清差异多肽,以建立NSCLC的血清分类模型。方法将年龄和性别匹配的133例NSCLC患者和132例健康者血清标本按照3:1的比例随机分为两组:训练组由100例NSCLC患者和100例健康者血清标本组成,用以建立分类模型;测试组由33例NSCLC患者和32例健康者血清标本组成,用以验证模型。采用铜离子鳌合纳米磁珠提取血清多肽、MALDI-TOF-MS技术检测得到质谱图。ClinProToolsTM统计软件分析训练组NSCLC患者与健康者之间的多肽图谱,从中筛选出一组差异多肽并建立分类模型,最后用测试组对模型进行盲样验证。结果在训练组中观察到血清质荷比(m/z)在1,000Da-10,000Da范围内有131个差异多肽信号峰,在此范围内共得到14个有统计学意义的差异多肽峰(P<0.000,001;AUC0.9),其中NSCLC患者与健康者相比,表达上调的多肽有2个,表达下调的有12个,由统计软件筛选出3个多肽峰(7,478.59Da、2,271.44Da、4,468.38Da)建立分类模型,然后对测试组进行验证,其盲样验证敏感性100%,特异性96.9%,准确率98.5%。结论本组研究显示NSCLC患者与健康人群的血清多肽存在差异,应用MALDI-TOF-MS技术可建立NSCLC的血清多肽分类模型且小规模验证具有较好的敏感性和特异性,希望大规模验证模型,并与传统诊断方法对照或结合,进而尝试建立一种新的NSCLC早期诊断模式。 安娟 汤传昊 王娜 刘毅 郭万峰 李晓燕 王子赫 何昆 刘晓晴关键词:肿瘤蛋白质组学 肺肿瘤 离子阀技术在垂直引入式飞行时间质谱仪中的应用 被引量:1 2017年 垂直引入式飞行时间质谱仪(O-TOF MS)是以脉冲的工作方式对样品进行检测,对于离子源产生的连续离子流利用率极低。为了使O-TOF MS更好地匹配离子源,在自制的大气压接口垂直引入式飞行时间质谱仪(API-O-TOF MS)的基础上开发了离子阀技术,将原本连续进入推斥区的离子流调制为与推斥脉冲同步的离子团,提高推斥占空比,进而提高离子利用率。通过进一步研究富集原理以及分析富集参数的影响,确定了离子富集的最佳参数。以PPG-1000为实验对象,在同等条件下,离子信号强度普遍提升1个数量级以上。该结果表明,离子阀技术在O-TOF MS中的应用可有效提高仪器的离子利用率。 闫书雄 朱辉 莫婷 高伟 黄正旭关键词:占空比 质谱技术在肺癌中的应用研究进展 2013年 肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤,每年确诊的肺癌患者约161万例,占恶性肿瘤的12.7%;肺癌相关死亡约138万例,占癌症相关死亡的18.2%。我国每年约40万患者死于肺癌Ⅲ,降低其病死率的关键在于早期诊断。 安娟 汤传昊 秦海峰 刘晓晴关键词:肺癌 质谱技术 蛋白质组学