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壳聚糖纳米基因载体的制备和鉴定被引量：5: 2007年; 目的制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒的结构特征以及对细胞的基因转染效率。方法用表达绿色荧光蛋白的质粒(pGFP)作报告基因,采用复凝聚法制备壳聚糖-pGFP纳米粒。琼脂糖凝胶电泳分析壳聚糖和pDNA的结合能力,通过比色法检测其包封率,用纳米粒度仪和原子力显微镜对纳米粒的形态和粒径分布进行考察;通过荧光显微镜观察壳聚糖纳米粒介导pGFP在体外培养的人结肠腺癌细胞LoVo中的表达。结果琼脂糖凝胶电泳分析结果表明,pDNA与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合,包封率大于90%。制备的壳聚糖-pGFP纳米粒为结构紧密的不规则球形,平均粒径为209nm,多分散指数为0.15。体外细胞转染的结果表明,壳聚糖-pGFP纳米粒能介导pGFP转染LoVo细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白。结论壳聚糖可以有效凝聚pDNA,采用复凝聚法可制得100￣500nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率。壳聚糖纳米粒在体外能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达。因此,壳聚糖作为非病毒基因载体具有介导核酸类生物大分子的应用价值。; 苏丹季爱民; 关键词：壳聚糖纳米粒基因载体转染

MicroRNA as a novel drug target for cancer therapy: MiRNAs,a class of small,regulatory and non-coding RNA molecules, display aberrant expression patterns and func...; Xiaoxia LiuLi LiuQian XuPing WuXialin ZuoAimin Ji; 关键词：MICRORNA CANCER BIOMARKER; 文献传递

壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究（英文）: 本文进行了壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究。对壳聚糖/siRNA纳米粒的物化性质如粒子体积、表面电荷、形态学和稳定性等进行了评价。壳聚糖/siRNA纳米粒表面呈不规则片状或树突状,其动态直径约148nm,...; 季爱民苏丹车鸥李文适孙靓张忠义杨彬; 关键词：SIRNA FHL2 基因沉默; 文献传递

靶向VEGFR2基因的siRNA分子血清稳定性及其基因沉默效应被引量：3: 2009年; 目的设计并合成抗小鼠VEGFR2基因的siRNA分子(siVEGFR2),研究其血清稳定性和基因沉默效应,以便进一步研究经组织靶向性结构修饰后该siRNA分子的特性。方法设计并合成抗小鼠VEGFR2基因的siRNA分子,在37℃条件下与新鲜血清共孵育24h,不同时间点后取样电泳观察其完整性;用脂质体介导转染体外培养的MS1细胞,通过半定量RT-PCR分析基因沉默效果。结果随着孵育时间延长,未经修饰的siVEGFR2分子在血清中逐渐降解;经siVEGFR2转染的MS1细胞中,VEGFR2mRNA的表达水平明显下降,与空白转染组和对照siRNA转染组相比有显著差异(P<0.001),而空白转染组和对照siRNA转染组间比较无显著性差异(P=0.157)。结论裸siVEGFR2分子在血清中容易降解,siVEGFR2能特异性沉默靶基因的表达,为下一步体内应用siVEGFR2分子时稳定性修饰的必要性提供了理论依据。; 曹波季爱民; 关键词：SIRNA 血管内皮生长因子受体2 基因沉默

siRNA分子非病毒载体的生物体内给药系统被引量：1: 2009年; 目的综述小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)经非病毒载体介导生物体内给药的研究进展。方法查阅国内外相关文献,进行分析、归纳和综述。结果与结论siRNA分子由于其本身的特性,生物体内给药必须借助合适的给药系统,相对病毒载体,非病毒载体具有简便,安全和毒性小等特点,易于为临床所接受,因而近年来发展迅速。; 曹波季爱民; 关键词：小分子干扰RNA 非病毒载体给药系统

壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究（英文）: 本文进行了壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究。对壳聚糖/siRNA纳米粒的物化性质如粒子体积、表面电荷、形态学和稳定性等进行了评价。壳聚糖/siRNA纳米粒表面呈不规则片状或树突状,其动态直径约148nm,...; 季爱民苏丹车鸥李文适孙靓张忠义杨彬; 关键词：SIRNA FHL2 基因沉默; 文献传递

聚乙烯亚胺介导siRNA分子体内外基因沉默VEGFR2表达的研究: 应用PEI包裹靶向小鼠VEGFR2基因的siRNA分子以研究其体外基因沉默作用及不同给药途径的肿瘤生长抑制作用。采用共聚焦显微镜观察荧光染料CY3标记的siRNA分子的细胞内定位,RT-PCR和Western Blot检...; 杨欢车瓯陈珊孙靓季爱民; 关键词：PEI SIRNA VEGFR2 基因沉默; 文献传递

Self-assembly nanoparticles based on c(RGDfk)peptide for the delivery of siRNA targeting VEGFR2 gene for tumor therapy: The clinical application of small interference RNA(siRNA) has been restricted by poor intracellular uptake,low...; Li LiuXiaoxia LiuQian XuPing WuXialin ZuoJingjing ZhangHouliang DengZhuomin WuAimin Ji; 关键词：SELF-ASSEMBLY NANOPARTICLES TUMOR-TARGETING; 文献传递

聚乙烯亚胺介导siRNA分子体内外基因沉默VEGFR2表达被引量：2: 2010年; 应用阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹靶向小鼠VEGFR2基因的siRNA分子,以研究其体外基因沉默作用及不同给药途径的肿瘤生长抑制作用。采用共聚焦显微镜观察荧光染料CY3标记的siRNA分子的细胞内定位,RT-PCR和Western blotting检测VEGFR2mRNA和蛋白表达水平基因沉默效果,建立裸鼠皮下肿瘤模型比较经瘤内和尾静脉给予siVEGFR2/PEI抑制肿瘤生长的作用。共聚焦显微镜观察证实PEI能成功转染siRNA分子进入细胞质,siVEGFR2/PEI转染的MS1细胞中VEGFR2mRNA和蛋白表达水平明显下降,沉默效率分别为28.2%和23.6%。瘤内给与siVEGFR2/PEI组裸鼠肿瘤体积[(189.429±17.562)mm3]明显小于空白组[(365.844±20.713)mm3]和PEI静脉给药组[(315.507±20.491)mm3]。结果表明,PEI能有效介导siRNA分子转染进入细胞质并能特异性沉默靶基因的表达。未经组织靶向性修饰的PEI不具有肿瘤靶向作用,瘤内注射的抗肿瘤效应优于静脉给药途径,这为进一步研究PEI介导的siRNA分子体内基因沉默效应的机制和优化该给药系统临床治疗肿瘤应用奠定了基础。; 杨欢车瓯陈姗孙靓季爱民; 关键词：聚乙烯亚胺 SIRNA 基因沉默

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国家自然科学基金(30672557)