国家自然科学基金(81030052) 作品数:10 被引量:19 H指数:3 相关作者: 高志贤 宁保安 白家磊 彭媛 刘楠 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 华中农业大学 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 环境科学与工程 自动化与计算机技术 更多>>
纳米金信号放大分子印迹电化学传感器用于雌二醇的检测 被引量:1 2014年 目的构建分子印迹聚合物修饰的具有高灵敏度和选择性的电化学传感器.实现对雌二醇(E2)小分子的快速检测,并为农药残留及环境污染物的检测提供依据。方法以对氨基苯硫酚作为印迹聚合功能单体,通过Au—S共价键连接在用于信号放大的纳米金颗粒表面.并利用氢键与模板分子雌二醇连接形成单层膜,最后将上述电极在含有雌二醇和对氨基苯硫酚的溶液中进行电聚合,形成具有大量印迹位点的聚合物膜。用电化学循环伏安法和电化学阻抗谱对修饰电极进行表征。结果在电极表面自组装制备了含E2印迹位点的聚合物膜.用计时电流法测量溶液中E,在1.0×10^-8~1.0×10^-12mg/ml范围内呈线性(R^2=0.9989),最低检测限为1.51×10^-12mg/ml,相同条件下制备的6支电极具有良好的重复性(相对标准偏差为2.44%.n=6)。结论纳米金信号放大的分子印迹电化学传感器可以快速灵敏地对雌二醇进行检测。 张笑言 彭媛 高志贤 宁保安 白家磊 刘颖关键词:电化学传感器 分子印迹 纳米金颗粒 雌二醇 T7噬菌体衣壳蛋白10A的表达、纯化及多克隆抗体的制备 被引量:1 2013年 目的表达纯化T7噬菌体衣壳蛋白10A,并免疫家兔得到抗10A多克隆抗体,为研究噬菌体展示抗体技术,进而筛选致病微生物蛋白抗体奠定基础。方法 37℃培养含有T7噬菌体10A蛋白质粒的大肠杆菌BLT5615,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷直接诱导表达该蛋白;SDS-PAGE鉴定表达状态,盐酸胍变性-尿素复性纯化以包涵体形式存在的蛋白并免疫家兔;辛酸-硫酸铵沉淀法纯化多克隆抗体,间接ELISA测定效价,Western Blot鉴定特异性。结果成功表达了T7噬菌体衣壳蛋白10A。SDS-PAGE显示所表达的蛋白相对分子质量约为37 kDa,主要以包涵体形式存在;复性后SDS-PAGE分析获得单一条带蛋白。利用该蛋白免疫家兔,6次免疫后抗血清的效价均达到1∶16 0000。纯化后的多克隆抗体可以和T7噬菌体衣壳蛋白10A特异结合。结论成功表达、纯化了T7噬菌体衣壳蛋白10A,并制备了其多克隆抗体。 陈卉爽 范献军 宁保安 白家磊 彭媛 高志贤关键词:包涵体 多克隆抗体 同时检测己烯雌酚和雌二醇的免疫层析技术研究 <正>目的己烯雌酚和雌二醇作为雌激素调节剂被广泛使用。但由于药物滥用、工厂乱排等,此类化合物已在水和土壤中被发现,其半衰期长,易富集于动物体内,并通过食物链进入人体,影响人体激素水平,甚至致癌,严重危害人类健康。许多国家... 白家磊 范献军 李桂敏 彭媛 赵丽 赵翠娇 姜随意 原林 宁保安 高志贤文献传递 甲氧化三丁基锡通过线粒体途径诱导Jurkat T淋巴瘤细胞凋亡 2013年 目的研究甲氧化三丁基锡(tributyltin methoxide,TBTMO)通过线粒体途径诱导Jurkat T淋巴瘤细胞凋亡。方法使用不同剂量(0、0.4、0.6、0.8和1.0μmol/L)的TBTMO处理细胞,分别于不同时间点收获细胞后,采用流式细胞仪对磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻、线粒体Apo2.7蛋白和线粒体膜电位等分子生物学标志和指标进行检测和分析。结果 TBTMO诱导后Jurkat T淋巴瘤细胞的PS外翻,可见有凋亡小体、细胞核凝聚、细胞核碎裂等许多凋亡的典型变化特征。TBTMO诱导后线粒体膜蛋白Apo2.7分子增加、膜电位快速降低并维持这种低电位至濒临死亡。结论 TBTMO可通过线粒体途径诱导Jurkat人淋巴瘤细胞凋亡。 刘文斌 杨录军 李永红 曹佳 刘晋祎关键词:线粒体途径 JURKAT T细胞 细胞凋亡 Detection of Atrazine Residue in Food Samples by a Monoclonal Antibody-based Enzyme-linked Immunosorbent Assay 被引量:5 2013年 Atrazine(AT,2-chloro-4-ethylamino-6-isopropyl-amino-s-triazine)has been detected in ground water in several areas of the United States for many years,as well as in China,wherein the growth rate of its gross LV Zhi Qiang WANG Cai Hong WANG Ting Ting CHEN Cui Cui WANG Ying NING Bao An LIU Ming LIU Jian Qing BAI Jia Lei PENG Yuan GAO Zhi Xian雌二醇完全抗原及多克隆抗体的制备 被引量:5 2012年 目的改造雌二醇半抗原,合成雌二醇完全抗原,并经免疫家兔得到抗雌二醇多克隆抗体,为建立雌二醇的酶联免疫吸附方法及其在动物性食品安全快速检测中的应用奠定基础。方法改造雌二醇-3-羧甲基醚(E2-3-CME),碳二亚胺(EDC)法合成免疫原(E2-BSA)和包被原(E2-OVA),采用SDS-PAGE电泳和质谱(MS)对其鉴定,免疫家兔2只,制备多克隆抗体;间接ELISA测定效价、灵敏度和特异性。结果成功合成雌二醇免疫原和包被原,6次免疫后E2-T1和E2-T2抗血清的效价分别达到1∶128 000和1∶32 000,E2-T1抗体和E2-T2抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为44.00 ng/ml和45.59 ng/ml,与雌二醇类似物没有明显交叉反应。结论合成的雌二醇完全抗原具有较好的免疫原性,产生的抗雌二醇多克隆抗体具有较好的特异性。 陈翠翠 刘建青 吕志强 周彩虹 刘晶 柳明 宁保安 高志贤关键词:雌二醇 BPA、DES及联合暴露对雄性大鼠生殖毒性的研究 被引量:1 2015年 目的研究低剂量双酚A(Bisphenol A,BPA)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)及两者联合暴露对雄性SD大鼠的生殖毒性。方法选择健康的雄性SD大鼠35只,随机分成7组,分别用0.5、5 mg/kg BPA,0.05、0.5μg/kg DES,以及0.5 mg/kg BPA+0.05μg/kg DES、5 mg/kg BPA+0.5μg/kg DES进行灌胃染毒,观察记录大鼠的体重变化,在染毒4周时处死取材。取大鼠两侧睾丸和附睾并称重,检测精子活力水平;做睾丸组织病理学切片,观察睾丸组织形态变化;检测血清激素水平。结果 BPA、DES及联合染毒4周后,联合暴露高剂量组的体重增重程度显著高于对照组(P<0.05),附睾质量显著低于对照组(P<0.05),睾丸质量有下降的趋势。联合暴露高剂量组的快速游动精子百分比显著增高(P<0.05),DES低剂量组和联合暴露高剂量组的慢速游动精子百分比均显著降低(P<0.05),BPA高剂量组、DES组和联合暴露低剂量组不动精子百分比显著增加(P<0.05)。染毒组大鼠生精细胞和支持细胞分离,细胞排列疏松紊乱,可见少量生精细胞空泡化,且联合暴露组病理学改变程度最大。血清睾酮水平,BPA高剂量组和联合暴露高剂量组显著高于对照组,联合暴露低剂量组显著低于对照组(P<0.05)。结论低剂量BPA和DES对大鼠有一定的生殖毒性,两者联合暴露对大鼠体重、附睾质量、精子活力和激素水平等的影响更显著,睾丸组织形态出现病变也更严重。 陈洪强 姜晓 刘文斌 韩飞 尹俐 代雁凌 曹佳 刘晋祎关键词:DES BPA 生殖毒性 基于仿生光子晶体技术的快速检测传感器构建 目的 通过构建基于仿生光子晶体的传感器,建立快速、灵敏的农兽药残留、食品中激素类物质等检测的新技术.方法 1.构建仿生分子印迹光子晶体传感器:1)将模板分子与单体进行混合,在引发剂作用下进行悬浮聚合,制备出具有模板分子的... 洪小迪 陈翔 赛娜 郭纯 周彩虹 彭媛 白家磊 宁保安 高志贤应用于食品检测的上转换材料的合成与修饰 被引量:1 2014年 镧系元素掺杂的上转换发光纳米颗粒(UCNPs)因其独特的化学和光学特性而成为了食品检测领域中最具应用前景的材料之一。发现该技术在布鲁氏菌、链球菌及大肠杆菌等食品安全检测中应用效果极好。为了进一步的推进其在食品安全领域中的应用,需要改进其的合成方法与表面修饰方法。本文利用水热法合成了不同表面包覆剂包覆的UCNPs并且探讨了几种修饰UCNPs的方法,使其能够更好地应用于食品检测领域。 赵玉凤 宁保安 张娜 范献军 姜随意 田静菡 高志贤关键词:上转换发光 食品检测 水热合成法 表面修饰 悬浮芯片技术在典型环境化学污染物多元检测中的应用 被引量:1 2013年 当前,我国化学性污染严重,恶性污染事件层出不穷。工农业生产和生活带来的污染不仅是导致生态环境恶化和环境质量下降的主要原因,也是影响健康的重要因素。饮水与食品安全已成为全球关注的焦点,并且在我国,这是一个严峻而突出的问题。多年的监测数据表明, 刘楠关键词:芯片技术 化学性污染 污染事件 环境质量