广东省科技计划工业攻关项目(2004830701002)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：朱恒梅张海燕余学清姜宗培常洁更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
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- NADPH氧化酶介导血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚被引量：4
- 2007年
- 目的 探讨NADPH氧化酶在血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化以及细胞外基质积聚中的作用。方法 体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,随机分为以下4组：正常对照组,AngⅡ（10^-7 mol/L）组,AngⅡ＋Los（洛沙坦,10μmol/L）组及AngⅡ＋DPI（NADPH氧化酶活性抑制剂,10μmol/L）组。应用荧光染料（DCF）及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧（ROS）的产生。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚单位p47phox以及纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）1、α平滑肌肌动蛋白（SMA）、E钙黏蛋白（cadherin）mRNA的表达。Western印迹检测p47phox、α-SMA的蛋白表达。结果 （1）外源性AngⅡ可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS的产生,刺激15 min后,ROS的表达较对照组上升了（3．64±0．53）倍。DPI和洛沙坦可显著抑制AngⅡ刺激后ROS的产生（P＜0．05）。（2）AngⅡ刺激腹膜间皮细胞后, NADPH氧化酶亚单位p47phox mRNA和蛋白的表达均呈上升趋势。洛沙坦和DPI可阻断由AngⅡ诱导的p47phox表达上调（P＜0．05）。（3）AngⅡ诱导α-SMA表达的上调以及E-cadherin mRNA的下调,洛沙坦和DPI可部分逆转AngⅡ的这种作用。（4）AngⅡ刺激8 h后可明显上调PAI-1的mRNA表达,为正常对照组的（3．06±0．77）倍。洛沙坦和DPI可明显阻断PAI-1的表达上调（P＜0．05）。结论 NADPH氧化酶依赖产生的ROS介导了AngⅡ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚。阻断AngⅡ的作用及抑制NADPH氧化酶的表达和活性可作为防治腹膜纤维化的潜在治疗靶点。
- 常洁姜宗培张海燕朱恒梅余学清
- 关键词：腹膜NADPH氧化酶间皮细胞
- NADPH氧化酶在转化生长因子β1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量：4
- 2007年
- 目的探讨NADPH氧化酶在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）转分化中的作用。方法用TGF-β1（10μg/L）刺激NRK-52E细胞不同时间,观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI- 1）及Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）的表达。部分实验中细胞在TGF-β1刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI预处理1 h。用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧（ROS）的产生。用RT-PCR方法检测NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位mRNA的表达。α-SMA、E-cadherin、PAI-1及Col-ⅠmRNA及蛋白的表达分别采用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫化学检测。结果TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达,8 h及24 h时分别为对照组的2.43倍及3.59倍（P〈0.01）。TGF-β1可显著促进细胞ROS的产生,5 min时已是对照组的2.5倍（P〈0.05）。DPI预处理同时可显著逆转TGF-β1诱导NRK-52E细胞ROS的产生（P〈0.05）、α-SMA的表达上调、E-cadherin的表达下调以及PAI-1和Col-Ⅰ的表达上调。结论TGF-β1可促进NRK-52E细胞增加ROS的产生。ROS介导了TGF-β1诱导NRK-52E细胞的转分化,促进肾脏纤维化。
- 张海燕姜宗培常洁李晓艳朱恒梅董秀清余学清
- 关键词：转化生长因子Β1NADPH氧化酶肌成纤维细胞转分化
