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两种α–葡萄糖苷酶的酶学性质及转苷作用被引量：1: 2015年; 来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的不同α–葡萄糖苷酶,其对底物的水解和转苷活性均存在一定差异,影响了它们在实际生产中的应用.以甲醇毕赤酵母重组菌株分别表达的两种α–葡萄糖苷酶Glu-A和Glu-B为研究对象,分析了两种酶的酶学性质,结果表明Glu-A和Glu-B最适作用温度均为50,℃,最适p H分别为5和6.对底物麦芽糖的转苷作用研究表明,产物低聚异麦芽糖中各种糖的种类和比例差别较大,Glu-A作用麦芽糖后的总低聚糖、异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖的生成率分别为51.04%、15.79%、31.41%和4.18%,而Glu-B作用麦芽糖后的总低聚糖、异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖的生成率分别为35.85%、16.71%、4.15%与15.85%.; 王舒雅胡顿吉刘逸寒李玉; 关键词：Α-葡萄糖苷酶低聚异麦芽糖酶学性质

微生物碱性蛋白酶的研究与开发被引量：10: 2017年; 微生物碱性蛋白酶被广泛应用于洗涤、食品、皮革及纺织等制造工业中.本文围绕碱性蛋白酶的研究与开发,对微生物碱性蛋白酶的来源、表达调控、分子改造、构效关系及应用进行了阐述,指出了今后的研究方向.; 刘逸寒王洪彬刘夫锋张会图秦慧民路福平; 关键词：碱性蛋白酶微生物来源构效关系

葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶的共固定化研究被引量：1: 2015年; 研究了环氧树脂在共固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(CAT)中的应用,利用筛选出固定化效果最好的环氧树脂ES-4,考察加酶量、p H及磷酸钠缓冲液离子浓度对共固定化效果的影响。结果表明:共固定化的最佳条件是:GOD 0.5 m L、CAT 1.0 m L、磷酸钠缓冲液p H6.5、浓度1.0 mol/L,固定24 h后固定化葡萄糖氧化酶酶活回收率为35%,过氧化氢酶酶活回收率为43%。连续操作15批次后,酶活力仍能保持初始酶活的73%。该研究为工业化利用固定化酶生产葡萄糖酸钠提供了新的思路。; 贺玉兰毛淑红魏萍萍路福平; 关键词：葡萄糖氧化酶过氧化氢酶环氧树脂

碱性蛋白酶的异源表达及其在制备CPP中的应用被引量：1: 2016年; 碱性蛋白酶是现代工业酶制剂中最重要的酶类之一,在人类日常生活中扮演着非常重要的角色.本研究以嗜碱芽胞杆菌(B.alcalophilus)TCCC11006基因组为模板,从中扩增出碱性蛋白酶基因apr,并构建重组表达质粒p HYapr,将重组质粒电转入蛋白酶基因缺失的地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)H115中,实现了碱性蛋白酶的分泌表达.重组菌在LB培养基中最高酶活力达到3,199,U/m L,是出发菌株酶活力的1.82倍,发酵周期缩短了8,h.然后通过单因素和正交实验对重组碱性蛋白酶水解酪蛋白的工艺参数进行优化,确定了最佳水解温度、p H和酶添加量分别为50,℃、9.5和4,000,U/g.在最佳水解条件下,通过钡-乙醇沉淀的方法制备生物活性肽——酪蛋白磷酸肽(CPP),其得率和氮磷物质的量比分别为14.8%,和8.47.这为碱性蛋白酶在功能性食品制造方面的应用奠定了良好的基础.; 凌敏董自星李玉叶松王正祥路福平; 关键词：碱性蛋白酶异源表达水解酪蛋白磷酸肽

葡萄糖脱氢酶温控表达菌株的构建及其发酵工艺被引量：1: 2016年; 膜结合型的吡咯喹啉醌依赖性葡萄糖脱氢酶(m PQQGDH,EC 1.1.5.2)是一种重要的氧化还原酶,因其在血糖诊断及葡萄糖传感器中的重要应用而受到广泛的关注.但是其低表达水平限制了这种酶的大规模工业化生产及应用.本文利用λ噬菌体的温敏型启动子PL-PR替换葡萄糖脱氢酶基因的启动子,构建了重组菌大肠杆菌(E.coli)B0013-120/p GCd::Km-PL-PR,并使重组菌的酶活比原始菌株提高了21.2%,.再通过发酵条件的优化,确定了m PQQGDH的最适诱导表达条件为:以甘油为碳源、诱导温度42,℃、诱导时间4,h、诱导前菌体密度A600=1.6.最后对该酶的酶学性质进行了分析,其最适反应温度和p H分别为25,℃和6.0,所得m PQQGDH的热稳定性在45,℃条件下可维持稳定的活性.这为葡萄糖脱氢酶更广泛的应用及工业化生产奠定了基础.; 李杨张志萌董自星王正祥路福平; 关键词：葡萄糖脱氢酶发酵工艺优化

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国家高技术研究发展计划(2013AA102106-07)