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条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针制备条件优化被引量：2: 2008年; 通过化学方法使条斑紫菜R-藻红蛋白与抗体进行交联以制备荧光探针,并对制备条件进行优化。首先采用异双功能试剂SPDP(N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇)和DTT(二硫苏糖醇)分别使R-PE(R-藻红蛋白)衍生化、IgG(单克隆抗体)巯基化,其次测定了SPDP与R-PE不同摩尔比对R-PE衍生化的影响、DTT与IgG不同摩尔比对IgG巯基化的影响,结果表明:SPDP与R-PE的最佳摩尔比为40:1,DTT与IgG的最佳摩尔比为500:1。在此基础上,建立了R-PE与IgG交联的制备技术,并应用全波长扫描吸收光谱、电泳分析和荧光显微镜观察等监测和分析技术。证实了藻红蛋白与抗体已成功交联形成了复合物。; 周铭蔡春尔柳俊秀吴维宁何培民; 关键词：交联荧光探针

腹泻性贝毒素软海绵酸的昆明系小鼠生物学检测法的建立被引量：7: 2009年; 为完善腹泻性贝毒素软海绵酸(Okadaic acid,OA)的小鼠生物学检测技术,以昆明系小鼠为实验材料,应用小鼠生物学检测法检测了OA的毒性.用不同浓度OA标准溶液通过腹腔注入19～21g昆明系小鼠体内,观察其中毒症状,确定1个鼠单位(MU)所代表的毒素剂量,并且建立剂量-死亡时间曲线.结果表明,昆明系小鼠经OA腹腔注射后中毒症状和死亡时间具有明显剂量效应关系,其剂量-死亡时间曲线方程为y=600.57x-2.257,其中y代表致死时间(h),x代表剂量(μg);将死亡时间t变为时间倒数1/t,对OA的毒性MU取对数(即logMU),得直线回归方程为y=0.5363x+0.1295,R2=0.9488,p<0.01,其中y代表OA毒素剂量单位的对数(1ogMU),x代表小鼠死亡时间倒数(1/t),R2为可决系数.通过该方程计算得出,1个鼠单位(MU)所对应的OA剂量值约为4.015μg,其95%置信限为3.826～4.204μg.; 柳俊秀胡乐琴何培民

赤潮藻毒素危害及其检测方法研究进展被引量：7: 2009年; 近年来,世界各地包括我国部分沿海地区赤潮发生过度频繁,许多赤潮藻毒素不但使其他海洋生物中毒,对人类健康也有潜在的危害,因此对赤潮藻毒素的研究已经成为海洋环境科学研究的重要内容。我们介绍了赤潮藻毒素的危害,并详细综述了赤潮藻毒素检测技术研究进展。; 柳俊秀何培民; 关键词：赤潮藻毒素

条斑紫菜藻胆蛋白提纯方法优化探索被引量：13: 2009年; 采用溶胀法与组织捣碎法相结合的紫菜叶状体细胞破碎方法,研究了不同物液比、缓冲液浸泡时间和硫酸氨盐析次数对藻胆蛋白纯度和产率的影响,对比了各种羟基磷灰石的层析效果,并对所得藻红蛋白和藻蓝蛋白做了吸收光谱、荧光发射光谱和SDS-PAGE鉴定。结果表明,在物液比为1∶5,浸泡时间为36h时,紫菜综合破碎效果最佳;经过4次硫酸氨盐析后,藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到1.71和0.98,采用Siegelman的方法制备的羟基磷灰石一次层析所得藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到4.73和4.42,产率分别为0.144%和0.042%,且光谱和电泳鉴定结果均达到商品化要求。; 蔡春尔周铭李春霞柳俊秀汪卿何培民; 关键词：条斑紫菜藻红蛋白藻蓝蛋白羟基磷灰石

赤潮藻毒素种类与化学结构研究进展被引量：17: 2009年; 由于海洋微藻毒素的发现多起源于贝类或鱼类，故又称为贝毒或鱼毒。有毒藻毒素的结构差别很大，既有复杂的多（聚）醚类化合物也有简单的氨基酸。根据毒素对人类引发的中毒症状和藻源来进行分类，常见的藻毒素可分为：麻痹性贝毒（paralytic shellfish poisoning，PSP）、腹泻性贝毒（diarrhetic shellfish poisoning，DSP）、记忆丧失性贝毒（amnesic shellfish poisoning，ASP）、神经性贝毒（neurotoxic shellfish poisoning，NSP）及西加鱼毒（ciguatera fish poisoning，CFP）。现从这些毒素的来源、化学结构、毒性作用等方面进行概述。; 柳俊秀何培民; 关键词：化学结构藻毒素麻痹性贝毒赤潮腹泻性贝毒中毒症状

环境因子对链状亚历山大藻生长的影响被引量：12: 2011年; 链状亚历山大藻是一种能产生麻痹性贝毒的有害赤潮藻类,研究环境因子对链状亚历山大藻生长特性的综合影响,找到链状亚历山大藻生长的适宜条件,对有效预报赤潮形成具有十分重要的意义。本文设计了四因素三水平的正交实验,研究了温度、盐度、营养盐、光照强度等环境因子对链状亚历山大藻生长特性的影响。结果表明,在实验范围内,链状亚历山大藻生长最佳条件为温度20℃,盐度30,光照强度5 000 lx,培养基中氮磷含量为基础f/2培养液配方中氮磷含量的3倍。通过极差分析得出影响链状亚历山大藻生长的因素强弱顺序是:温度>光照强度>起始氮磷含量>盐度。本实验中四个因素对链状亚历山大藻生长都有显著影响,其中温度影响最大。; 邵盛男缪宇平周宏农陈海峰; 关键词：链状亚历山大藻环境因子麻痹性贝类毒素正交实验

微小亚历山大藻麻痹性贝类毒素小鼠生物检测被引量：2: 2008年; 应用小鼠生物检测法对培养的微小亚历山大藻(LJX02株系)麻痹性贝类毒素进行了检测。首先建立微小亚历山大藻培养技术,利用对数期藻细胞接种,可使藻细胞处于快速生长,并在7d内藻细胞密度最高达到30000ml-1。从培养株系中提取的藻毒素,经液相质谱分析主要为GTX1/4和GTX2/3,其含量分别为12.23μg/ml和9.742μg/ml,12L藻体培养液中可获得18.35μgGTX1/4和14.61μgGTX2/3毒素量。采用小鼠生物检测法建立了藻毒素剂量-小鼠死亡时间曲线,其曲线方程为Y=74.017X-1.5896,将死亡时间t变为时间倒数1/t,GTX毒性MU取对数为logMU,得直线回归方程为Y=3.7009X-0.0858(R2=0.9824),求得了昆明小鼠一个鼠单位所代表的GTX1/4和GTX2/3毒素剂量分别为0.026μg和0.021μg。; 柳俊秀陈桃英梁灵之田晓玲沈和定胡乐琴何培民; 关键词：微小亚历山大藻麻痹性贝类毒素昆明小鼠

极大螺旋藻藻胆蛋白提纯工艺初试被引量：2: 2008年; 目的:螺旋藻富含藻胆蛋白,其附加值高,本实验对螺旋藻藻胆蛋白提取工艺做初步探索;方法:比较了组织捣碎法,冻融法,超声波法释放螺旋藻藻胆蛋白的效果,并用硫酸铵盐析,羟基磷灰石层析进一步提纯,对结果作了吸收光谱和SDS电泳鉴定;结果:显示超声波法破碎效果好,两次羟基磷灰石层析所得蛋白纯度较高;结论:表明本实验流程相对以往工艺经济,省力,省时,对螺旋藻藻胆蛋白的规模提取有一定实用价值。; 蔡春尔柳俊秀周铭李晨马召腾何培民; 关键词：极大螺旋藻藻胆蛋白纯化纯度产率

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上海市科委“登山计划”(06dz12015)