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PI3K/AKT/TORC1信号通路对丝素蛋白合成转录因子SGF1表达的影响被引量：2: 2017年; SGF1(silk gland factor 1)是一种转录调控因子,属于Fox家族的Fox A亚家族成员,能够启动丝素基因的表达,合成丝素蛋白。已知果蝇和其他高等动物中的PI3K/AKT/TORC1信号通路可以调控Fox转录蛋白的表达。为了探究家蚕幼虫后部丝腺(PSG)中PI3K/AKT/TORC1信号通路对SGF1表达水平的影响,对4龄第4天和5龄第7天家蚕幼虫分别注射信号通路抑制剂Wort、Rapa和LY294,24 h后解剖取出后部丝腺,一组用于免疫组织化学染色实验,另一组用于提取蛋白质进行Western blot检测。免疫组织化学染色实验表明,与对照组相比,注射3种信号通路抑制剂的家蚕幼虫后部丝腺组织的绿色荧光亮度明显减弱;Western blot检测表明,与对照组相比,实验组家蚕幼虫后部丝腺的蛋白质浓度有所下降。综合以上结果初步得出PI3K/AKT/TORC1信号通路抑制剂处理均可降低家蚕幼虫后部丝腺中SGF1表达的结论,即提示可以通过上游信号通路PI3K/AKT/TORC1影响SGF1的表达水平,进而调控丝素蛋白的合成。; 郭亚新马俐李胜李恺; 关键词：免疫组织化学染色免疫印迹法

家蚕c-Myc基因的全长cDNA克隆及促细胞增殖功能初探: 2015年; c-Myc是Myc原癌基因家族的重要成员,广泛参与细胞增殖、分化、凋亡等正常生命活动的调节,其异常活化可引发多种肿瘤的发生与发展。基于生物信息学分析和RACE技术,自家蚕5龄幼虫卵巢中克隆了与果蝇d Myc同源的原癌基因Bmc Myc。Bmc Myc基因的c DNA全长1 984 bp,由1 026 bp的完整ORF序列、421 bp的5'-UTR和537 bp的3'-UTR组成,编码蛋白质含341个氨基酸残基,其C末端含有一个Myc家族共有的b HLH保守结构域。Bmc Myc在家蚕各发育时期及5龄第3天幼虫的主要组织中均有表达,不同发育时期以幼虫期和蛹早期的表达水平相对较高。Bmc Myc基因的产物定位于细胞核内,是一种核蛋白因子。在Bm E细胞中表达Bmc Myc出现明显的细胞增殖现象,其下游靶标基因CDK4和ODC的表达亦因之上调,初步证实Bmc Myc基因具有促进细胞增殖的生物学功能。上述结果为进一步阐释Bmc Myc的功能并探索利用其创制蚕丝增产遗传素材提供了理论参考。; 徐汉福段小利王日远宋春暖赵萍; 关键词：家蚕 BMC MYC基因

家蚕miRNA Novel-31＊上调溶血素基因的表达被引量：1: 2016年; 【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用。【方法】用生物信息学方法预测Novel-31*的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31*及其靶基因在家蚕感染Bm CPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞Bm N,使用荧光定量PCR检测Novel-31*对靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5'UTR区域。荧光定量PCR分析表明,Novel-31*及溶血素基因在感染Bm CPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达。荧光定量PCR检测表明,在Novel-31*慢病毒表达载体和溶血素基因5'UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕Bm N细胞中,溶血素基因都上调表达。【结论】溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5'UTR结合,上调溶血素基因的表达。; 施莉莉耿涛吴萍潘中华覃光星高坤侯成香郭锡杰; 关键词：家蚕 MIRNA 靶基因慢病毒载体溶血素

MET Is Required for the Maximal Action of 20-Hydroxyecdysone during Bombyx Metamorphosis: Little is known about how the putative juvenile hormone(JH) receptor,the bHLH-PAS transcription factor MET,is ...; 郭恩Qianyu HeShumin LiuLing TianZhentao ShengQin PengJingmin GuanMingan ShiKang LiLawrence I.GilbertJian Wang曹阳李胜; 关键词：MET 20-HYDROXYECDYSONE METAMORPHOSIS; 文献传递

家蚕后部丝腺miRNAs的鉴定及其对丝素等基因表达调控的研究: microRNA是一类长度约22个碱基的内源性非编码小分子RNA,可以调控基因转录后的表达,它通过序列互补配对的方式对靶标mRNA的表达进行调控,具有广泛的基因调节功能,与一系列重要的生命过程密切相关。到目前为止,已经在...; 宋菲; 关键词：家蚕丝素基因; 文献传递

piggyBac转座子在金鱼及泥鳅转基因中的应用: 2012年; 为了探讨piggyBac转座子在鲤科鱼类及鳅科鱼类转基因中的适用性,实验通过将PAβ启动子控制的DsRed表达元件插入pigA3GFP中,构建转基因载体pigA3GFP-AβDsRed。用该载体对草鱼肾脏(CIK)细胞转染,结果显示,通过piggyBac转座子可将外源基因导入到CIK细胞的基因组中,来源于家蚕的A3启动子和来源于巨细胞病毒的CMV启动子在CIK细胞均具有活性。将转基因载体pigA3GFP、pigA3GFP-AβDsRed分别与辅助质粒helper-pigA3混合后以精子介导法导入金鱼和泥鳅的受精卵后,经荧光观察、PCR鉴定、Dot blotting鉴定,证实获得了转基因金鱼和转基因泥鳅。研究表明,PB转座子在鲤科鱼类及鳅科的一些鱼中具有转座活性。; 胡莹莹郭学双周阳曹广力贡成良薛仁宇; 关键词：金鱼泥鳅 PIGGYBAC转座子转基因

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国家重点基础研究发展计划(2012CB114605)