国家自然科学基金(30900811)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：温州医科大学温州医学院教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
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- MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响
- 2015年
- Mitoferrin-1(MFRN1)是溶质携带蛋白家族的一员,是线粒体内膜上最主要的铁运输蛋白。为了观察MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响,采用包装慢病毒和感染293T细胞的方法构建MFRN1稳定过表达的细胞模型(293T-MFRN1),并对其线粒体功能进行评价。构建的稳定细胞株293T-MFRN1中MFRN1转录水平及蛋白表达水平显著增加(P<0.01),MFRN1过表达细胞线粒体内总铁的含量明显增加(P<0.05);电镜显示线粒体结构损伤,线粒体嵴减少、空泡化;线粒体能量代谢受抑制,细胞ATP含量显著下降,腺苷酸池总量(ATP+ADP+AMP)比对照组减少约40%;细胞生长受到抑制,在细胞培养48 h后高表达组细胞数量显著低于对照组;细胞内羟自由基(·OH)含量增加;线粒体DNA发生明显的氧化损伤。以上表明,MFRN1表达量的稳定对细胞功能极为重要,表达量异常增加将导致细胞线粒体功能障碍、细胞增殖抑制。
- 杨宇陈琳张小勤张柳章万林施孟如吕建新李伟
- 关键词：稳定转染线粒体功能活性氧能量代谢
- 超高效液相色谱-质谱法测定细胞中嘌呤核苷酸的方法探究被引量：7
- 2013年
- 建立了检测细胞中嘌呤核苷酸（ATP、ADP、AMP、NAD＋和NADP＋）的超高效液相色谱-质谱（UP-LC-MS）分析方法.采用KinetexTM HILIC柱（50 mm ×4.6 mm,2.1 μm）进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法学确证表明：各待测物在1.0 ～ 100 μmol/L范围内线性关系良好,相关系数（r）均大于0.99,平均回收率为95.7％～101.1％,相对标准偏差为1.2％～6.1％.本方法的灵敏度高、简便快速、重复性好,可用于细胞中能量代谢的研究.
- 姜丹丹李伟周怀彬张婷许芳武佳吕建新
- 关键词：细胞ATPADPAMP
- 利用血清miRNAs表达谱分析荔枝核提取物降低db/db小鼠血糖的可能机制
- 2013年
- 目的:利用血清miRNAs表达谱初步分析荔枝核提取物降低db/db小鼠血糖的可能机制。方法:荔枝核提取物连续灌胃治疗12周,追踪观察其对db/db小鼠体质量、空腹血糖、糖耐量和胰岛素耐量等的影响,并利用血清miRNAs芯片初步分析血清中miRNAs的改变,然后通过Real-time PCR确定组织中相关基因的表达改变。结果:db/db小鼠荔枝核处理组与未处理组相比,体质量、摄食量均无明显改变(P>0.05);但饮水量在灌胃6周时明显减少(P<0.05);空腹血糖值明显下降(P<0.05)。血清miRNAs芯片结果显示db/db小鼠荔枝核处理组miRNAs表达谱出现明显改变,其中均来自于Sfmbt2第10内含子的mmu-miR-297a-3p、mmu-miR-669f-5p、mmu-miR-467d-3p、mmu-miR-466c-5p表达一致性下降;并且Sfmbt2在肝脏组织中表达出现明显下降,为未处理组的64.4%,Sfmbt2在肌肉组织中表达无明显改变。结论:荔枝核灌胃治疗可明显降低db/db小鼠的空腹血糖水平;可改变血清中miRNAs的表达量及肝脏中Sfmbt2的表达量;考虑荔枝核提取物对db/db小鼠的降糖作用可能与miRNAs及Sfmbt2参与的机制有关。
- 张婷郭景阳乔敏敏杨宇陈琳李春梅吕建新
- 关键词：荔枝核提取物MIRNAS小鼠
