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湖南省医药卫生科研计划课题(B2009068)
作品数:
3
被引量:11
H指数:3
相关作者:
黄畅宇
戴爱国
胡瑞成
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黄畅宇
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戴爱国
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2篇
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锌指Krüppel样转录因子2对慢性阻塞性肺疾病支气管上皮细胞中γ谷氨酰半胱氨酸合成酶的作用
被引量:6
2017年
目的探讨锌指Krüppel样转录因子2(KLF2)对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)支气管上皮细胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的调控作用。方法(1)临床试验:收集湖南省肿瘤医院胸外科2008年12月—2009年12月肺癌伴或不伴慢阻肺肺叶切除患者临床肺组织标本,分为慢阻肺组和对照组,应用原位杂交及免疫组化检测两组患者肺组织中KLF2、γ-GCS mRNA及蛋白的表达情况;并对KLF2 mRNA及蛋白与γ-GCS mRNA及蛋白,KLF2及γ-GCS蛋白与吸烟指数、第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比(FEV1 %)、FEV1与用力肺活量(FVC)的比值(FEV1 /FVC)进行相关分析。(2)动物实验:提取大鼠原代支气管上皮细胞,加入10%烟草烟雾提取物(TSE)培养6 h后,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞谷胱甘肽(GSH)含量;将KLF2的特异性抑制剂用脂质体转染至细胞中抑制KLF2蛋白表达;再分为KB组(不予任何处理的空白对照组)、KB+TSE组(加入TSE处理)、NC组(转染miRNA的对照组)、NC+TSE组(miRNA转染和TSE处理)、92a组(转染KLF2抑制剂)、92a+TSE组(KLF2抑制剂转染和TSE处理),用逆转录-PCR、Western印迹法观察各组细胞中KLF2、γ-GCS的mRNA及蛋白质表达变化。结果(1)临床试验:慢阻肺组肺组织中KLF2mRNA、蛋白和γ-GCS mRNA、蛋白呈强阳性表达,均显著高于对照组(0.32±0.04比0.19±0.03、0.35±0.05比0.22±0.03和0.28±0.03比0.16±0.03、0.31±0.05比0.21±0.03,均P〈0.01),且两者表达部位一致;KLF2蛋白与γ-GCS mRNA及蛋白表达均呈正相关(r=0.705、0.722,均P〈0.01),KLF2及γ-GCS蛋白与吸烟指数、FEV1 %、FEV1/FVC均呈正相关(r=0.552、0.728、0.670及r=0.631、0.727、0.657,均P〈0.01)。(2)动物实验:大鼠支气管上皮细胞中GSH含量KB+TSE组显著高于KB组[(28.05±2.04)比(7.27±0.33) nmol/mg,P〈0.01]; KLF2 mR
李洁
戴爱国
黄畅宇
胡瑞成
关键词:
慢性阻塞性
支气管
上皮细胞
转录因子Klf2和Nrf2/Bach1调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在气道上皮细胞中的作用
被引量:3
2012年
目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2(Klf2)及红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在经香烟烟雾提取物(CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的调控作用。方法采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞,并用10%CSE干预细胞6 h,收集细胞,双酶法检测γ-GCS活性;通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位;采用Western blot和RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。结果大鼠气管-支气管上皮细胞经CSE诱导后其γ-GCS活性明显增高。免疫细胞化学结果显示Nrf2经CSE刺激后出现由核外向核内的转位,Bach1经CSE刺激后出现由核内向核外的转位。Western blot结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白水平较对照组显著升高(P<0.05);RT-PCR结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA水平较对照组显著升高(P<0.05)。直线相关分析表明γ-GCS蛋白表达与Klf2、Nrf2、Bach1呈正相关(P<0.05)。结论 CSE可能通过转录因子Klf2、Nrf2、Bach1调节γ-GCS的表达。
黄畅宇
戴爱国
关键词:
香烟烟雾提取物
Γ-谷氨酰半胱氨酸合酶
香烟烟雾对细胞生物学功能的影响
被引量:3
2012年
香烟烟雾中含有大量的化学有毒物质,其颗粒物和挥发性有机物可不同程度地造成炎症的产生、细胞毒性增加、染色体损伤和DNA链断裂,从而引起慢性阻塞性肺疾病、肺癌等疾病的发牛。氧化应激机制是目前研究的热点。本文主要从吸烟与呼吸系统疾病、香烟烟雾对细胞的损伤机制、香烟烟雾对气道上皮细胞的作用三大方面对香烟烟雾对细胞生物学功能的影响进行综述,有助于呼吸道疾病的诊断和治疗。
黄畅宇
戴爱国
关键词:
细胞
氧化应激
生物学功能
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