国家自然科学基金(81260161)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：段莉王东江谭包生贺鹏梁宇杰更多>>
- 相关机构：深圳市第二人民医院天津市第二医院首都医科大学附属北京口腔医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制miR-140腺相关病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的构建一种抑制microRNA-140(miR-140)表达的腺相关病毒(AAV)载体系统,从而实现对细胞内miR-140表达水平的高效抑制。方法应用分子生物学方法将腺相关病毒载体与miRNA诱饵microRNA tough decoy RNAs(Tu D)相结合,构建p AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒;用脂质体转染法将p AAVU6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒和p AAV-RC、p AAV-Helper质粒共转染至AAV-293细胞中,包装生成携带miR-140-Tu D的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP。进一步将病毒感染骨肉瘤细胞U2OS,定量RT-PCR检测miR-140-Tu D对细胞内miR-140基因的沉默效果,并测定病毒的感染滴度。结果DNA测序证明miR-140-Tu D已成功构建到表达质粒p AAV-U6-MCS-EGFP中;AAV-293细胞表达绿色荧光蛋白提示共转染成功;r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染滴度约为4.1×1010·m L-1;包装的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染U2OS细胞后,能显著下调U2OS细胞miR-140基因的表达水平。结论携带miR-140-Tu D重组腺相关病毒的包装成功,该病毒具有稳定沉默miR-140基因从而降低其表达水平的功能。
- 贺鹏段莉梁宇杰
- 关键词：腺相关病毒TOUGHDECOY骨肉瘤细胞
- 低氧条件下HIF调控破骨细胞分化的分子机制研究进展被引量：3
- 2016年
- 本文通过低氧引发破骨前体细胞内部信号通路网络,表明骨吸收的部位的局部低氧环境可增强破骨细胞活性,提高其骨吸收功能。目前,低氧促进破骨细胞分化与功能的分子机制尚不明确,因此,为深入研究低氧引发破骨前体细胞内部信号通路网络,探讨低氧诱导因子促进破骨细胞分化及骨吸收的分子机制。
- 王东江段莉谭包生
- 关键词：低氧低氧诱导因子破骨细胞骨吸收
