国家教育部博士点基金(20100131120071)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- MALDI和ESI质谱鉴定肿瘤相关糖蛋白的N-糖链结构
- 2014年
- N-糖基化是一种与疾病密切相关的蛋白翻译后修饰。为了建立糖蛋白的N-糖链结构分析方法,以唾液酸糖肽(SGP)为模式分子进行方法优化,再以人绒毛膜促性腺激素(hCG)为对象,经变性处理后用PNGase F酶解释放N-糖链,将酶解液用多孔石墨化碳小柱进行固相萃取,经纯化富集得到N-糖链后,再分别采用基质辅助激光解吸电离(matrix-assisted laser description ionization,MALDI)和电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)两种方式对hCG的N-糖链进行结构分析。结果表明,经过质谱分析共鉴定到17种N-糖链,其中二天线的7种,三天线的5种,四天线的5种。在众多糖型中二天线糖链含量最多。MALDIMS主要得到单电荷峰,ESI-MS以带2个电荷的为主。利用MALDI-MS和ESI-MS技术可快速分析蛋白的N-糖链的结构,为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持。
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- 关键词:N-糖基化基质辅助激光解吸电离电喷雾电离