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厦门市科技计划项目(3502220134011)

作品数:2 被引量:16H指数:2
相关作者:罗琪黄正接张传凯徐毅李文鹏更多>>
相关机构:厦门大学福建医科大学更多>>
发文基金:厦门市科技计划项目福建省医学创新课题福建省科技计划重点项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇氮杂
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺癌
  • 1篇乳腺癌干细胞
  • 1篇启动子
  • 1篇去甲基化
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤干细胞
  • 1篇脱氧
  • 1篇脱氧胞嘧啶
  • 1篇细胞
  • 1篇腺癌
  • 1篇甲基化
  • 1篇甲基化状态
  • 1篇干细胞
  • 1篇癌干细胞
  • 1篇胞嘧啶
  • 1篇OCT4
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇MDA

机构

  • 2篇厦门大学
  • 1篇福建医科大学

作者

  • 2篇黄正接
  • 2篇罗琪
  • 1篇魏斌
  • 1篇陈跃达
  • 1篇罗维远
  • 1篇李文鹏
  • 1篇徐毅
  • 1篇张传凯
  • 1篇刘刚

传媒

  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华医学杂志

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2015
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
下调Oct4基因表达对MDA—MB-231乳腺癌干细胞生物学特性的影响被引量:10
2015年
目的探讨下调转录因子Oct4表达水平对MDA-MB-231乳腺癌干细胞生物学特性的影响及其意义。方法应用无血清悬浮培养法从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离富集乳腺癌干细胞,流式细胞术检测CD44^+/CD24^-1/low细胞亚群的比例,小鼠皮下成瘤实验和紫杉醇抑制实验鉴定无血清悬浮培养法获得的MDA—MB-231乳腺癌干细胞,逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测MDA—MB-231乳腺癌干细胞中Oct4的表达情况,并利用小分子RNA干扰片段干扰Oct4的表达,干扰实验设空白对照组(不转染任何siRNA)、阴性对照组(转染对细胞无任何干扰作用的siRNA序列)和Oct4siRNA组(转染对Oct4基因有干扰作用的siRNA序列)。分别利用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell小室法和紫杉醇抑制实验,检测干扰Oct4表达后MDA—MB-231乳腺癌干细胞的增殖能力、侵袭能力和对化疗药物的耐药性。结果MDA—MB-231乳腺癌于细胞以悬浮球的形式生长扩增,MDA—MB-231乳腺癌干细胞CD44^+/CD24^-/low细胞亚群的比例(92.7%)高于MDA—MB-231乳腺癌细胞(76.6%,P〈0.05)。接种0.2×10^7个/ml细胞数,MDA—MB-231乳腺癌干细胞肿瘤体积为(124.60±13.65)mm^3,大于MDA-MB-231乳腺癌细胞形成的肿瘤体积[(68.20±9.99)mm^3,P〈0.01)]。紫杉醇对MDA-MB-231乳腺癌干细胞的半数抑制浓度(IC50)为(8.20±0.34)μg/ml,高于MDA—MB-231乳腺癌细胞[(4.40±0.48)μg/ml,P〈0.01)]。MDA-MB-231乳腺癌干细胞Oct4的表达水平高于乳腺癌细胞(P〈0.05)。下调Oct4蛋白的表达后,Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌干细胞从第3天开始其增殖能力低于空白对照组和阴性对照组(均P〈0.05)。侵袭性实验结果显示,转染72h后,与空白对照组和阴性对照组比较,Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌于细胞穿膜数量为(46.52±2.58)个,少于空白对照组[(77.29±
李文鹏罗维远徐毅丁伟基陈跃达张传凯罗琪黄正接
关键词:肿瘤干细胞RNA干扰
BGC-823人胃癌细胞株SOX2基因的甲基化状态及其去甲基化的意义被引量:6
2016年
目的观察BGC-823人胃癌细胞株中性别决定相关基因簇2(SOX2)启动子的甲基化状态,探讨SOX2基因去甲基化后对BGC-823细胞的生长和侵袭能力的影响。方法通过甲基化特异性PCR法(MSP)检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶(5-Aza—CdR)对BGC-823细胞SOX2启动子甲基化状态的影响,实时荧光定量PCR及蛋白印迹法检测经不同浓度5-Aza—CdR作用前后BGC-823细胞中SOX2的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测存活率,Transwell小室法和划痕实验检测侵袭及转移能力变化。建立裸鼠BGC-823胃癌移植瘤模型,40只移植瘤小鼠平均分为2组,腹腔分别注射磷酸缓冲液(PBS)、5-Aza—CdR,通过免疫组化、蛋白质印迹法检测5-Aza—CdR的抑瘤效果。结果5-Aza—CdR逆转了BGC-823细胞SOX2的甲基化状态,SOX2mRNA表达恢复,且恢复表达程度与5-Aza—CdR药物浓度呈正比。BGC-823细胞SOX2mRNA和蛋白的相对表达量低于正常胃黏膜GES.1细胞[(22.80±0.36)和(0.49±0.01)比(20.36±0.45)和(0.91±0.28),均P〈0.05],经系列浓度(0、1、10μmol/L)5-Aza.CdR处理后BGC-823细胞SOX2mRNA和蛋白的相对表达量相比差异均有统计学意义[(22.99±0.42)和(0.65±0.19)比(21.78±0.41)和(0.73±0.13)比(20.51±0.47)和(0.83±0.14),均P〈0.05]。经不同浓度(1、10、20μmol/L)处理后,BGC-823细胞的增殖速度明显减慢,与浓度为0μmol/L的对照组比较,各处理组细胞存活率差异有统计学意义(P〈0.05),且迁移、侵袭能力减弱(均P〈0.05)。裸鼠移植瘤结果显示:5-Aza—CdR组的最终肿瘤体积、最终瘤重较小[(286.6±37.5)mm^3和(325.2±32.2)mg比(540.7±42.6)mm^3和(694.7±36.1)mg,P〈0.05],生存期较长[(22.5±1.0)比(18.7-4-1.6)d,P〈0.05],SOX2蛋白表达量高[(0.96±0
魏斌刘刚蔡桦立李庚鹏黄河庆罗琪黄正接
关键词:去甲基化
共1页<1>
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