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高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金(200358)
高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金(200358)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:焦新安潘志明孙林杨振泉于恒秀更多>>
- 相关机构:扬州大学中华人民共和国农业部上海市畜牧兽医站更多>>
- 发文基金:高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性被引量:3
- 2005年
- 利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。以新城疫病毒融合蛋白(NDVF)基因1.7kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子组成嵌合基因,构建了适宜于农杆菌介导转化水稻的转化载体pUNDV,经根癌农杆菌介导的遗传转化方法将由Ubi启动子驱动的NDVF嵌合基因导入水稻细胞中,经潮霉素抗性筛选,共再生获得了6个独立的转基因株系。PCR分析结果表明NDVF基因已整合到水稻基因组中。ELISA和Westernblot分析结果证实NDVF蛋白在部分转基因水稻叶片组织中获得表达,其中植株F5叶片组织中具有较高的表达水平。将F5叶片可溶性总蛋白皮下注射免疫BALB/c小鼠,结果表明能够诱导小鼠产生一定水平的NDVF蛋白特异抗体。
- 杨振泉刘巧泉于恒秀潘志明焦新安
- 关键词:新城疫病毒F基因转基因水稻免疫
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制被引量:2
- 2009年
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。Westernblot鉴定mAb的特异性,并用mAb亚类试剂盒鉴定mAb亚类。结果:共获得5株稳定分泌抗TetC的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5、5G10、6B9、7D6、7F5,其腹水效价除1E5为3×210外,其余均为1×105,亚类鉴定结果均为IgG1。West-ernblot分析结果显示,5株mAb均与融合蛋白His-TetC发生特异性反应。结论:成功制备了抗TetC的mAb,为进一步研究TetC的生物学功能、破伤风毒素结构与功能的关系以及建立快速检测破伤风抗毒素水平的方法奠定了基础。
- 单艳菊潘志明程宁宁张成全孙林焦新安
- 关键词:单克隆抗体
- 抗禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制
- 2007年
- 目的:研制禽流感病毒H7亚型血凝素特异性单克隆抗体(mAb)。方法:以H7亚型禽流感诊断抗原为免疫原免疫6~8周雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14进行融合。通过HA和HI试验筛选阳性克隆。应用HI试验和Western blot试验测定mAb的反应性和特异性。结果:共获得4株分泌抗AIVH7亚型HAmAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为2E2、2A4、5F5、7G5。这些mAb的腹水HI效价在5×27~5×211之间,其中2E2属于IgM亚类,2A4属于IgG1亚类,5F5、7G5属于IgG2a亚类。Western blot分析结果显示,4株AIVH7亚型HAmAb能与AIVH7蛋白在Mr75000处反应,但不与新城疫病毒(NDV)蛋白发生反应,表明这些mAb能特异性识别AIVH7亚型HA。mAbHI反应性测定结果表明:4株mAb中,2E2、5F5、7G5只与H7亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、传染性支气管炎病毒(IBV)反应,显示出良好的特异性;而2A4除了与H7亚型AIV反应外,还与H15N8标准株发生低水平交叉反应。结论:这些mAb不仅为H7亚型AIV的HA结构分析提供了工具,而且为建立快速廉价的H7亚型禽流感诊断方法提供了核心试剂。
- 李玉君焦新安潘志明孙林王传彬张苏华孙泉云刘秀梵
- 关键词:禽流感病毒H7亚型血凝素单克隆抗体
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠。末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克...
- 单艳菊潘志明张成全孙林焦新安
- 关键词:单克隆抗体
- 文献传递
- 新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性
- 利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。本研究以新城疫病毒融合蛋白(NDVF)基因1.7 kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终...
- 杨振泉刘巧泉于恒秀潘志明焦新安
- 关键词:新城疫病毒F基因转基因水稻免疫
- 文献传递