重庆市自然科学基金(2009BB1307) 作品数:10 被引量:62 H指数:4 相关作者: 宋明 汤青林 王志敏 任雪松 孙梓健 更多>> 相关机构: 西南大学 重庆市农业科学院 更多>> 发文基金: 重庆市自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
芥菜开花信号整合子的两个核心转录因子FLC和SVP相互作用的体外检测 被引量:21 2011年 为了深入研究调控芥菜开花信号整合子的两个核心转录因子Flowering Locus C(FLC)和SHOTR VEGETATIVE PHASE(SVP)的作用机理和进行人工调控,以芥菜‘QJ’为材料,采用RT-PCR技术分别扩增FLC和SVP的编码序列,构建原核表达质粒pET43.1a-FLC、pET43.1a-SVP,转化宿主菌大肠杆菌BL21,通过SDS-PAGE检测该蛋白的表达。利用免疫共沉淀原理及pET43.1a-FLC、pET43.1a-SVP融合蛋白序列中的6×His标签能与Ni+结合的特点,对芥菜FLC与SVP的相互作用进行SDS-PAGE检测。结果表明:FLC与SVP能在体外相互作用并形成复合体,为深入分析FLC与SVP间的作用机理以及探讨其与下游开花信号整合子元件的相互作用提供了理论和技术基础。 汤青林 许俊强 宋明 王志敏关键词:芥菜 FLC SVP 相互作用 叶用芥菜细胞悬浮培养的研究 2010年 以叶用芥菜的子叶为外植体,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系进行了研究.结果表明,愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D,愈伤组织最佳增殖培养基为MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养2~10d达对数生长期.将小细胞团接种于MS+1.0mg/LNAA+3.0mg/L6-BA分化培养基上,继代两次后,分化出芽,分化芽在培养基MS+0.1mg/LNAA上诱导生根,形成小植株. 蒋波 王志敏 汤青林 宋明 宋波关键词:叶用芥菜 愈伤组织 植株再生 人工老化芥菜种子基因组DNA的ISSR标记 被引量:4 2010年 应用ISSR分子标记对人工老化的芥菜种子进行DNA损伤程度的分析,从18条ISSR引物中选出6条适用于老化芥菜种子的研究分析,并发现人工老化处理的芥菜种子随着老化时间的延长,ISSR扩增出的条带减少、颜色变浅甚至消失,表明在种子贮藏中,随着老化程度的加剧,DNA破损是影响种质资源保存的因素之一。 宋明 王鹤冰 孙梓健 王志敏 汤青林 张生关键词:芥菜 DNA ISSR 环境胁迫下大头芥花青素积累及其相关结构基因的表达 被引量:10 2012年 以大头芥(红叶大头芥)为试材,研究模拟干旱、低温和强光等环境胁迫下红叶大头芥中花青素含量及其与花青素合成途径中CHI、DFR和ANS等结构基因表达的关系。首先通过同源克隆法在红叶大头芥中克隆了CHI、DFR和ANS基因,其开放阅读框分别为759、1157、1004bp,分别编码253、385、334个氨基酸。实时荧光定量RT-PCR结果表明,在环境胁迫下,红叶大头芥中花青素的积累和结构基因的大量表达需要一定处理时间的诱导。CHI基因在强光、低温和模拟干旱胁迫下的表达量无明显变化,且表达量极低;而DFR和ANS基因在低温、强光胁迫下的转录表达量随胁迫时间的延长而增加,对红叶大头芥中花青素的合成起到了重要的调控作用,且强光胁迫下DFR和ANS的表达量约为低温胁迫的两倍,推测低温和强光胁迫可能诱导了红叶大头芥中花青素合成途径不同的调控机制。 宋明 孙梓健 汤青林 王志敏 任雪松关键词:环境胁迫 花青素 基因表达 低温春化和GA3处理后芥菜发育的生化变化 被引量:2 2009年 在宽柄芥两叶一心时,分别以4℃低温春化处理30d和500mg/LGA3处理16d后,在人工气候箱中再培养(20℃、16h光照/18℃、8h黑暗).在培养过程中每隔2d分别取材,共取5次,测定芥菜可溶性糖、可溶性蛋白含量、SOD、POD活性等.结果表明:芥菜在低温春化与GA3处理后,可溶性糖和蛋白质含量均呈先增后减,POD均先减后增,SOD活性变化均无规律.相关性分析表明:两种处理后芥菜POD与可溶性糖均呈正相关,相关系数分别为0.861、0.814;POD与可溶性蛋白均呈负相关,相关系数分别为-0.613、-0.587;可溶性蛋白与可溶性糖均呈正相关,相关系数分别为0.573、0.613;SOD与其他指标间相关性均不显著. 宋明 汤青林 王志敏 张敏 刘婷 任雪松关键词:芥菜 春化 GA3 生化变化 甘蓝LFY基因的克隆及序列分析 被引量:3 2011年 以甘蓝ZQ启动抽薹的茎尖为材料,分别提取DNA和RNA,以两对引物扩增并序列拼接得到甘蓝LFYZQ基因DNA序列和cDNA完整编码区,长度分别为2560、1239bp,与花椰菜、拟南芥、芥菜和萝卜同源性分别达到91%、87%、86%、87%。该基因含有3个外显子(452、394、393bp)和2个内含子(514、807bp),共编码412个氨基酸,内含子剪接位点均符合经典GT-AG法则。将LFYZQ与网上公布的12种十字花科植物LFY氨基酸序列按分子进化分成两类:甘蓝LFYZQ与花椰菜以及Jonopsidium属植物Jonopsidium acaule这3个分为一类;其余10种植物分为第二大类。LFYZQ蛋白分子量为46kD,是一个不稳定的疏水蛋白,存在N-十四(烷)酰化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、酰胺化位点共4种活性位点。 汤青林 王志敏 任雪松 宋明 王小佳关键词:甘蓝 LFY 花椰菜游离小孢子培养研究进展 2011年 分析了影响花椰菜游离小孢子培养的主要因素(材料基因型、小孢子发育时期、预处理和预培养、培养基成分、培养技术),并对胚状体发生与植株再生、DH纯系获得等的研究情况进行了阐述,展望了游离小孢子培养技术发展前景。 李念祖 汤青林 王志敏 宋明关键词:花椰菜 游离小孢子 蔬菜抽薹的遗传规律及机理研究 被引量:9 2011年 综述了蔬菜作物抽薹特性的遗传规律、鉴定方法、生化基础以及分子机理等方面内容,并对蔬菜作物抽薹特性的未来研究方向进行了展望。 许俊强 汤青林 宋明 王志敏关键词:蔬菜 抽薹 浅析芸薹属作物抽薹性状的遗传规律及调控途径研究现状 被引量:2 2010年 从芸薹属作物分子标记研究入手,综述芸薹属作物抽薹相关基因的最新研究进展,指出在整个芸薹属中通过其与双子叶模式植物拟南芥的共线性,从相关基因群的遗传演变角度对相关基因进行统一性研究还明显不足。 周贤达 汤青林 王志敏 宋明关键词:芸薹属作物 抽薹 红叶芥低温胁迫下苯丙氨酸解氨酶活性及其基因的克隆表达 被引量:11 2010年 用8℃低温处理红叶芥四叶期植株,在低温处理的52 h内分别取样6次,取样后分别提取叶片总RNA,再利用RT-PCR克隆得到红叶芥PAL基因开放阅读框内1 908 bp片段,核苷酸序列分析显示,红叶芥PAL基因与芜青PAL基因的同源性达到99%.半定量RT-PCR结果显示,在8℃低温胁迫下,红叶芥PAL基因表达量呈现先降低后升高的趋势,在处理18 h后达到最低点,随后迅速升高,这与PAL活性变化一致. 孙梓健 汤青林 宋明 任雪松关键词:低温胁迫 花青素