国家自然科学基金(30200367)
- 作品数：17 被引量：60H指数：5
- 相关作者：张永祥周文霞程肖蕊蒋宁董雷更多>>
- 相关机构：军事医学科学院中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 快速老化小鼠海马差异表达cDNA芯片的制作
- 2006年
- 老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)是老年人群中最普遍的痴呆类型,是一种神经退行性紊乱疾病,目前临床上还没有有效的治疗方法。快速老化小鼠亚系P8(senescence-accelerated mouse prone8,SAMP8)是研究增龄相关性认知缺陷机制以及研究脑老化机制的良好动物,同时也是研究AD较为理想的实验动物模型之一。cDNA芯片技术可以同时规模研究成千上万个基因的表达,尤其适于AD这种多机制、多靶标、多途径的复杂疾病的研究,为了揭示AD的发病机制,发现用于治疗AD的药物靶标,以SAMP8和SAMR1海马抑制消减cDNA文库中的cDNA片段为材料,以β-actin和G3PDH为内参,设计了16×(1×14)点阵方案,并点制了含有3136个点的SAM海马差异表达cDNA芯片。芯片背景均匀一致,点的大小均一,排列规则整齐。在靶分子与探针杂交过程中,进行了杂交条件和洗涤芯片的优化。将杂交结果进行统计分析,选择差异表达的cDNA进行测序并进行生物信息学分析,用实时定量RT-PCR对部分基因的表达进行了验证,检测了芯片筛选结果的可靠性。该芯片的成功制备为进一步进行差异表达基因的筛选和研究提供了良好的手段,并将成为揭示SAMP8脑老化和AD发病机制的有力手段。
- 程肖蕊周文霞张永祥
- 黄连解毒汤对快速老化小鼠海马基因表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:研究黄连解毒汤(HL)对快速老化小鼠亚系SAMP8海马差异表达基因的影响,揭示HL改善认知功能障碍的分子机制。方法:应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达cDNA芯片,比较了SAMP8和SAMR1、石杉碱甲处理的SAMP8和SAMP8对照,以及HL处理的SAMP8和SAMP8对照的基因表达谱,并对HL的药物反应基因进行了比较;采用实时荧光定量PCR技术对芯片结果进行了验证。结果:给予SAMP8 HL后,对SAMP8海马基因表达具有明显的调节作用。差异表达基因包括信号转导基因Dusp12、Rps6ka1、Penk1、Nope,Leng8,蛋白质代谢相关基因Ttc3、Amfr、Prr6、Ube2d2,核酸代谢基因Fhit、Itm2c、Cstf2t、Ddx3x、Ercc5、Pcgfr6,能量代谢基因Stub1,免疫反应相关基因C1qb,转录调节基因D1ertd161e、Gcn5l2、Ssu72,细胞生长相关基因Ngrn、Anln,递质转运相关基因Slc17a7,以及功能未知基因12个。结论:提示HL对于认知功能的改善可能是通过调节信号转导、突触传递、蛋白质和能量代谢、细胞增殖分化等途径发挥作用的;研究中发现的HL作用基因可能是改善学习记忆的潜在靶标。
- 郑越程肖蕊周文霞张永祥
- 关键词：黄连解毒汤快速老化小鼠芯片筛选
- 离子对萃取和高效液相色谱-电化学检测法测定血浆中儿茶酚胺被引量：5
- 2004年
- 目的 :建立简便、灵敏的测定血浆儿茶酚胺的方法。方法 :利用离子对萃取法提取血浆中的儿茶酚胺 ,用高效液相色谱 电化学检测法 (HPLC ECD)进行检测 ,测定其回收率、线性范围、精密度及最低检测限 ,并测定和比较了大鼠和小鼠血浆中儿茶酚胺浓度。结果 :肾上腺素 (E)、去甲肾上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)的加样回收率分别为(10 3.2± 4 .9) % ,(10 6 .1± 6 .3) %和 (10 1.1± 9.0 ) %。日内和日间精密度分别小于 14 .4 %和 11.6 %。该方法测定E和NE在 0 .5～ 16ng范围内 ,DA在 0 .2 5～ 8ng范围内含量与峰高比之间呈良好的线性关系 ,相关系数为 0 .9980～0 .9999,最低检测限分别为 :E 0 .2 5ng ,NE 0 .30ng,DA 0 .2 0ng。大鼠血浆中E浓度明显高于小鼠 ,NE和DA浓度无明显差异。结论 :本法用于检测血浆中儿茶酚胺水平具有简便、灵敏、快速、准确的特点 ,适合于小动物血浆中儿茶酚胺浓度的测定。
- 陆春苓周文霞程军平张永祥
- 关键词：离子对高效液相色谱儿茶酚胺类血浆
- 血浆蛋白质组学的研究进展被引量：1
- 2004年
- 血浆是取材容易、应用广泛的研究样品 ,其蛋白水平变化与多种疾病有关。在所有组织的蛋白质中 ,血浆蛋白质与其mRNA水平相差最远 ,因此血浆是一个只能用蛋白质方法进行研究的生物系统。但是血浆蛋白数量多、来源广泛、蛋白含量差别大 (相差 10个数量级 )等特点限制了血浆蛋白质组研究 ,因此研究者从样品预处理、亚蛋白质组研究和质谱鉴定多个环节尝试突破上述瓶颈 ,进行血浆蛋白质组研究 ,并广泛应用于肿瘤、肾炎等多种疾病的研究中 ,对阐述疾病病理生理学机制、疾病早期诊断、药物效应和不良反应监测具有重要意义。
- 郭淑杰周文霞张永祥
- 关键词：血浆蛋白质组药理学
- 基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究进展被引量：7
- 2003年
- 目前 ,蛋白质组技术被大量应用于临床和生物学研究各个领域 ,其中的大部分研究都在双向电泳技术的支持下展开。体液样品 (包括血浆、脑脊液、尿液等 )蛋白质的全面分析主要依赖于蛋白质组学分析。本文综述了基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究中样品制备、生物标志物探索。
- 周育斌周文霞张永祥
- 关键词：蛋白质组学体液生物学标记
- 学习和记忆相关基因:Calsyntenins家族被引量：6
- 2006年
- Calsyntenins(Cstn)是一个独特的将胞外蛋白水解活性与胞内Ca2+信号转导相连在一起的家族,属于钙结合蛋白,与钙离子结合,参与信号转导和细胞交流。它包括3个成员,分别为calsyn-tenin-1、calsyntenin-2和calsyntenin-3,皆为突触后膜蛋白,主要在脑的神经元中表达,但表达模式各自不同,而且其蛋白也表现出高度的结构多样性。Calsyntenin-1位于中枢神经系统(CNS)突触后膜,是一个突触后膜蛋白水解的蛋白质。有一个结合钙的胞质酸性结构域,是一个通过胞外蛋白水解来调节突触后钙的动力调节子。Calsyntenin-1调节突触后膜下或胞内Ca2+储存库中的Ca2+瞬变,从而参与长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD),与学习和记忆功能紧密相关。尤其是最近研究发现,β淀粉样蛋白前体(APP)和calsyntenins共同作用增加了β淀粉样蛋白(Aβ)的分泌,从而造成神经系统紊乱,促进阿尔采末病(AD)的发生,这对于AD发病机制的揭示和开发新一代治疗AD的药物具有重要的意义。
- 程肖蕊周文霞张永祥
- 关键词：钙结合蛋白Β淀粉样蛋白
- 药物蛋白质组学研究进展被引量：4
- 2005年
- 药物蛋白质组学是基因组和药物发现之间的桥梁,目前已广泛应用于临床和生物医学的各个领域。其研究内容在临床前包括:构建分子药理筛选模型、筛选药物作用靶点、研究药物作用机制和毒理机制等;临床研究包括:利用疾病特异性蛋白质作为疾病分类分型和诊断的标志,还用于评价疗效和预测疾病的预后和转归等。
- 蒋宁周文霞张永祥
- 关键词：药物作用靶点药物作用机制
- 快速老化模型小鼠血清蛋白质组学分析比较被引量：2
- 2006年
- 以6月及12月龄SAMP 8及同龄SAMR 1为研究对象,应用双向凝胶电泳法,分析比较了快速老化模型小鼠(Senescence accelerated m ice,SAM)的快速老化亚系SAMP 8及抗快速老化亚系SAMR 1血清蛋白表达的差异.与同龄SAMR 1比较,6月龄SAMP 8血清中有15个蛋白点表达显著上调,3个蛋白点表达显著下调,7个蛋白点只在SAMP 8中有表达;12月龄SAMP 8血清中有9个蛋白点表达显著上调,7个蛋白点表达显著下调,12个蛋白点只在SAMP 8中有表达.应用质谱进行肽质量指纹图谱分析和数据库检索共鉴定了19种蛋白质.其中6个蛋白只在6月龄SAMP 8中表达,4个蛋白只在12月龄SAMP 8中表达.此外,在6月龄及12月龄SAMP 8血清差异蛋白中,存在9个共同的差异蛋白,按照功能可分为4类:(1)免疫相关蛋白;(2)老化相关蛋白;(3)糖代谢及神经元凋亡相关蛋白;(4)其它蛋白.上述研究结果显示,SAMP 8和SAMR 1血清蛋白表达存在明显差异,其中一些差异蛋白可能是SAMP 8老化进程中相关病理生理变化的重要原因.
- 蒋宁周文霞张永祥张学敏王杰刘炳玉
- 关键词：快速老化模型小鼠血清蛋白质组双向凝胶电泳
- Eph家族蛋白研究进展被引量：6
- 2006年
- Eph家族蛋白包括Eph受体和Ephrin配体,是蛋白酪氨酸激酶家族中的最大成员。由于其具有独特的受体-配体复合物的结构特点及其受体与配体间特有的相互作用模式,所以它们极有可能成为疾病治疗的药物靶标,故该蛋白家族的相关领域研究日益受到重视。该文首先从Eph家族蛋白的分类、表达特点、结构和受体-配体相互作用特点以及其在神经系统中的功能等几个方面简要综述了其相关领域的最新研究进展,进而从结构、作用模式、功能几方面对Eph家族蛋白在神经系统疾患防治中的潜在价值和未来的研究方向进行了探讨和展望。
- 张癸荣程肖蕊周文霞张永祥
- 关键词：EPH受体
- 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ在Alzheimer病发病及防治中的作用被引量：5
- 2005年
- 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)广泛分布于中枢神经系统内,参与调节神经递质的合成释放、信号转导和突触可塑性的形成以及磷酸化蛋白等。本文综述了CaMKⅡ的生化特性及其在阿尔茨海默病(AD)发病及防治中的作用,并初步探讨了CaMKⅡ作为AD防治药物新靶点的研究思路。
- 舒蕾周文霞张永祥
- 关键词：阿尔茨海默病学习记忆突触可塑性
