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国家高技术研究发展计划(2007AA091905): 作品数：29 被引量：121H指数：6; 相关作者：林学政沈继红何培青王能飞李江更多>>; 相关机构：国家海洋局第一海洋研究所山东轻工业学院青岛科技大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>

南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质发酵条件的优化被引量：2: 2011年; [目的]优化南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质的发酵条件。[方法]通过单因素和正交试验对南极适冷菌R.sp.97产抗菌活性物质的发酵培养基进行了优化,并通过单因素试验对其发酵条件进行了优化。[结果]菌株R.sp.97产抗菌活性物质的最佳培养基为:蛋白胨3.0g/L,硫酸铵1.0g/L,淀粉2.0g/L,NaCl15.0g/L;最佳发酵条件为:发酵培养基初始pH8,发酵温度10℃,摇瓶装液量30.0%(V/V),接种量1.0%(V/V)。优化后菌株R.sp.97发酵液的抗菌活性较优化前提高了22.2%。[结论]为研究南极适冷菌R.sp.97的活性物质奠定了基础。; 李贺林学政刘同军; 关键词：抗菌活性发酵条件

分子伴侣共表达对低温脂肪酶Lip-837异源可溶性表达的影响被引量：7: 2011年; 将南极嗜冷菌Moritellasp.2-5-10-1的低温脂肪酶基因Lip-837克隆到表达载体pColdⅢ中,成功构建了重组质粒pColdⅢ+Lip-837,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。SDS-PAGE实验结果表明,实现了该基因在E.coli的异源表达,且其表达量达到细胞总蛋白的39%;但表达产物主要以包涵体形式存在。将该重组质粒pColdⅢ+Lip-837分别与不同分子伴侣质粒,如pGro7,pKJE7,pG-Tf2,pTf16在E.coli BL21(DE3)中实现了共表达。SDS-PAGE结果表明,4种分子伴侣均能明显提高目的蛋白—脂肪酶Lip-837的可溶性表达,但不同分子伴侣提高可溶性蛋白表达的程度有所不同,如仅表达pColdⅢ+Lip-837时,低温脂肪酶可溶性蛋白占总表达量的比例为5%;当与分子伴侣pGro7共表达时,对脂肪酶可溶性蛋白表达提高的比例最大,其可溶性酶蛋白的比例可占总表达量的42%;分子伴侣质粒pG-Tf2促进可溶性表达的效果较差,其可溶性酶蛋白的比例仅占其总表达量的16.6%。; 崔硕硕张镱林学政沈继红; 关键词：低温脂肪酶分子伴侣共表达可溶性表达

共轭亚油酸对血管内皮细胞的保护作用被引量：6: 2009年; 目的探讨多不饱和脂肪酸共轭亚油酸(CLA)对血管内皮细胞(VEC)的保护作用。方法应用MTT比色法测定CLA对血管内皮细胞存活率的影响;用绿色荧光蛋白标记的膜联蛋白/碘化丙啶双染色法检测细胞凋亡和死亡。结果CLA 2μmol·L-1处理细胞72h,细胞存活率为126.3%;在浓度小于5μmol·L-1时呈剂量和时间性依赖。CLA能部分阻断软脂酸(PA)和硬脂酸(SA)诱导的VEC死亡。结论CLA能部分抵抗饱和脂肪酸PA、SA诱导的血管内皮细胞死亡,对血管内皮细胞的存活率有重要意义。; 衣丹李光友刘发义孙修勤; 关键词：共轭亚油酸血管内皮细胞饱和脂肪酸细胞凋亡

Optimization of Fermentation Medium and Conditions of Antibiotic Active Substances Produced by Antarctic Psychrotrophic Bacterium Rheinheimera sp. 97: 2011年; [Objective] The aim was to optimize the fermentation medium and conditions of antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium Rheinheimera sp.97.[Method] Single-factor experiment and orthogonal test were adopted to optimize the fermentation medium of antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium R.sp.97,while the fermentation conditions were optimized by single-factor experiment.[Result] The optimum fermentation medium for the antibiotic active substances production was as follows：tryptone 3.0 g/L,ammonium sulfate 1.0 g/L,starch 2.0 g/L,NaCl 15.0 g/L.The optimized fermentation conditions were as follows：the starting pH of medium was 8.0,fermentation temperature was 10 ℃,liquid volume in Erlenmeyer flask was 30 %（V/V）and inoculation amount was 1%（V/V）.Under the optimized fermentation medium and conditions,the antibacterial activity of R.sp.97 was increased by 18.1%.[Conclusion] This study had provided basis for the antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium R.sp.97.; 李贺林学政刘同军; 关键词：OPTIMIZATION

南极芽孢杆菌Bacillus sp.107生长特性及抑制植物病原真菌的研究被引量：10: 2011年; 从南极海泥中筛选获得对植物病原真菌有抑制作用的芽孢杆菌Bacillussp.107,以常见植物病原真菌为主要指示菌,测定菌株发酵上清液的抑菌谱;研究温度、NaCl质量分数和初始pH值对其生长和抑菌活性的影响,并测定菌株发酵液对黄瓜白粉病的防治作用。结果表明,芽孢杆菌Bacillussp.107发酵上清液对常见植物病原真菌尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、茄交链孢菌（Alternaria solani）、立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）和辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici）均有抑制作用。产抑菌物质的适宜培养条件：温度为15~30℃,NaCl质量分数为0%~4.5%和初始pH值为5.0~9.0;当NaCl质量分数为3.0%,温度为25℃,初始pH值为7.0时抑菌活性最高。芽孢杆菌Bacillussp.107发酵液的5倍稀释液对黄瓜白粉病的防效达62.05%。该菌株在植物病害的生物防治中,具有潜在的应用价值。; 何培青王红梅沈继红林学政; 关键词：芽孢杆菌抑菌活性植物病原真菌

南极抗细菌活性菌株的筛选及系统发育分析被引量：19: 2011年; 分别以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、青枯假单胞菌、绿脓假单胞菌和苏云金芽孢杆菌为指示菌,采用琼脂扩散法对实验室保存的580株极地细菌进行了抗菌活性菌株的筛选与活性验证,从中筛选出4株对上述指示菌株具有明显抗菌效果的活性菌株,其编号分别为97、Z11、Z18及Z19,并对其生长曲线、抗菌活性曲线和系统发育地位进行研究。结果表明,4株菌均在培养24 h后进入指数生长期,菌株97在培养48 h后达到稳定期,而菌株Z11、Z18及Z19在培养60 h后达到稳定期。抗菌活性分别在培养84、96、72和72 h时达到最高。系统发育分析表明,该4株菌分别属于伦黑墨氏菌属(Rheinheimera)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)和嗜冷杆菌属(Psychrobacter)。; 李贺林学政何培青刘同军; 关键词：抗菌活性系统发育分析

海洋真菌zp6次级代谢产物及其抗真菌活性研究被引量：7: 2012年; 目的对海洋真菌zp6发酵液的乙酸乙酯萃取部分及其抑菌活性进行研究。方法采用硅胶柱色谱及高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及各种光谱技术进行结构鉴定,采用滤纸片法对分离到的化合物进行抑菌活性研究。结果从该菌中分离纯化得到8个化合物:(22E)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(1)、5α,8α-环二氧-24-甲基麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、赤藓糖醇(3)、腺嘌呤核苷(4)、(24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(5)、阿拉伯醇(6)、(7)、4-乙酰氧基苯甲酸(8)。结论化合物1和5具有抗真菌活性。; 高常松钟惠民曹俊伟陈颢; 关键词：海洋真菌代谢产物抗真菌活性

南极细菌胞外多糖溶液冻结特性的差示扫描量热研究被引量：2: 2009年; 采用差示扫描量热法,测定几种南极细菌胞外多糖(简称,EPSs)溶液的结晶、熔融、焓转变以及水合性质等冻结特性,分析了EPSs的浓度和分子量与其抗冻活性的关系。结果表明,在溶液冻结过程中,仅0.25%的Pseudoalteromonas sp.S-15-13EPSs(分子量,6.2×104Da)可抑制冰核形成,溶液冻结温度较纯水的降低(1.07±0.62)℃;溶液的冻结焓降低说明冰核生长变缓,冰晶形成细小,0.125%的Shewanella sp.5-1-11-4EPSs(分子量,1.2×103Da)和Moritellasp.2-5-10-1EPSs(分子量,3.0×103Da)冻结焓分别较纯水的降低17.15%和29.13%,S-15-13EPSs在0.125%～0.5%的范围内可降低冻结焓,0.125%时冻结焓较纯水的低30%,其不冻水含量为(0.292±0.05)g/g。在冰晶熔化过程中,几种EPSs均可降低溶液熔融温度和熔融焓,促进冰晶熔化,使冰晶细小;4.0%的5-1-11-4EPSs、2-5-10-1EPSs和0.5%S-15-13EPSs的熔融温度较纯水的分别降低(2.70±0.15)℃、(2.30±0.39)℃和(4.66±0.42)℃。研究结果阐明EPSs可以通过改变菌体周围水的冻结特性,以抵御冰晶对微生物的损伤,大分子量EPSs对冰晶的抑制作用强于低分子量的。; 何培青李江王昉顾敏芬沈继红; 关键词：胞外多糖差示扫描量热

低温脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达研究被引量：2: 2012年; 将已有的低温脂肪酶基因克隆至表达载体pPICZα上,并转化毕赤酵母X-33。在低温条件下诱导培养6d后,发酵液中可检测到低温脂肪酶活力。重组酵母发酵液加入二硫苏糖醇后单位酶活力达到32U/mL,与未加入该试剂的原始菌株相比提高4倍以上。对重组脂肪酶的酶学性质研究表明,其最适pH为8.0,最适温度为35℃,50℃温浴30min后,仍有30.04%的活性。以不同碳链长度的4-Nitrophenyl Ester为底物检测其底物特异性,结果显示其较适合作用于短链底物。重组酵母能够在BMMY培养基中胞外分泌表达带有His标签的重组脂肪酶,经镍柱纯化后,SDS-PAGE检测可得到大约35kDa的单一蛋白质条带。; 刘羽王能飞黄亦钧林学政沈继红; 关键词：低温脂肪酶重组蛋白毕赤酵母组氨酸标签

南极海冰细菌科尔韦尔氏菌低温适应性的初步研究被引量：2: 2007年; 以南极海冰细菌(Colwellia sp.NJ341)为材料,从蛋白质、酶和脂肪酸等方面对0℃下低温适应性进行初步探讨。结果表明,与15℃相比,0℃下菌株NJ341的生长量和蛋白质含量处于较高值;不饱和脂肪酸C16∶1ω9和C16∶1ω7含量显著增加(P<0.05),而C18∶1显著下降(P<0.05);脂质过氧化的重要参数丙二醛(MDA)含量极显著增加(P<0.01),但在4^-5℃变化幅度不大;谷胱甘肽硫转移酶(GST)活力在8~22℃温度范围内没有检测到,而在4^-5℃范围内其活力极显著增加(P<0.01)。这些重要生理参数的变化将有助于了解低温微生物在接近冰点温度下的适应机制。; 王全富侯艳华缪锦来徐仲阚光锋李光友沈继红

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