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福建省科技计划重点项目(2004Y017)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
黄晓玲
张子力
林京
韩涛
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相关机构:
福建省立医院
广东外语外贸大学
福建医科大学
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发文基金:
福建省科技计划重点项目
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相关领域:
生物学
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转基因
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机构
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福建医科大学
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福建省立医院
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作者
2篇
韩涛
2篇
林京
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张子力
2篇
黄晓玲
传媒
2篇
福建医科大学...
年份
2篇
2006
共
2
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iNOS基因重组逆转录病毒的包装及高滴度病毒液的制备
被引量:1
2006年
目的利用逆转录病毒载体PLXSN介导iNOS基因转染,为逆转录病毒介导的iNOS转基因防治血管移植术后再狭窄的研究奠定实验基础。方法采用QIAGEN plasmid Maxi Kit纯化PLXSN-iNOS;通过脂质体介导的DNA转染法将PLXSN-iNOS导入包装细胞PA317中;经G418筛选获得抗性克隆,命名为PA317/iNOS;提取抗性克隆细胞基因组DNA,用PCR进行鉴定;用NIH3T3细胞测定病毒上清滴度。结果PA317/iNOS细胞能稳定合成和分泌重组逆转录病毒颗粒,并在约142 bp处扩增出特异的片段;PLXSN-iNOS病毒上清的最高滴度为1.6×106CFU/mL。结论逆转录病毒载体PLXSN能有效介导iNOS基因的转染。
张子力
林京
黄晓玲
韩涛
关键词:
一氧化氮合酶
基因转移
逆转录病毒
iNOS转基因在血管平滑肌细胞的表达
2006年
目的研究逆转录病毒介导诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因在体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)中的表达。方法通过脂质体介导的DNA转染法将PLXSNiNOS导入PA317细胞中;经G418筛选获得抗性克隆;用NIH3T3细胞测定病毒上清滴度;将病毒上清转染体外培养的VSMC;采用RT-PCR、Westernblot检测VSMC内iNOS mRNA和蛋白的表达。结果PLXSNiNOS转染体外培养的VSMC 48 h后,在VSMC内可检测到外源性iNOS mRNA和蛋白;而用PLXSN转染体外培养的VSMC 48 h后未能检测到外源性iNOSmRNA和蛋白表达。结论逆转录病毒介导iNOS基因可高效转染体外培养的VSMC,并在细胞内表达iNOS蛋白。
林京
张子力
黄晓玲
韩涛
关键词:
一氧化氮合酶
基因转移
逆转录病毒科
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