国家自然科学基金(31272686)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:陈静孟庆国黄艳青王文顾伟更多>>
- 相关机构:中国水产科学研究院东海水产研究所南京师范大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 罗氏沼虾抗螺原体感染肝胰腺比较转录组分析
- 罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)是我国三大淡水虾养殖品种之一,目前罗氏沼虾出现性成熟提前,生长速度缓慢,抗病能力下降等现象,其中开展针对罗氏沼虾抗病相关研究,对该动物的保护与开发利用具有十分重...
- 张思源季文博欧江涛钟金城
- 关键词:罗氏沼虾螺原体固有免疫信号通路
- 红螯螯虾酚氧化酶原及其特性研究(英文)被引量:1
- 2015年
- 采用同源克隆策略和RACE技术,从红螯螯虾Cherax quadricarinatus血细胞中克隆得到酚氧化酶原基因的全长c DNA序列,共2951 bp,开放读码框为1995 bp,编码665个氨基酸。预测的分子量和等电点分别为75.7 k D和6.23。酚氧化酶原含有两个推测的tyrosinase copper-binding motifs(带有六个组氨酸残基)和一个thiol-ester-like motif,这些特征和其他甲壳动物的酚氧化酶原特征相同。红螯螯虾酚氧化酶原氨基酸序列与通讯螯虾Pacifastacus leniusculus、欧洲龙虾Homarus gammarus、美洲龙虾Homarus americanus和克氏原螯虾Procambarus clarkii酚氧化酶原的相似率分别为68%、63%、63%和59%。酚氧化酶原基因双酶切后连接入p ET-28a原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21后重组表达酚氧化酶原蛋白。在重组蛋白纯化后,免疫新西兰大耳兔制备得到的酚氧化酶原多克隆抗体,其效价大于1︰12800。红螯螯虾血淋巴、肝和鳃组织中的酚氧化酶原m RNA表达和酚氧化酶活性较高,而神经、心、肠和肌肉中较低。中华绒螯蟹螺原体和嗜水气单胞菌免疫红螯螯虾后,血淋巴细胞、肝和鳃组织中的酚氧化酶原和酚氧化酶活性在免疫后的不同时间均出现了显著性的增加,此结果表明酚氧化酶原和酚氧化酶在红螯螯虾对抗细菌感染的过程中起到重要的免疫作用。此结果为进一步深入研究酚氧化酶原基因和酚氧化酶的功能及其调控机理奠定基础。
- 顾伟陈静黄艳青靳明建孟庆国王文
- 关键词:酚氧化酶原嗜水气单胞菌红螯螯虾
- 口蹄疫O型、A型和AsiaⅠ型病毒RT-PCR分型方法的建立
- 2013年
- 该研究旨在建立一种快速、灵敏及准确的口蹄疫病毒(FMDV)鉴定与分型的RT-PCR检测技术平台,为临床中有效准确地检测口蹄疫病毒提供有力的支持。根据NCBI中公布的FMDV序列(GenBank:JF749861.1),设计FMDV通用检测引物FP1/FP2;根据NCBI中公布的FMDV O型、A型和Asia Ⅰ型序列,经过序列分析比对后,分别设计FMDV分型引物FO1/FO2、FA1/FA2和FAS1/FAS2。提取FMDVRNA后,利用随机引物扩增得到FMDV全cDNA,利用设计的引物进行PCR扩增及PCR反应条件的优化。结果表明:该研究建立的RT-PCR检测方法具有很好的特异性、敏感性和可重复性。成功建立了FMDV O型、A型和Asia Ⅰ型检测及分型方法,为口蹄疫疾病的临床检测。
- 上官陶王洪梅宋玲玲武建明于力何洪彬
- 关键词:口蹄疫RT-PCR